Tartalomra ugrás
R 1610
Szövet
Tüdő
Betegség
Normál tüdőfibroblaszt (galaktokináz-hiányos; EMS-mutagénnel módosított V79-származék; 2-dezoxigalaktóz- és 8-azaguanin-rezisztens)
Áttétes hely
Nem alkalmazható (kínai hörcsög tüdőfibroblaszt sejtvonal; nem daganati minta)

Dokumentumok

R 1610

Cell line · Termékszám 305011

Ez a sejtvonal a V79-sejtek klónos származéka, amelyeket etil-metán-szulfonáttal kezeltek. A sejtek galaktokináz-hiányosak és rezisztensek...

€420.00adó és szállítási költség nélkül

Személyre szabás / Ajánlások

Raktáron van
Lot
Ajánlott (a legfrissebb tétel)
  • CoA
1

01Általános információk

Leírás
Ez a sejtvonal a V79-sejtek klonális származéka, amelyeket etil-metán-szulfonáttal kezeltek. A sejtek galaktokináz-hiányosak, és rezisztensek a 2-dezoxi-galaktózra és a 8-azaguaninra.
Szövet
Tüdő
Betegség
Normál tüdőfibroblaszt (galaktokináz-hiányos; EMS-mutagénnel módosított V79-származék; 2-dezoxigalaktóz- és 8-azaguanin-rezisztens)
Áttétes hely
Nem alkalmazható (kínai hörcsög tüdőfibroblaszt sejtvonal; nem daganati minta)
Alkalmazások
Mutációkutatás; genetikai toxikológia; genotoxicitási vizsgálatok; a galaktokináz-hiány komplementációjának vizsgálata; a HPRT-hiányos V79 szülősejt genetikája; CHO/V79 modellek összehasonlítása; DNS-javítási kutatás

02Osztályozás

Organizmus
kínai hörcsög
Szex
Férfi
Növekedési tulajdonságok
Hűséges
GMO-státusz
GMO-mentes
A GMO-státuszra vonatkozó részletek
No genetic modification (mutagenesis by EMS is a chemical mutagen treatment, not stable transgene introduction); carries galactokinase deficiency and 8-azaguanine resistance arising from endogenous mutations
Biológiai biztonsági szint
1

03Jellemzők

Morfológia
Fibroblaszt-szerű
Sejttípus
Fibroblasztok
Kariotípus
2n=22
Kettőzési idő
kb. 14–18 óra (a V79-ből származtatva; gyors szaporodás)

04Azonosítók

Hivatkozás
V79-GalK1 (Cytion katalógusszám: 305011)
NCBI adóazonosító szám
10029
Cellosaurus
CVCL_2989

05Kezelés és tenyésztés

Táptalaj
DMEM, w: 4,5 g/L glükóz, w: 4 mM L-Glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM nátrium-piruvát (Cytion cikkszám 820300a)
Inkubációs környezet

37°C, 5%CO2, párásított légkör.

Kiegészítők
A táptalajt egészítsük ki 10% FBS-szel
Diszociációs reagens
Accutase
Átültetés
Távolítsa el a régi táptalajt a megtapadt sejtekről, és mossa őket kalcium- és magnéziummentes PBS-szel. T25-ös lombikokhoz 3-5 ml PBS-t, T75-ös lombikokhoz pedig 5-10 ml-t használjunk. Ezután fedjük be a sejteket teljesen Accutase-zal, T25 lombikok esetében 1-2 ml-t, T75 lombikok esetében 2,5 ml-t használva. A sejteket 8-10 percig hagyjuk szobahőmérsékleten inkubálni, hogy leváljanak. Az inkubálás után óvatosan keverjük össze a sejteket 10 ml tápfolyadékkal, hogy reszuszpendáljuk őket, majd centrifugáljuk 300xg-nél 3 percig. Dobja el a felülúszót, szuszpendálja újra a sejteket friss tápfolyadékban, és helyezze át őket új lombikokba, amelyek már friss tápfolyadékot tartalmaznak.
Osztási arány
1–5
Ültetési sűrűség
2–4 × 10⁴/cm²
Folyadékcsere
hetente 2-3 alkalommal
Felolvasztás és tenyésztés

  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Minőségellenőrzés és kriokonzerválás

Meddőség

A mikoplazma-szennyeződést mind a PCR-alapú vizsgálatokkal, mind a lumineszcencia-alapú mikoplazma-kimutatási módszerekkel kizárják.

A bakteriális, gombás vagy élesztőgombás szennyeződés elkerülése érdekében a sejtkultúrákat napi vizuális ellenőrzésnek vetik alá.

Fagyasztóközeg
Krioprezerváló táptalajként teljes növekedési táptalajt (beleértve az FBS-t) + 10% DMSO-t használunk a megfelelő kiolvasztás utáni életképesség érdekében, vagy CM-1-et (Cytion katalógusszám: 800100), amely optimalizált ozmoprotektánsokat és metabolikus stabilizátorokat tartalmaz a regenerálódás fokozása és a krio-indukált stressz csökkentése érdekében.
Tárolási feltételek

Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.

Szállítási feltételek

A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.

07Adományozó

Etnikai hovatartozás
Nem alkalmazható (kínai hörcsög sejtvonal)