Tartalomra ugrás
B-LCL-HROC103
Szövet
Perifériás vér
Betegség
Karcinóma
Szinonimák
Bc HROC103

Dokumentumok

B-LCL-HROC103

Cell line · Termékszám 302020

A B-LCL-HROC103 egy Epstein-Barr-vírus (EBV) által halhatatlanná tett emberi B-limfoblasztos sejtvonal, amelyet daganatos szövetekből izolált B-limfocitákból hoztak létre...

€800.00adó és szállítási költség nélkül

Személyre szabás / Ajánlások

Raktáron van
Lot
Ajánlott (a legfrissebb tétel)
1

01Általános információk

Leírás

A B-LCL-HROC103 egy Epstein-Barr vírus (EBV) által halhatatlanná tett humán B-limfoblasztos sejtvonal, amelyet felnőtt betegek tumoros szövetéből vagy perifériás véréből izolált B-limfocitákból hoztak létre. A sejteket ex vivo fertőzéssel hozták létre EBV-t tartalmazó felülúszóval, amelyet a B95/8 marmoset sejtvonalból nyertek ki ciklosporin A jelenlétében a T- és NK-sejtek növekedésének gátlása érdekében. Több hetes tenyésztés után stabil limfoblasztos növekedést értek el, amelynek eredményeként folyamatosan szaporodó monoklonális vagy oligoklonális B-sejt populáció jött létre, amely alkalmas hosszú távú in vitro szaporodásra.

Immunfenotípusában a B-LCL-HROC103 érett és aktivált B-sejt profilt mutat, amelyet CD19 és CD20 expresszió, valamint magas szintű aktivációs és érési markerek, például CD23 és CD80 jellemeznek. Az MHC I. és II. osztályú molekulák erős expressziója az antigénprezentáló képesség megőrződését jelzi. Az egyes klónoktól függően változó expresszió figyelhető meg a differenciálódással kapcsolatos markerek, például a CD27, CD38 vagy CD138 esetében, ami a B-sejtek érésének különböző stádiumait tükrözi. A sejtek negatívak a T-sejt markerekre, ami megerősíti a vonal specifitását.

Funkcionálisan a B-LCL-[MODELL NÉV] meghatározott izotípusú immunglobulint (pl. IgG, IgM vagy IgA) szekretál, amely hosszan tartó tenyésztés során is stabil marad. A kiválasztott antitestek a tenyészet felülúszójából gyűjthetők össze és felhasználhatók további alkalmazásokhoz, beleértve az antigénkötő vizsgálatokat, a tumorsejt-felismerési tanulmányokat vagy a betegségekkel kapcsolatos antigének azonosítását. EBV-immortalizált B-sejt modellként a B-LCL-HROC103 robusztus in vitro platformot biztosít a humorális immunválaszok, a B-sejtek aktiválása és differenciálódása, valamint az antitestek által közvetített mechanizmusok vizsgálatához a tumorimmunológia vagy a szisztémás immunválaszok kontextusában.

Szövet
Perifériás vér
Betegség
Karcinóma
Szinonimák
  • Bc HROC103

02Osztályozás

Organizmus
Ember
Szex
Férfi
Növekedési tulajdonságok
Felfüggesztés
Biológiai biztonsági szint
2

03Jellemzők

Morfológia
Kerek cellák
Sejttípus
B lymphoblast

04Azonosítók

Hivatkozás
B-LCL-HROC103 (Cytion katalógusszám: 302020)
NCBI adóazonosító szám
9606
Cellosaurus
CVCL_B7FE

05Kifejeződés és fogékonyság

Felszíni antigének
CD19
Vírusok
Transzformáns: EBV

06Kezelés és tenyésztés

Táptalaj
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabil glutamin, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion 820700a cikkszám)
Inkubációs környezet

37°C, 5%CO2, párásított légkör.

Kiegészítők
A táptalajt 10% hővel inaktivált FBS-szel egészítsük ki
Átültetés
A lombikban lévő sejtszuszpenziót óvatosan homogenizálja fel-le pipettázással, majd vegyen egy reprezentatív mintát a sejtsűrűség ml-enkénti meghatározásához. A szuszpenziót hígítsa friss tenyésztőközeggel 1 x 105 sejt/ml sejtkoncentráció eléréséig, majd az így beállított szuszpenziót új lombikokba osztva továbbtenyésztse.
Felolvasztás és tenyésztés
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Minőségellenőrzés és kriokonzerválás

Meddőség

A mikoplazma-szennyeződést mind a PCR-alapú vizsgálatokkal, mind a lumineszcencia-alapú mikoplazma-kimutatási módszerekkel kizárják.

A bakteriális, gombás vagy élesztőgombás szennyeződés elkerülése érdekében a sejtkultúrákat napi vizuális ellenőrzésnek vetik alá.

Fagyasztóközeg
Krioprezerváló táptalajként teljes növekedési táptalajt (beleértve az FBS-t) + 10% DMSO-t használunk a megfelelő kiolvasztás utáni életképesség érdekében, vagy CM-1-et (Cytion katalógusszám: 800100), amely optimalizált ozmoprotektánsokat és metabolikus stabilizátorokat tartalmaz a regenerálódás fokozása és a krio-indukált stressz csökkentése érdekében.
Tárolási feltételek

Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.

Szállítási feltételek

A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.

08Adományozó

Az adományozó életkora
Meghatározatlan életkor
Etnikai hovatartozás
Kaukázusi