B-LCL-HROC195
Cell line · Artikelnummer 302043
B-LCL-HROC195 ist eine durch das Epstein-Barr-Virus (EBV) immortalisierte humane B-Lymphoblastoid-Zelllinie, die aus B-Lymphozyten etabliert wurde, die entweder aus Tumorgewebe isoliert wurden...
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- B-LCL-HROC195Cell line€800.00
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01Allgemeine Informationen
- Beschreibung
B-LCL-HROC195 ist eine durch das Epstein-Barr-Virus (EBV) immortalisierte humane B-Lymphoblastoid-Zelllinie, die aus B-Lymphozyten hergestellt wurde, die entweder aus Tumorgewebe oder aus peripherem Blut eines erwachsenen Patienten isoliert wurden. Die Zellen wurden durch ex vivo-Infektion mit EBV-haltigem Überstand aus der B95/8-Marmosettenzelllinie in Gegenwart von Cyclosporin A zur Unterdrückung des T- und NK-Zellwachstums erzeugt. Nach mehrwöchiger Kultur wurde ein stabiles Lymphoblastenwachstum erreicht, was zu einer kontinuierlich proliferierenden monoklonalen oder oligoklonalen B-Zellpopulation führte, die für eine langfristige In-vitro-Expansion geeignet ist.
Immunphänotypisch weist B-LCL-HROC195 ein reifes und aktiviertes B-Zell-Profil auf, das durch die Expression von CD19 und CD20 sowie durch hohe Konzentrationen von Aktivierungs- und Reifungsmarkern wie CD23 und CD80 gekennzeichnet ist. Die starke Expression von MHC-Klasse-I- und Klasse-II-Molekülen deutet auf eine erhaltene Antigenpräsentationsfähigkeit hin. Je nach individuellem Klon kann eine variable Expression von Differenzierungsmarkern wie CD27, CD38 oder CD138 beobachtet werden, die verschiedene Stadien der B-Zell-Reifung widerspiegeln. Die Zellen sind negativ für T-Zell-Marker, was die Spezifität der Linie bestätigt.
Funktionell sekretiert B-LCL-HROC195 Immunglobulin eines definierten Isotyps (z. B. IgG, IgM oder IgA), das während einer längeren Kultur stabil bleibt. Die sekretierten Antikörper können aus den Kulturüberständen gewonnen und für nachgelagerte Anwendungen verwendet werden, darunter Antigen-Bindungs-Assays, Tumorzellerkennungsstudien oder die Identifizierung von krankheitsassoziierten Antigenen. Als EBV-immortalisiertes B-Zell-Modell bietet B-LCL-HROC195 eine robuste In-vitro-Plattform für die Untersuchung von humoralen Immunantworten, B-Zell-Aktivierung und -Differenzierung sowie Antikörper-vermittelten Mechanismen im Kontext der Tumorimmunologie oder systemischer Immunantworten.
- Gewebe
- Peripheres Blut
- Krankheit
- Karzinom
- Synonyme
- Bc HROC195
02Klassifizierung
- Organismus
- Mensch
- Sex
- Weiblich
- Wachstumseigenschaften
- Aussetzung
- Biologische Sicherheitsstufe
- 2
03Merkmale
- Morphologie
- Runde Zellen
- Zelltyp
- B-Lymphoblasten
04Bezeichner
- Quellenangabe
- B-LCL-HROC195 (Cytion-Katalognummer 302043)
- NCBI-Steuer-ID
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_B7FC
05Expression und Anfälligkeit
- Oberflächenantigene
- CD19
- Viren
- Transformant: EBV
06Handhabung und Kultur
- Nährmedium
- RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiles Glutamin, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion-Artikelnummer 820700a)
- Inkubationsatmosphäre
37°C, 5%CO2, befeuchtete Atmosphäre.
- Nahrungsergänzungsmittel
- Ergänzen Sie das Medium mit 10% hitzeinaktiviertem FBS
- Subkultivierung
- Homogenisieren Sie die Zellsuspension im Kolben vorsichtig durch Auf- und Abpipettieren und entnehmen Sie dann eine repräsentative Probe, um die Zelldichte pro ml zu bestimmen. Verdünnen Sie die Suspension mit frischem Kulturmedium auf eine Zellkonzentration von 1 x 105 Zellen/ml und füllen Sie die angepasste Suspension zur weiteren Kultivierung in neue Kolben.
- Auftauen und Kultivierung
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Qualitätskontrolle und Kryokonservierung
- Sterilität
Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.
Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.
- Gefriermedium
- Als Kryokonservierungsmedium verwenden wir komplettes Wachstumsmedium (einschließlich FBS) + 10 % DMSO für eine angemessene Lebensfähigkeit nach dem Auftauen oder CM-1 (Cytion Katalognummer 800100), das optimierte Osmoprotektoren und Stoffwechselstabilisatoren enthält, um die Erholung zu verbessern und kryoinduzierten Stress zu reduzieren.
- Lagerbedingungen
Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.
- Versandbedingungen
Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.
08Spender
- Alter des Spenders
- Alter nicht spezifiziert
- Ethnische Zugehörigkeit
- Kaukasisch
09Rechtliches und Sicherheit
- Sicherheitshinweise
- Wenn Sie planen, ein Kryovial in flüssigem Stickstoff zu lagern, um es später aufzutauen, müssen Sie strenge Sicherheitsmaßnahmen einhalten. Geeignete Schutzhandschuhe und -kleidung sind unerlässlich, und beim Transfer der gefrorenen Proben in den oder aus dem Flüssigstickstofftank ist das Tragen einer Gesichtsmaske oder einer Schutzbrille erforderlich. Damit soll die Verletzungsgefahr durch mögliche Explosionen der Kryovials bei der Entnahme, die zum Herausschleudern von scharfen Fragmenten führen können, verringert werden.
- Garantie
Bei Cytion stehen wir hinter der Qualität und Lebensfähigkeit unserer Produkte. Wir garantieren, dass unsere Zellen zu Beginn der Kultur für 60 Tage nach dem Versand aus unseren Einrichtungen lebensfähig sind. Wir versichern, dass alle Materialien mit den im Analysezertifikat und/oder Produktblatt beschriebenen Spezifikationen übereinstimmen
Ausführliche Informationen finden Sie in unserer <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantieerklärung
- Es gelten Vereinbarungen mit Dritten
- Ja
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