.jpg)
HK-CRISPR-mEGFP-Nup153
Cell line · Produktnummer 300656
The HK-CRISPR-mEGFP-Nup153 cell line is a human cell model engineered to study nuclear pore complex (NPC) dynamics. Using CRISPR-Cas9, this cell line inte...
Tilpasning / Anbefalinger
- HK-CRISPR-mEGFP-Nup153Cell line€800.00
Anbefalt (det ferskeste partiet)
01Generell informasjon
- Beskrivelse
HK-CRISPR-mEGFP-Nup153-cellelinjen er en human cellemodell som er konstruert for å studere dynamikken i kjernepore-komplekset (NPC). Ved hjelp av CRISPR-Cas9 integrerer denne cellelinjen et monomert forsterket grønt fluorescerende protein (mEGFP) i Nup153-genet, en kritisk komponent i NPC. Dette muliggjør sanntidsvisualisering av NPC-atferd i levende celler.
Denne cellelinjen er nyttig for å studere montering og demontering av NPC og deres rolle i nukleocytoplasmatisk transport, mRNA-eksport og kjernekjerneskjoldets integritet. Den presise genomredigeringen med CRISPR-teknologi sikrer pålitelige resultater, noe som gjør denne cellelinjen verdifull for å forstå NPC-funksjoner både under normale forhold og ved sykdom.
- Vev
- Endocervix
- Sykdom
- Adenokarsinom
02Klassifisering
- Organisme
- Menneske
- Sex
- Kvinne
- Vekstegenskaper
- Tilhenger
- GMO-status
- GMO-S1
- Detaljer om GMO-status
- GMO-S1: This HeLa Kyoto line contains a CRISPR-engineered mEGFP fusion at the Nup153 locus for nuclear pore complex imaging. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
- Biosikkerhetsnivå
- 1
03Egenskaper
- Morfologi
- Epitel-lignende celler med mosaikksteinform
04Identifikatorer
- Kildehenvisning
- HK-CRISPR-mEGFP-Nup153 (Cytion katalognummer 300656)
- NCBI-skattenummer
- 9606
- Innskjærer
- Ellenberg-laboratoriet (EMBL)
05Uttrykk og mottakelighet
- Proteinekspresjon
- Nup153, mEGFP-tag
06Håndtering og kultur
- Næringsmedium
- DMEM, m: 4,5 g/L glukose, m: 4 mM L-glutamin, m: 3,7 g/L NaHCO3, m: 1,0 mM natriumpyruvat (Cytion artikkelnummer 820300a)
- Inkubasjonsatmosfære
37 °C, 5 %CO2, befuktet atmosfære.
- Kosttilskudd
- Suppler mediet med 10 % FBS
- Dissosiasjonsmiddel
- Accutase
- Subkultivering
- Fjern det gamle mediet fra de adherente cellene, og vask dem med PBS uten kalsium og magnesium. Bruk 3-5 ml PBS for T25-kolber og 5-10 ml for T75-kolber. Dekk deretter cellene helt med Accutase, med 1-2 ml for T25-kolber og 2,5 ml for T75-kolber. La cellene inkubere i romtemperatur i 8-10 minutter for å løsne dem. Etter inkubasjon blandes cellene forsiktig med 10 ml medium for å resuspendere dem, og sentrifuger deretter ved 300xg i 3 minutter. Kast supernatanten, resuspender cellene i nytt medium, og overfør dem til nye kolber som allerede inneholder nytt medium.
- Tining og dyrking
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Kvalitetskontroll og kryokonservering
- Sterilitet
Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.
For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.
- Frysemedium
- Som kryopreserveringsmedium bruker vi komplett vekstmedium (inkludert FBS) + 10 % DMSO for tilstrekkelig levedyktighet etter opptining, eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som inneholder optimaliserte osmobeskyttende midler og metabolske stabilisatorer for å øke utvinningen og redusere kryoindusert stress.
- Oppbevaringsbetingelser
For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.
- Fraktvilkår
Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.
08Donor
- Donorens alder
- 30 år
- Etnisitet
- Afroamerikaner
09Juridisk og sikkerhet
- Sikkerhetsregler
- Når du planlegger å oppbevare et kryovial i flytende nitrogen for senere tining, er det obligatorisk å følge strenge sikkerhetstiltak. Det er viktig å bruke egnede vernehansker og -klær, og det er påbudt å bruke ansiktsmaske eller vernebriller under overføring av frosne prøver til eller fra tanken med flytende nitrogen. Dette er for å redusere risikoen for skader som følge av potensielle kryovæskeeksplosjoner ved fjerning, noe som kan føre til at skarpe fragmenter slynges ut.
- Garanti
Hos Cytion står vi bak kvaliteten og levedyktigheten til produktene våre. Vi garanterer at cellene våre vil være levedyktige ved starten av dyrkingen i 60 dager etter at de er sendt fra våre anlegg. Vi forsikrer at alle materialer er i samsvar med spesifikasjonene som er beskrevet i analysesertifikatet og/eller produktarket
For fullstendig informasjon, se vår <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantierklæring
- Avtaler med tredjeparter gjelder
- Ja