B-LCL-HROC195

B-LCL-HROC195は、成人患者の腫瘍組織または末梢血から分離したBリンパ球を起源とする、エプスタイン・バーウイルス（EBV）不死化ヒトBリンパ芽球様細胞株である。 本細胞は、T細胞およびNK細胞の増殖を抑制するシクロスポリンAの存在下で、マーモセット細胞株B95/8由来のEBV含有上清によるex vivo感染により生成された。数週間の培養後、安定したリンパ芽球様細胞の増殖が達成され、長期的なin vitro増殖に適した持続的に増殖する単クローン性または寡クローン性のB細胞集団が得られた。

免疫表現型において、B-LCL-HROC195はCD19およびCD20の発現に加え、CD23やCD80などの高レベルの活性化・成熟マーカーを特徴とする成熟・活性化B細胞プロファイルを示す。MHCクラスIおよびクラスII分子の強い発現は、抗原提示能が保持されていることを示唆する。 個々のクローンによっては、B細胞成熟の異なる段階を反映し、CD27、CD38、CD138などの分化関連マーカーの発現にばらつきが認められる。T細胞マーカーは陰性であり、系統特異性が確認されている。

機能的には、B-LCL-HROC195は定義されたアイソタイプ（例：IgG、IgM、またはIgA）の免疫グロブリンを分泌し、長期培養中も安定して維持される。 分泌された抗体は培養上清から回収可能であり、抗原結合アッセイ、腫瘍細胞認識研究、疾患関連抗原の同定など、下流応用に使用できる。EBV不死化B細胞モデルとして、B-LCL-HROC195は腫瘍免疫学や全身性免疫応答の文脈における体液性免疫応答、B細胞活性化・分化、抗体介在性メカニズムを調査するための堅牢なin vitroプラットフォームを提供する。

37℃、5%_CO2、加湿雰囲気。

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

マイコプラズマ汚染は、PCRベースのアッセイと発光ベースのマイコプラズマ検出法の両方を用いて除外される。

細菌、真菌、酵母のコンタミネーションがないことを確認するため、細胞培養物は毎日目視検査が行われる。

長期保存の場合、バイアルを-150～-196℃の気相液体窒素に入れる。80℃での保存は、液体窒素に移す前の短い暫定措置としてのみ許容される。

凍結保存された細胞株は、輸送中約-78℃を維持するのに十分な保冷剤とともに、有効な断熱包装でドライアイスとともに輸送される。受領後、直ちに容器を検査し、遅滞なくバイアルを適切な保管場所に移してください。

サイシオンは、製品の品質と生存率を保証します。 当社では、培養を開始した時点で、当社施設からの出荷後60日間、細胞が生存可能であることを保証しています。 すべての材料が、分析証明書および／または製品シートに記載された仕様に適合していることを保証します。

詳細については、<a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Warranty Statement をご参照ください。