Mine otse sisu juurde
HuH-6
Kude
Maksa
Haigus
Hepatoblastoom
Sünonüümid
HUH-6, HuH 6, HuH6, HUH6, Huh6

Dokumendid

HuH-6

Cell line · Toote number 305092

The HuH-6 cell line is a human hepatoblastoma cell line derived from the liver tissue of a child diagnosed with hepatoblastoma, a rare malignant liver tum...

€800.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

HuH-6 rakuliin on inimese hepatoblastoomi rakuliin, mis on saadud hepatoblastoomi (haruldane pahaloomuline maksakasvaja, mis esineb peamiselt lastel) diagnoositud lapse maksakoes. HuH-6 rakkudel on maksaliinile iseloomulikud omadused, sealhulgas hepatotsüütidega seotud markerite, nagu alfa-fetoproteiin (AFP), albumiin ja tsütokeratiinid, ekspressioon. Need rakud on kultuuris kleepuvad ja neil on epiteeli morfoloogia, mis teeb neist väärtusliku in vitro mudeli maksa arengu, hepatoblastoomi patogeneesi ja maksaspetsiifiliste ainevahetusfunktsioonide uurimiseks.

HuH-6 rakud on eriti kasulikud pediaatriliste maksavähiuuringute puhul, kuna nad säilitavad paljud molekulaarsed tunnused, mida täheldatakse primaarsetes hepatoblastoomi kudedes. Nende hulka kuulub Wnt/β-kateniini signaaliülekande aktiveerimine, mis on sageli seotud hepatoblastoomi kasvajate tekkimisega. Seda rakuliini on kasutatud ka uuringutes, millega uuritakse kemoterapeutiliste ainete mõju, ravimite metabolismi ja resistentsuse mehhanisme, samuti on uuritud kasvaja progresseerumise ja diferentseerumisega seotud geeniekspressiooniprofiile. HuH-6 rakud on tänu nende reprodutseeritavusele ja järjepidevale kasvule usaldusväärne mudelisüsteem nii maksavähi alusuuringute kui ka prekliiniliste ravimite skriiningu jaoks.

Kude
Maksa
Haigus
Hepatoblastoom
Sünonüümid
  • HUH-6
  • HuH 6
  • HuH6
  • HUH6
  • Huh6

02Klassifikatsioon

Organism
Inimene
Sugu
Mees
Kasvuvõime
Järgija
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Morfoloogia
Epiteel

04Tunnused

Viide
HuH-6 (Cytioni kataloognumber 305092)
NCBI maksukood
9606
Cellosaurus
CVCL_4381

05Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
DMEM, w: 4,5 g/L glükoosi, w: 4 mM L-glutamiini, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM naatriumpüruvaati (Cytioni artikli number 820300a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS-ga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Vedeliku vahetus
2 kuni 3 korda nädalas
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

07Annetaja

Doonori vanus
1 aasta
Etniline kuuluvus
Aasia