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HuH-6
Tecido
Fígado
Doença
Hepatoblastoma
Sinónimos
HUH-6, HuH 6, HuH6, HUH6, Huh6

Documentos

HuH-6

Cell line · Número do produto 305092

The HuH-6 cell line is a human hepatoblastoma cell line derived from the liver tissue of a child diagnosed with hepatoblastoma, a rare malignant liver tum...

€800.00sem impostos nem portes de envio
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1

01Informações gerais

Descrição

A linha celular HuH-6 é uma linha celular de hepatoblastoma humano derivada do tecido hepático de uma criança a quem foi diagnosticado hepatoblastoma, um tumor hepático maligno raro que afecta principalmente doentes pediátricos. As células HuH-6 apresentam caraterísticas típicas da linhagem hepática, incluindo a expressão de marcadores associados aos hepatócitos, como a alfa-fetoproteína (AFP), a albumina e as citoqueratinas. Estas células são aderentes em cultura e apresentam uma morfologia epitelial, o que as torna um modelo in vitro valioso para o estudo do desenvolvimento do fígado, da patogénese do hepatoblastoma e das funções metabólicas específicas do fígado.

As células HuH-6 são particularmente úteis na investigação centrada nos cancros pediátricos do fígado, uma vez que mantêm muitas das caraterísticas moleculares observadas nos tecidos primários do hepatoblastoma. Estas incluem a ativação da sinalização Wnt/β-catenina, uma via frequentemente implicada na tumorigénese do hepatoblastoma. A linha celular também tem sido utilizada em estudos que investigam os efeitos dos agentes quimioterapêuticos, o metabolismo dos medicamentos e os mecanismos de resistência, bem como na exploração de perfis de expressão de genes associados à progressão e diferenciação do tumor. Devido à sua reprodutibilidade e caraterísticas de crescimento consistentes, as células HuH-6 constituem um sistema modelo robusto tanto para a investigação básica do cancro do fígado como para o rastreio pré-clínico de medicamentos.

Tecido
Fígado
Doença
Hepatoblastoma
Sinónimos
  • HUH-6
  • HuH 6
  • HuH6
  • HUH6
  • Huh6

02Classificação

Organismo
Humano
Sexo
Masculino
Propriedades de crescimento
Aderente
Nível de biossegurança
1

03Características

Morfologia
Epitelial

04Identificadores

Referência
HuH-6 (número de catálogo da Cytion 305092)
Número de identificação fiscal do NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_4381

05Manuseamento e cultura

Meio de cultura
DMEM, com: 4,5 g/L de glucose, com: 4 mM de L-Glutamina, com: 3,7 g/L de NaHCO3, com: 1,0 mM de piruvato de sódio (número de artigo Cytion 820300a)
Atmosfera de incubação

37°C, 5%CO2, atmosfera humidificada.

Suplementos
Completar o meio com 10% de FBS
Reagente de dissociação
Accutase
Subcultura
Retirar o meio antigo das células aderentes e lavá-las com PBS sem cálcio e magnésio. Nos frascos T25, utilizar 3-5 ml de PBS e nos frascos T75, 5-10 ml. Em seguida, cobrir completamente as células com Accutase, utilizando 1-2 ml para os frascos T25 e 2,5 ml para os frascos T75. Deixar as células incubar à temperatura ambiente durante 8-10 minutos para as destacar. Após a incubação, misturar suavemente as células com 10 ml de meio para as ressuspender e, em seguida, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Deitar fora o sobrenadante, ressuspender as células em meio fresco e transferi-las para novos frascos que já contenham meio fresco.
Renovação de fluidos
2 a 3 vezes por semana
Descongelamento e cultura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Controlo de qualidade e criopreservação

Esterilidade

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Meio de congelação
Como meio de criopreservação, utilizamos um meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% DMSO para uma viabilidade pós-descongelamento adequada, ou CM-1 (número de catálogo Cytion 800100), que inclui osmoprotectores optimizados e estabilizadores metabólicos para melhorar a recuperação e reduzir o stress induzido pela crio.
Condições de armazenamento

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

Condições de envio

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

07Doador

Idade do dador
1 ano
Etnia
Asiático