Μετάβαση στο περιεχόμενο
RBE
Ιστός
Χολικός πόρος
Ασθένεια
Ενδοηπατικό χολαγγειοκαρκίνωμα

Έγγραφα

RBE

Cell line · Αριθμός προϊόντος 305019

The RBE cell line is a human intrahepatic cholangiocarcinoma (CC) cell line derived from a 64-year-old female patient. This cell line was established alon...

€750.00χωρίς ΦΠΑ και έξοδα αποστολής

Προσαρμογή / Προτάσεις

Σε απόθεμα
Lot
Συνιστάται (η πιο φρέσκια παρτίδα)
  • CoA
  • CoA
1

01Γενικές πληροφορίες

Περιγραφή

Η κυτταρική σειρά RBE είναι μια ανθρώπινη κυτταρική σειρά ενδοηπατικού χολαγγειοκαρκινώματος (CC) που προέρχεται από γυναίκα ασθενή 64 ετών. Αυτή η κυτταρική σειρά δημιουργήθηκε παράλληλα με μια αντίστοιχη σαρκωματοειδή (SSP-25) από τον ίδιο οζίδιο όγκου, αναδεικνύοντας τη συνύπαρξη αδενοκαρκινώματος και σαρκωματοειδών συστατικών σε μια ενιαία CC βλάβη. Τα κύτταρα RBE χαρακτηρίζονται από την επιθηλιακή μορφολογία τους, αναπτύσσονται ως μονοστρωματικά με εμφάνιση που μοιάζει με επιθηλιακή, η οποία είναι χαρακτηριστική των επιθηλιακών κυττάρων.

Φαινοτυπικά, η κυτταρική σειρά RBE εκφράζει βασικούς δείκτες που σχετίζονται με το χολαγγειοκαρκίνωμα. Σε αυτούς περιλαμβάνονται οι κυτταροκερατίνες CK7 και CK19, η γ-γλουταμυλική τρανσπεπτιδάση (GGT), το καρκινοεμβρυϊκό αντιγόνο (CEA), το υδατανθρακικό αντιγόνο 19-9 (CA19-9) και η βιμεντίνη. Επιπλέον, η παραγωγή βλεννίνης ανιχνεύεται περίπου στα μισά κύτταρα RBE, όπως αποδεικνύεται από τη χρώση με περιοδικό οξύ-Schiff (PAS). Τα χαρακτηριστικά αυτά επιβεβαιώνουν την αδενοκαρκινική προέλευση των κυττάρων RBE και τα διακρίνουν από την κυτταρική σειρά SSP-25, η οποία στερείται έκφρασης CEA, CA19-9 και βλεννίνης.

Ιστός
Χολικός πόρος
Ασθένεια
Ενδοηπατικό χολαγγειοκαρκίνωμα

02Ταξινόμηση

Οργανισμός
Άνθρωπος
Σεξ
Γυναίκα
Ιδιότητες ανάπτυξης
Πιστός
Επίπεδο βιοασφάλειας
1

03Χαρακτηριστικά

Μορφολογία
Επιθηλιακό

04Αναγνωριστικά

Παραπομπή
RBE (αριθμός καταλόγου Cytion 305019)
Αριθμός φορολογικού μητρώου NCBI
9606
Κελλοσαύρος
CVCL_4896

05Χειρισμός και καλλιέργεια

Θρεπτικό μέσο
RPMI 1640, w: 2,0 mM σταθερής γλουταμίνης, w: 2,0 g/L NaHCO3 (αριθμός άρθρου Cytion 820700a)
Ατμόσφαιρα επώασης

37°C, 5%CO2, υγροποιημένη ατμόσφαιρα.

Συμπληρώματα
Συμπληρώστε το μέσο με 10% FBS
Αντιδραστήριο αποσύνδεσης
Accutase
Αναπαραγωγή σε υποκαλλιέργεια
Αφαιρέστε το παλιό μέσο από τα προσκολλημένα κύτταρα και πλύντε τα με PBS που δεν περιέχει ασβέστιο και μαγνήσιο. Για φιάλες T25, χρησιμοποιήστε 3-5 ml PBS και για φιάλες T75, χρησιμοποιήστε 5-10 ml. Στη συνέχεια, καλύψτε πλήρως τα κύτταρα με Accutase, χρησιμοποιώντας 1-2 ml για φιάλες T25 και 2,5 ml για φιάλες T75. Αφήστε τα κύτταρα να επωαστούν σε θερμοκρασία δωματίου για 8-10 λεπτά για να αποκολληθούν. Μετά την επώαση, αναμείξτε απαλά τα κύτταρα με 10 ml μέσου για να ανασυσταθούν και, στη συνέχεια, φυγοκεντρίστε στα 300xg για 3 λεπτά. Απορρίψτε το υπερκείμενο υγρό, ανασυστάστε τα κύτταρα σε φρέσκο μέσο και μεταφέρετέ τα σε νέες φιάλες που περιέχουν ήδη φρέσκο μέσο.
Ανανέωση υγρών
2 έως 3 φορές την εβδομάδα
Απόψυξη και καλλιέργεια
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Έλεγχος ποιότητας και κρυοσυντήρηση

Στειρότητα

Η μόλυνση από μυκόπλασμα αποκλείεται με τη χρήση τόσο των δοκιμασιών που βασίζονται στην PCR όσο και των μεθόδων ανίχνευσης μυκοπλάσματος με βάση τη φωταύγεια.

Για να διασφαλιστεί ότι δεν υπάρχει μόλυνση από βακτήρια, μύκητες ή ζύμες, οι κυτταροκαλλιέργειες υποβάλλονται σε καθημερινές οπτικές επιθεωρήσεις.

Μέσο κατάψυξης
Ως μέσο κρυοσυντήρησης, χρησιμοποιούμε πλήρες μέσο ανάπτυξης (συμπεριλαμβανομένου του FBS) + 10% DMSO για επαρκή βιωσιμότητα μετά την απόψυξη, ή CM-1 (αριθμός καταλόγου Cytion 800100), το οποίο περιλαμβάνει βελτιστοποιημένα ωσμοπροστατευτικά και μεταβολικούς σταθεροποιητές για την ενίσχυση της ανάκαμψης και τη μείωση του στρες που προκαλείται από την κρυοσυντήρηση.
Συνθήκες αποθήκευσης

Για μακροχρόνια συντήρηση, τοποθετήστε τα φιαλίδια σε υγρό άζωτο σε φάση ατμών σε θερμοκρασία περίπου -150 έως -196 °C. Η αποθήκευση στους -80 °C είναι αποδεκτή μόνο ως σύντομο ενδιάμεσο βήμα πριν από τη μεταφορά σε υγρό άζωτο.

Όροι αποστολής

Οι κρυοσυντηρημένες κυτταρικές σειρές αποστέλλονται σε ξηρό πάγο σε επικυρωμένη, μονωμένη συσκευασία με επαρκές ψυκτικό μέσο για τη διατήρηση περίπου των -78 °C καθ' όλη τη διάρκεια της μεταφοράς. Κατά την παραλαβή, επιθεωρήστε αμέσως τον περιέκτη και μεταφέρετε τα φιαλίδια χωρίς καθυστέρηση στην κατάλληλη αποθήκη.

07Δωρητής

Ηλικία δωρητή
64 χρόνια