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CAL-51
Tessuto
Seno
Malattia
Carcinoma
Sito metastatico
Versamento pleurico
Sinonimi
CAL 51, CAL51, Cal51, Centre Antoine Lacassagne-51

Documenti

CAL-51

Cell line · Codice prodotto 305530

The CAL-51 cell line is a human breast adenocarcinoma model established from a malignant pleural effusion of a patient with advanced breast cancer. Charac...

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01Informazioni generali

Descrizione

La linea cellulare CAL-51 è un modello di adenocarcinoma mammario umano ottenuto da un versamento pleurico maligno di una paziente affetta da carcinoma mammario avanzato. Caratterizzata da morfologia epiteliale e cariotipo diploide normale, CAL-51 è particolarmente nota per il suo profilo di carcinoma mammario triplo negativo (TNBC), privo di recettori degli estrogeni (ER), recettori del progesterone (PR) ed espressione di HER2. L'assenza di questi marcatori, comunemente utilizzati come bersagli terapeutici, rende CAL-51 un modello prezioso per lo studio del TNBC, un sottotipo aggressivo di carcinoma mammario con opzioni terapeutiche limitate. La tumorigenicità di CAL-51 nei topi immunocompromessi e la sua crescita in agar morbido dimostrano il suo potenziale maligno, rendendolo adatto alla ricerca sul cancro in vitro e in vivo.

CAL-51 ha anche dimostrato la sua utilità negli studi che indagano i meccanismi di infezione da SARS-CoV-2. L'elevata espressione dei fattori di ingresso cellulare ACE2 e TMPRSS2, insieme alla neuropilina-1 (NRP1), rende CAL-51 permissivo al SARS-CoV-2, facilitando l'ingresso e la replicazione virale nella coltura cellulare. Ciò rende il CAL-51 un modello adatto per esplorare la patogenesi virale, nonché per testare composti antivirali e anticorpi neutralizzanti mirati al SARS-CoV-2. Gli esperimenti dimostrano che gli anticorpi terapeutici possono bloccare efficacemente l'ingresso del SARS-CoV-2 nelle cellule CAL-51, evidenziandone la rilevanza come sistema modello per la ricerca sul COVID-19 e la potenziale valutazione terapeutica.

Nella ricerca sul cancro, CAL-51 è particolarmente utile per esaminare l'eterogeneità dei tumori, soprattutto attraverso le sue sottopopolazioni di cellule tumorali simili a staminali note come popolazioni laterali (SP), che esprimono livelli elevati del trasportatore ABCG2. Le cellule SP in CAL-51 mostrano una maggiore resistenza ai farmaci e un potenziale di auto-rinnovamento, caratteristiche rilevanti per gli studi sul comportamento delle cellule staminali tumorali e sulla resistenza al trattamento. In quanto tale, CAL-51 è un modello versatile che contribuisce sia agli studi sul cancro che sulle infezioni virali, supportando la ricerca in aree terapeutiche impegnative come il TNBC e il SARS-CoV-2.

Tessuto
Seno
Malattia
Carcinoma
Sito metastatico
Versamento pleurico
Sinonimi
  • CAL 51
  • CAL51
  • Cal51
  • Centre Antoine Lacassagne-51

02Classificazione

Organismo
Umano
Sesso
Donna
Proprietà di crescita
Aderente
Livello di biosicurezza
1

03Caratteristiche

Morfologia
Simile all'epitelio

04Identificatori

Riferimento bibliografico
CAL-51 (numero di catalogo Cytion 305530)
Codice fiscale NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1110

05Manipolazione e coltura

Terreno di coltura
DMEM, w: 4,5 g/L di glucosio, w: 4 mM di L-Glutammina, w: 3,7 g/L di NaHCO3, w: 1,0 mM di piruvato di sodio (articolo Cytion numero 820300a)
Atmosfera di incubazione

37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.

Integratori
Integrare il terreno di coltura con il 10% di FBS
Reagente di dissociazione
Accutase
Subcoltura
Rimuovere il vecchio terreno dalle cellule aderenti e lavarle con PBS privo di calcio e magnesio. Per le fiasche T25, utilizzare 3-5 ml di PBS e per le fiasche T75, 5-10 ml. Quindi, coprire completamente le cellule con Accutase, utilizzando 1-2 ml per le fiasche T25 e 2,5 ml per le fiasche T75. Lasciare incubare le cellule a temperatura ambiente per 8-10 minuti per staccarle. Dopo l'incubazione, mescolare delicatamente le cellule con 10 ml di terreno per risospenderle, quindi centrifugare a 300xg per 3 minuti. Scartare il surnatante, risospendere le cellule in terreno fresco e trasferirle in nuove fiasche contenenti terreno fresco.
Densità di semina
1,25 x 104 cellule/cm2
Scongelamento e coltura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Controllo di qualità e crioconservazione

Sterilità

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Terreno di coltura congelato
Come terreno di crioconservazione, utilizziamo un terreno di crescita completo (incluso FBS) + 10% DMSO per un'adeguata vitalità post-scongelamento, o CM-1 (numero di catalogo Cytion 800100), che include osmoprotettori e stabilizzatori metabolici ottimizzati per migliorare il recupero e ridurre lo stress crio-indotto.
Condizioni di conservazione

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Condizioni di spedizione

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

07Donatore

Età dei donatori
45 anni
Etnia
Caucasico