Skip to content
B-LCL-HROC103
Tissue
เลือดส่วนปลาย
Disease
มะเร็งชนิดคาร์ซินอมา
Synonyms
Bc HROC103

Documents

B-LCL-HROC103

Cell line · Product number 302020

B-LCL-HROC103 is an Epstein-Barr virus (EBV)-immortalized human B lymphoblastoid cell line established from B lymphocytes isolated from either tumor tissu...

€800.00excl. tax and shipping

Customization / Recommendations

In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
1

01General information

Description

B-LCL-HROC103 เป็นเซลล์ไลน์ลิมโฟบลาสต์ของมนุษย์ที่คงสภาพความเป็นอมตะด้วยไวรัสเอปสไตน์-บาร์ (EBV) ซึ่งสร้างขึ้นจากลิมโฟไซต์บีที่แยกได้จากเนื้อเยื่อเนื้องอกหรือเลือดส่วนปลายของผู้ป่วยผู้ใหญ่ เซลล์ถูกสร้างขึ้นโดยการติดเชื้อ ex vivo ด้วยซูเปอร์นาทานต์ที่มีเชื้อ EBV จากสายพันธุ์เซลล์ B95/8 ของลิงมาร์โมเซตในสภาวะที่มีไซโคลสปอริน A เพื่อยับยั้งการเจริญเติบโตของเซลล์ T และ NK หลังจากเพาะเลี้ยงเป็นเวลาหลายสัปดาห์ การเจริญเติบโตของลิมโฟบลาสโตอยด์ที่คงตัวก็เกิดขึ้น ส่งผลให้เกิดประชากรเซลล์ B แบบโมโนโคลนอลหรือโอลิโกโคลนอลที่เพิ่มจำนวนอย่างต่อเนื่อง ซึ่งเหมาะสำหรับการขยายตัวในหลอดทดลองระยะยาว

ในเชิงภูมิคุ้มกันฟีโนไทป์ B-LCL-HROC103 แสดงลักษณะของเซลล์บีที่เจริญเต็มที่และถูกกระตุ้น โดยมีลักษณะเด่นคือการแสดงออกของ CD19 และ CD20 ร่วมกับระดับสูงของตัวบ่งชี้การกระตุ้นและการเจริญเต็มที่ เช่น CD23 และ CD80 การแสดงออกอย่างเข้มข้นของโมเลกุล MHC คลาส I และคลาส II บ่งชี้ถึงความสามารถในการนำเสนอแอนติเจนที่ยังคงอยู่ ขึ้นอยู่กับโคลนแต่ละตัว อาจพบการแสดงออกของตัวบ่งชี้ที่เกี่ยวข้องกับการแยกตัวที่แตกต่างกัน เช่น CD27, CD38 หรือ CD138 ในระดับที่แตกต่างกัน ซึ่งสะท้อนถึงระยะต่าง ๆ ของการเจริญเติบโตของเซลล์บี (B-cell) เซลล์เหล่านี้ไม่มีตัวบ่งชี้ของเซลล์ที (T-cell) ซึ่งยืนยันถึงความจำเพาะของสายพันธุ์

ในเชิงหน้าที่ B-LCL-[ชื่อรุ่น] ผลิตอิมมูโนโกลบูลินของไอโซไทป์ที่กำหนด (เช่น IgG, IgM หรือ IgA) ซึ่งยังคงเสถียรในระหว่างการเพาะเลี้ยงเป็นเวลานาน แอนติบอดีที่ถูกหลั่งออกมาสามารถเก็บได้จากซุปเปอร์นาแทนท์ของวัฒนธรรมและนำไปใช้ในกระบวนการต่อไปได้ เช่น การทดสอบการจับแอนติเจน การศึกษาการจำแนกเซลล์มะเร็ง หรือการระบุแอนติเจนที่เกี่ยวข้องกับโรค ในฐานะที่เป็นแบบจำลองเซลล์บีที่ถูกทำให้เป็นอมตะด้วย EBV, B-LCL-HROC103 ให้แพลตฟอร์มในหลอดทดลองที่แข็งแกร่งสำหรับการศึกษาการตอบสนองทางภูมิคุ้มกันแบบฮูโมรัล การกระตุ้นและการแยกแยะของเซลล์บี และกลไกที่เกิดจากแอนติบอดีในบริบทของภูมิคุ้มกันของมะเร็งหรือการตอบสนองทางภูมิคุ้มกันแบบระบบ

Tissue
เลือดส่วนปลาย
Disease
มะเร็งชนิดคาร์ซินอมา
Synonyms
  • Bc HROC103

02Classification

Organism
Human
Sex
Male
Growth properties
Suspension
Biosafety level
2

03Characteristics

Morphology
เซลล์กลม
Cell type
ลิมโฟบลาสต์ชนิดบี

04Identifiers

Citation
B-LCL-HROC103 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 302020)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_B7FE

05Expression and susceptibility

Surface antigens
ซีดี19
Viruses
ทรานส์ฟอร์แมนท์: EBV

06Handling and culture

Culture medium
RPMI 1640, w: 2.0 mM กลูตามีนเสถียร, w: 2.0 กรัม/ลิตร NaHCO3 (หมายเลขบทความ Cytion 820700a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, บรรยากาศชื้น

Supplements
เติมอาหารเลี้ยงเชื้อด้วย FBS ที่ทำให้ไม่ทำงานทางชีวภาพด้วยความร้อน 10%
Subculturing
ค่อยๆ ปรับให้เซลล์ในขวดมีความสม่ำเสมอโดยการดูดและปล่อยขึ้นลง จากนั้นนำตัวอย่างที่เป็นตัวแทนมาเพื่อกำหนดความหนาแน่นของเซลล์ต่อมิลลิลิตร เจือจางสารแขวนลอยให้ได้ความเข้มข้นของเซลล์ 1 x 105 เซลล์/มิลลิลิตร ด้วยอาหารเลี้ยงเชื้อใหม่ และแบ่งสารแขวนลอยที่ปรับแล้วใส่ขวดใหม่สำหรับการเพาะเลี้ยงต่อไป
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง

เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

Freeze medium
ในฐานะที่เป็นสารอาหารสำหรับการแช่แข็ง เราใช้สารอาหารสำหรับการเจริญเติบโตแบบครบถ้วน (รวมถึง FBS) + 10% DMSO เพื่อความมีชีวิตหลังการละลายที่เพียงพอ หรือ CM-1 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 800100) ซึ่งรวมถึงสารป้องกันออสโมติกและสารรักษาเสถียรภาพเมตาบอลิซึมที่ได้รับการปรับให้เหมาะสมเพื่อเพิ่มการฟื้นตัวและลดความเครียดที่เกิดจากการแช่แข็ง
Storage conditions

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

Shipping conditions

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

08Donor

Donor age
อายุไม่ระบุ
Ethnicity
คอเคเชียน