الانتقال إلى المحتوى
RBE
الأنسجة
القناة الصفراوية
المرض
سرطان الأقنية الصفراوية داخل الكبد

المستندات

RBE

Cell line · رقم المنتج 305019

The RBE cell line is a human intrahepatic cholangiocarcinoma (CC) cell line derived from a 64-year-old female patient. This cell line was established alon...

€750.00باستثناء الضريبة وتكاليف الشحن

التخصيص / التوصيات

متوفر
لوت
موصى بها (أحدث دفعة)
  • CoA
  • CoA
1

01معلومات عامة

الوصف

الخط الخلوي RBE هو خط خلوي لسرطان الأقنية الصفراوية داخل الكبد (CC) مستخلص من مريضة تبلغ من العمر 64 عاماً. تم إنشاء هذا الخط الخلوي جنبًا إلى جنب مع نظير ساركوما ساركوما (SSP-25) من نفس العقدة الورمية، مما يسلط الضوء على التعايش بين مكونات السرطان الغدي والساركوما داخل آفة واحدة من سرطان القنوات الصفراوية. تتميز خلايا RBE بتشكلها الظهاري، حيث تنمو كطبقة أحادية ذات مظهر يشبه الخلايا الظهارية، وهو أمر نموذجي للخلايا الظهارية.

من الناحية النمطية، يعبر خط خلايا RBE عن العلامات الرئيسية المرتبطة بسرطان القنوات الصفراوية. وتشمل هذه العلامات السيتوكيراتين CK7 وCK19، وغاما-غلوتاميل ترانسببتيداز (GGT)، ومستضد الكارسينو الدموي (CEA)، ومستضد الكربوهيدرات 19-9 (CA19-9)، والفيمينتين. بالإضافة إلى ذلك، تم الكشف عن إنتاج الميوسين في ما يقرب من نصف خلايا RBE، كما يتضح من تلوين الحمض الدوري - شيف (PAS). تؤكد هذه الميزات أصل الخلايا السرطانية الغدية لخلايا RBE وتميزها عن خط خلايا SSP-25، الذي يفتقر إلى CEA و CA19-9 وتعبير الميوسين.

الأنسجة
القناة الصفراوية
المرض
سرطان الأقنية الصفراوية داخل الكبد

02التصنيف

كائن حي
إنسان
الجنس
أنثى
خصائص النمو
الملتزم
مستوى السلامة البيولوجية
1

03الخصائص

المورفولوجيا
الظهارة

04المعرّفات

المرجع
RBE (رقم الكتالوج لدى Cytion: 305019)
رقم التعريف الضريبي لدى NCBI
9606
سيلوصور
CVCL_4896

05التعامل مع النباتات وزراعتها

وسط الاستزراع
RPMI 1640، ث: 2.0 مللي مولار جلوتامين مستقر، ث: 2.0 جم/لتر NaHCO3 (رقم المادة 820700a من سايتيون)
بيئة الحضانة

37 درجة مئوية، و5% من ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.

المكملات الغذائية
قم بتزويد الوسط ب 10٪ من ال FBS
كاشف التفكك
أكوتاس
إعادة الاستنبات
قم بإزالة الوسط القديم من الخلايا الملتصقة واغسلها باستخدام PBS الذي يفتقر إلى الكالسيوم والمغنيسيوم. بالنسبة لقوارير T25، استخدم 3-5 مل من PBS، وبالنسبة لقوارير T75، استخدم 5-10 مل. ثم، قم بتغطية الخلايا بالكامل باستخدام أكوتاز، باستخدام 1-2 مل لقوارير T25 و2.5 مل لقوارير T75. دع الخلايا تحتضن في درجة حرارة الغرفة لمدة 8-10 دقائق لفصلها. بعد الحضانة، اخلط الخلايا برفق مع 10 مل من الوسط لإعادة ترسيبها، ثم اطردها مركزيًا بسرعة 300xg لمدة 3 دقائق. تخلص من المادة الطافية، وأعد غمر الخلايا في وسط جديد وانقلها إلى قوارير جديدة تحتوي بالفعل على وسط جديد.
تجديد السوائل
2 إلى 3 مرات في الأسبوع
إذابة الثلج والزراعة
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06مراقبة الجودة والحفظ بالتبريد

العقم

يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على التألق.

ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.

وسط التجميد
كوسيط للحفظ بالتبريد، نستخدم وسط نمو كامل (بما في ذلك FBS) + 10% DMSO من أجل الحفاظ على حيوية كافية بعد ذوبان الجليد أو CM-1 (كتالوج Cytion رقم 800100)، والذي يتضمن مواد حماية أسموزموبيروتيكتية ومثبتات أيضية مُحسّنة لتعزيز التعافي وتقليل الإجهاد الناجم عن التبريد.
شروط التخزين

للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.

شروط الشحن

تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.

07المانح

عمر المتبرع
64 سنة