Skip to content
V79-GalK1
Tissue
ปอด
Disease
เซลล์ไฟโบรบลาสต์ปอดปกติ (ขาดเอนไซม์กาแลคโตคินาเซ; สายพันธุ์ V79 ที่ถูกดัดแปลงพันธุกรรมด้วย EMS; ทนต่อ 2-เดโอคซีกาแลคโตส และ 8-อาซาควานีน)
Metastatic site
ไม่เกี่ยวข้อง (สายเซลล์ไฟโบรบลาสต์ปอดของแฮมสเตอร์จีน; ไม่ใช่ตัวอย่างเนื้องอก)

Documents

V79-GalK1

Cell line · Product number 305011

This cell line is a clonal derivative of V79 cells that had been treated with ethylmethanesulfonate. The cells are deficient in galactokinase and are resista...

€420.00excl. tax and shipping

Customization / Recommendations

In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description
สายเซลล์นี้เป็นสายเซลล์โคลนที่ได้มาจากการแยกจากเซลล์ V79 ซึ่งได้รับการรักษาด้วยเอทิลเมทานซัลโฟเนต เซลล์เหล่านี้ขาดเอนไซม์กาแลคโตคินาเซ และมีความต้านทานต่อ 2-เดโอคซีกาแลคโตส และ 8-อาซาควานีน
Tissue
ปอด
Disease
เซลล์ไฟโบรบลาสต์ปอดปกติ (ขาดเอนไซม์กาแลคโตคินาเซ; สายพันธุ์ V79 ที่ถูกดัดแปลงพันธุกรรมด้วย EMS; ทนต่อ 2-เดโอคซีกาแลคโตส และ 8-อาซาควานีน)
Metastatic site
ไม่เกี่ยวข้อง (สายเซลล์ไฟโบรบลาสต์ปอดของแฮมสเตอร์จีน; ไม่ใช่ตัวอย่างเนื้องอก)
Applications
การวิจัยเกี่ยวกับการกลายพันธุ์; พิษวิทยาทางพันธุกรรม; การทดสอบความเป็นพิษต่อพันธุกรรม; การศึกษาการเสริมความบกพร่องของเอนไซม์กาแลคโตคินาเซ; พันธุศาสตร์ของเซลล์ V79 ซึ่งเป็นเซลล์แม่ที่ขาดเอนไซม์ HPRT; การเปรียบเทียบแบบจำลอง CHO/V79; การวิจัยเกี่ยวกับการซ่อมแซมดีเอ็นเอ

02Classification

Organism
Chinese hamster
Sex
Male
Growth properties
Adherent
GMO status
Non-GMO
GMO status details
No genetic modification (mutagenesis by EMS is a chemical mutagen treatment, not stable transgene introduction); carries galactokinase deficiency and 8-azaguanine resistance arising from endogenous mutations
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
คล้ายไฟโบรบลาสต์
Cell type
ไฟโบรบลาสต์
Karyotype
2n=22
Doubling time
ประมาณ 14 ถึง 18 ชั่วโมง (จาก V79; การเพิ่มจำนวนเซลล์อย่างรวดเร็ว)

04Identifiers

Citation
V79-GalK1 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 305011)
NCBI TaxID
10029
Cellosaurus
CVCL_2989

05Handling and culture

Culture medium
DMEM, w: 4.5 กรัม/ลิตร กลูโคส, w: 4 มิลลิโมลาร์ แอล-กลูตามีน, w: 3.7 กรัม/ลิตร NaHCO3, w: 1.0 มิลลิโมลาร์ โซเดียมไพรูเวต (หมายเลขบทความ Cytion 820300a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, บรรยากาศชื้น

Supplements
เติมอาหารเลี้ยงเชื้อด้วย FBS 10%
Dissociation reagent
แอคคูเทส
Subculturing
นำอาหารเลี้ยงเซลล์เก่าออกจากเซลล์ที่เกาะติดและล้างด้วย PBS ที่ไม่มีแคลเซียมและแมกนีเซียม สำหรับขวด T25 ให้ใช้ PBS 3-5 มล. และสำหรับขวด T75 ให้ใช้ 5-10 มล. จากนั้นปิดเซลล์ให้มิดด้วย Accutase โดยใช้ 1-2 มล. สำหรับขวด T25 และ 2.5 มล. สำหรับขวด T75ปล่อยให้เซลล์บ่มที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 8-10 นาทีเพื่อให้เซลล์หลุดออกจากกัน หลังจากบ่มแล้ว ให้ผสมเซลล์เบา ๆ กับอาหารเลี้ยงเซลล์ 10 มิลลิลิตรเพื่อทำให้เซลล์แขวนลอยอีกครั้ง จากนั้นปั่นเหวี่ยงที่ 300 เท่าของแรงโน้มถ่วงโลก (300xg) เป็นเวลา 3 นาที เทส่วนใสที่ได้ทิ้งไป แล้วแขวนลอยเซลล์ในอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ จากนั้นถ่ายเซลล์ไปยังขวดเพาะเลี้ยงใหม่ที่เติมอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ไว้แล้ว
Split ratio
1 ถึง 5
Seeding density
2–4 × 10⁴/cm²
Fluid renewal
2 ถึง 3 ครั้งต่อสัปดาห์
Thawing and culturing

  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Quality control and cryopreservation

Sterility

การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง

เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

Freeze medium
ในฐานะที่เป็นสารอาหารสำหรับการแช่แข็ง เราใช้สารอาหารสำหรับการเจริญเติบโตแบบครบถ้วน (รวมถึง FBS) + 10% DMSO เพื่อความมีชีวิตหลังการละลายที่เพียงพอ หรือ CM-1 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 800100) ซึ่งรวมถึงสารป้องกันออสโมติกและสารรักษาเสถียรภาพเมตาบอลิซึมที่ได้รับการปรับให้เหมาะสมเพื่อเพิ่มการฟื้นตัวและลดความเครียดที่เกิดจากการแช่แข็ง
Storage conditions

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

Shipping conditions

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

07Donor

Ethnicity
ไม่ใช้ (สายเซลล์แฮมสเตอร์จีน)