- Chusteczka
- Trzustka
- Choroba
- Gruczolakorak
- Synonimy
- Hpac
Dokumenty
HPAC
Cell line · Numer produktu 305309
Dostosowanie / Zalecenia
- HPACCell line€430.00
Polecane (najświeższa partia)
01Informacje ogólne
- Opis
Linia komórkowa HPAC, pochodząca z ludzkiego gruczolakoraka przewodowego trzustki, służy jako podstawowy model do badania molekularnych i komórkowych cech raka trzustki. Znane ze swojej użyteczności w ocenie wpływu różnych środków chemioterapeutycznych i szlaków sygnałowych, komórki HPAC wykazują kluczowe cechy typowe dla raka trzustki, w tym mechanizmy oporności. Ostatnie badania z udziałem HPAC koncentrowały się na zrozumieniu oporności na leki, w szczególności na erlotynib, inhibitor kinazy tyrozynowej, którego celem jest receptor naskórkowego czynnika wzrostu (EGFR). Badania wykazały, że oporność na erlotynib w komórkach HPAC jest związana ze znacznymi zmianami metabolicznymi, takimi jak zmiany w metabolizmie fosfolipidów i aminokwasów. W szczególności, zwiększone poziomy krótkołańcuchowych acylokarnityn i zmiany w profilach glicerofosfolipidów zostały powiązane z podwyższonym stanem metabolicznym w komórkach HPAC opornych na erlotynib.
Komórki HPAC wykazują również ekspresję metaloproteinaz macierzy (MMP), w szczególności MT1-MMP, co ma kluczowe znaczenie dla ich inwazyjnego zachowania. Szlak sygnałowy Wnt/β-katenina został zaangażowany w regulację ekspresji MMP, przyczyniając się do migracji i potencjału inwazyjnego komórek. Wykazano, że stosowanie związków takich jak matrine hamuje migrację komórek HPAC poprzez obniżenie poziomu MT1-MMP poprzez tłumienie sygnalizacji Wnt/β-kateniny. Atrybuty te podkreślają, że HPAC jest kluczową linią komórkową do badania interwencji terapeutycznych mających na celu złagodzenie agresywnego i opornego na leczenie charakteru raka trzustki.
- Chusteczka
- Trzustka
- Choroba
- Gruczolakorak
- Synonimy
- Hpac
02Klasyfikacja
- Organizm
- Człowiek
- Seks
- Kobieta
- Właściwości związane ze wzrostem
- Zwolennik
- Poziom bezpieczeństwa biologicznego
- 1
03Cechy charakterystyczne
- Morfologia
- Podobny do nabłonka
- Typ komórki
- Komórka przewodu trzustkowego
- Nowotworotwórczy
- Tak, u myszy atymicznych
04Identyfikatory
- Źródło
- HPAC (numer katalogowy Cytion 305309)
- Numer identyfikacji podatkowej NCBI
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_3517
05Ekspresja i podatność
- Ekspresja białek
Ekspresja genów: keratyna dodatnia, wimentyna ujemna, chromogranina A ujemna
Naskórkowy czynnik wzrostu (EGF), ekspresja; glukokortykoid, ekspresja; naskórkowy czynnik wzrostu (EGF); glukokortykoid
- Profil mutacji
- Mutacja: CDKN2A, p.Glu120Ter (c.358G>T), homozygotyczna; Mutacja: KRAS, p.Gly12Asp (c.35G>A); Mutacja: TP53
06Postępowanie i hodowla
- Pożywka hodowlana
- DMEM:Ham's F12, 1,2 g/L wodorowęglanu sodu, 2,5 mM L-glutaminy, 15 mM HEPES, 0,5 mM pirogronianu sodu (0,002 mg/ml insuliny, 0,005 mg/ml transferyny) ITS+, 40 ng/ml hydrokortyzonu, 10 ng/ml mysiego naskórkowego czynnika wzrostu (Fisher Scientific cat# CB-40010)
- Atmosfera inkubacyjna
37°C, 5%CO2, nawilżona atmosfera.
- Suplementy
- Uzupełnić podłoże 5% FBS
- Odczynnik dysocjacyjny
- Accutase
- Hodowla komórek w subkulturze
- Usuń starą pożywkę z przylegających komórek i przemyj je PBS, który nie zawiera wapnia i magnezu. W przypadku kolb T25 należy użyć 3-5 ml PBS, a w przypadku kolb T75 5-10 ml. Następnie całkowicie pokryj komórki Accutase, używając 1-2 ml dla kolb T25 i 2,5 ml dla kolb T75. Pozwól komórkom inkubować w temperaturze pokojowej przez 8-10 minut, aby je oddzielić. Po inkubacji delikatnie wymieszaj komórki z 10 ml pożywki, aby ponownie je zawiesić, a następnie odwiruj przy 300xg przez 3 minuty. Odrzucić supernatant, ponownie zawiesić komórki w świeżej pożywce i przenieść je do nowych kolb zawierających już świeżą pożywkę.
- Odnawianie płynów
- 2 do 3 razy w tygodniu
- Rozmrażanie i hodowla
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Kontrola jakości i kriokonserwacja
- Bezpłodność
Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.
Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.
- Pożywka do zamrażania
- Jako pożywki do kriokonserwacji używamy kompletnej pożywki wzrostowej (w tym FBS) + 10% DMSO w celu zapewnienia odpowiedniej żywotności po rozmrożeniu lub CM-1 (numer katalogowy Cytion 800100), która zawiera zoptymalizowane osmoprotektanty i stabilizatory metaboliczne w celu zwiększenia regeneracji i zmniejszenia stresu wywołanego kriokonserwacją.
- Warunki przechowywania
W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.
- Warunki wysyłki
Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.
08Darczyńca
- Wiek dawcy
- 64 lata
- Pochodzenie etniczne
- Kaukaski
09Kwestie prawne i bezpieczeństwo
- Środki bezpieczeństwa
- Planując przechowywanie kriofiolek w ciekłym azocie w celu ich późniejszego rozmrożenia, należy bezwzględnie przestrzegać rygorystycznych środków bezpieczeństwa. Niezbędne są odpowiednie rękawice i odzież ochronna, a podczas przenoszenia zamrożonych próbek do lub ze zbiornika z ciekłym azotem wymagane jest stosowanie maski lub okularów ochronnych. Ma to na celu zmniejszenie ryzyka obrażeń spowodowanych potencjalnymi eksplozjami kriowialu podczas wyjmowania, które mogą skutkować wyrzuceniem ostrych fragmentów.
- Gwarancja
W Cytion gwarantujemy jakość i żywotność naszych produktów. Gwarantujemy, że nasze komórki będą żywotne na początku hodowli przez 60 dni po wysyłce z naszych zakładów. Zapewniamy, że wszystkie materiały są zgodne ze specyfikacjami opisanymi w certyfikacie analizy i/lub karcie produktu
Szczegółowe informacje można znaleźć w naszej <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Oświadczeniu gwarancyjnym
- Wymagana umowa o transferze materiałów
- Tak