Aller directement au contenu
RBE
Tissu
Canal biliaire
Maladie
Cholangiocarcinome intrahépatique

Documents

RBE

Cell line · Référence du produit 305019

The RBE cell line is a human intrahepatic cholangiocarcinoma (CC) cell line derived from a 64-year-old female patient. This cell line was established alon...

€750.00hors taxes et frais de port

Personnalisation / Recommandations

En stock
Lot
Recommandé (lot le plus récent)
  • CoA
  • CoA
1

01Informations générales

Description

La lignée cellulaire RBE est une lignée cellulaire humaine de cholangiocarcinome intrahépatique (CC) dérivée d'une patiente de 64 ans. Cette lignée cellulaire a été établie parallèlement à une lignée sarcomatoïde (SSP-25) provenant du même nodule tumoral, mettant en évidence la coexistence de composants adénocarcinomateux et sarcomatoïdes au sein d'une même lésion de cholangiocarcinome intrahépatique. Les cellules de l'EBR se caractérisent par leur morphologie épithéliale, se développant en monocouche avec un aspect épithélial typique des cellules épithéliales.

Sur le plan phénotypique, la lignée cellulaire RBE exprime les principaux marqueurs associés au cholangiocarcinome. Il s'agit notamment des cytokératines CK7 et CK19, de la gamma-glutamyl transpeptidase (GGT), de l'antigène carcinoembryonnaire (CEA), de l'antigène glucidique 19-9 (CA19-9) et de la vimentine. En outre, la production de mucine est détectée dans environ la moitié des cellules de l'EBR, comme le montre la coloration périodique acide-Schiff (PAS). Ces caractéristiques confirment l'origine adénocarcinomique des cellules RBE et les distinguent de la lignée cellulaire SSP-25, qui ne présente pas d'expression de CEA, de CA19-9 et de mucine.

Tissu
Canal biliaire
Maladie
Cholangiocarcinome intrahépatique

02Classification

Organisme
Humain
Sexe
Femme
Propriétés de croissance
Adepte
Niveau de biosécurité
1

03Caractéristiques

Morphologie
Épithéliale

04Identifiants

Référence
RBE (numéro de catalogue Cytion 305019)
Numéro d'identification fiscale NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_4896

05Manipulation et culture

Milieu de culture
RPMI 1640, w : 2.0 mM Glutamine stable, w : 2.0 g/L NaHCO3 (numéro d'article Cytion 820700a)
Atmosphère d'incubation

37°C, 5%CO2, atmosphère humidifiée.

Compléments alimentaires
Compléter le milieu avec 10% de FBS
Réactif de dissociation
Accutase
Repiquage
Retirer l'ancien milieu des cellules adhérentes et les laver avec du PBS dépourvu de calcium et de magnésium. Pour les flacons T25, utiliser 3-5 ml de PBS, et pour les flacons T75, 5-10 ml. Ensuite, recouvrir complètement les cellules avec Accutase, en utilisant 1 à 2 ml pour les flacons T25 et 2,5 ml pour les flacons T75. Laisser les cellules incuber à température ambiante pendant 8-10 minutes pour les détacher. Après incubation, mélanger délicatement les cellules avec 10 ml de milieu pour les remettre en suspension, puis centrifuger à 300xg pendant 3 minutes. Jeter le surnageant, remettre les cellules en suspension dans du milieu frais et les transférer dans de nouveaux flacons contenant déjà du milieu frais.
Renouvellement des fluides
2 à 3 fois par semaine
Décongélation et mise en culture
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Contrôle qualité et cryoconservation

Stérilité

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes basées sur la luminescence.

Pour s'assurer de l'absence de contamination bactérienne, fongique ou levurienne, les cultures cellulaires font l'objet d'inspections visuelles quotidiennes.

Milieu de congélation
Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons un milieu de croissance complet (comprenant du FBS) + 10 % de DMSO pour une viabilité adéquate après décongélation, ou CM-1 (numéro de catalogue 800100 de Cytion), qui comprend des osmoprotectants et des stabilisateurs métaboliques optimisés pour améliorer la récupération et réduire le stress induit par la cryogénisation.
Conditions de stockage

Pour une conservation à long terme, placer les flacons dans de l'azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre -150 et -196 °C environ. Le stockage à -80 °C n'est acceptable qu'en tant qu'étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l'azote liquide.

Conditions de livraison

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées sur glace sèche dans des emballages isolés et validés, avec suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d'environ -78 °C tout au long du transport. À la réception, inspecter immédiatement le conteneur et transférer sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

07Donateur

Âge du donneur
64 ans