Skip to content
Tissue
ตับอ่อน
Disease
อะดีโนคาร์ซิโนมา
Synonyms
Hpac

Documents

HPAC

Cell line · Product number 305309

€430.00excl. tax and shipping
In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

เซลล์ไลน์ HPAC ซึ่งได้มาจากมะเร็งต่อมน้ำเหลืองชนิด adenocarcinoma ของมนุษย์ เป็นแบบจำลองที่มีความสำคัญอย่างยิ่งสำหรับการศึกษาลักษณะทางโมเลกุลและเซลล์ของมะเร็งตับอ่อน HPAC เป็นที่รู้จักในด้านประโยชน์ในการประเมินผลกระทบของสารเคมีบำบัดต่าง ๆ และเส้นทางการส่งสัญญาณ เซลล์ HPAC แสดงลักษณะสำคัญที่พบได้ทั่วไปในมะเร็งตับอ่อน รวมถึงกลไกการต้านทานการศึกษาล่าสุดที่เกี่ยวข้องกับ HPAC ได้มุ่งเน้นไปที่การทำความเข้าใจการดื้อยา โดยเฉพาะอย่างยิ่งต่อเออร์โลทินิบ ซึ่งเป็นตัวยับยั้งไทโรซีนไคเนสที่มุ่งเป้าไปที่ตัวรับปัจจัยการเจริญเติบโตของผิวหนัง (EGFR)งานวิจัยได้แสดงให้เห็นว่า การดื้อต่อเออร์โลทินิบในเซลล์ HPAC มีความเกี่ยวข้องกับการเปลี่ยนแปลงทางเมตาบอลิซึมอย่างมีนัยสำคัญ เช่น การเปลี่ยนแปลงในเมตาบอลิซึมของฟอสโฟลิพิดและกรดอะมิโน โดยเฉพาะอย่างยิ่ง ระดับที่เพิ่มขึ้นของอะซิลคาร์นิทีนสายสั้นและการเปลี่ยนแปลงในโปรไฟล์ของไกลเซอโรฟอสโฟลิพิดมีความเชื่อมโยงกับภาวะเมตาบอลิซึมที่สูงขึ้นในเซลล์ HPAC ที่ดื้อต่อเออร์โลทินิบ

เซลล์ HPAC ยังแสดงออกของเมทริกซ์เมทัลโลโปรตีเนส (MMPs) โดยเฉพาะ MT1-MMP ซึ่งมีความสำคัญอย่างยิ่งต่อพฤติกรรมการรุกรานของพวกมัน เส้นทางการส่งสัญญาณ Wnt/β-catenin มีส่วนเกี่ยวข้องในการควบคุมการแสดงออกของ MMPs ซึ่งส่งผลต่อศักยภาพในการเคลื่อนที่และการรุกรานของเซลล์การประยุกต์ใช้สารประกอบเช่นมาตริเนได้แสดงให้เห็นว่าสามารถยับยั้งการเคลื่อนที่ของเซลล์ HPAC ได้โดยการลดระดับของ MT1-MMP ผ่านการยับยั้งการส่งสัญญาณ Wnt/β-catenin คุณสมบัติเหล่านี้ทำให้ HPAC เป็นสายพันธุ์เซลล์ที่สำคัญสำหรับการสำรวจการรักษาที่มีเป้าหมายเพื่อลดความรุนแรงและลักษณะที่ต้านการรักษาของมะเร็งตับอ่อน

Tissue
ตับอ่อน
Disease
อะดีโนคาร์ซิโนมา
Synonyms
  • Hpac

02Classification

Organism
Human
Sex
Female
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
ลักษณะคล้ายเยื่อบุผิว
Cell type
เซลล์ท่อน้ำดีของตับอ่อน
Tumourigenic
ใช่ ในหนูที่ไม่มีต่อมไทรอยด์

04Identifiers

Citation
HPAC (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 305309)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_3517

05Expression and susceptibility

Protein expression

ยีนที่แสดงออก: เคราตินบวก, วีเมนตินลบ, โครโมกรานิน เอ ลบ

ปัจจัยการเจริญเติบโตของผิวหนัง (EGF), แสดงออก; กลูโคคอร์ติคอยด์, แสดงออก; ปัจจัยการเจริญเติบโตของผิวหนัง (EGF); กลูโคคอร์ติคอยด์

Mutational profile
การกลายพันธุ์: CDKN2A, p.Glu120Ter (c.358G>T), ชนิดโฮโมไซโกต; การกลายพันธุ์: KRAS, p.Gly12Asp (c.35G>A); การกลายพันธุ์: TP53

06Handling and culture

Culture medium
ดีเอ็มเอ็มอี:Ham's F12, โซเดียมไบคาร์บอเนต 1.2 กรัม/ลิตร, แอล-กลูตามีน 2.5 มิลลิโมลาร์, HEPES 15 มิลลิโมลาร์, โซเดียมไพรูเวต 0.5 มิลลิโมลาร์ (อินซูลิน 0.002 มิลลิกรัม/มิลลิลิตร, ทรานส์เฟอร์ริน 0.005 มิลลิกรัม/มิลลิลิตร) ITS+, ไฮโดรคอร์ติโซน 40 นาโนกรัม/มิลลิลิตร, ม้าส์เอพิเดอร์มอล เติบโตแฟกเตอร์ 10 นาโนกรัม/มิลลิลิตร(Fisher Scientific cat# CB-40010)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, บรรยากาศชื้น

Supplements
เติมอาหารเลี้ยงเชื้อด้วย FBS 5%
Dissociation reagent
แอคคูเทส
Subculturing
นำอาหารเลี้ยงเซลล์เก่าออกจากเซลล์ที่เกาะติดและล้างด้วย PBS ที่ไม่มีแคลเซียมและแมกนีเซียม สำหรับขวด T25 ให้ใช้ PBS 3-5 มล. และสำหรับขวด T75 ให้ใช้ 5-10 มล. จากนั้นปิดเซลล์ให้มิดด้วย Accutase โดยใช้ 1-2 มล. สำหรับขวด T25 และ 2.5 มล. สำหรับขวด T75ปล่อยให้เซลล์บ่มที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 8-10 นาทีเพื่อให้เซลล์หลุดออกจากกัน หลังจากบ่มแล้ว ให้ผสมเซลล์เบา ๆ กับอาหารเลี้ยงเซลล์ 10 มิลลิลิตรเพื่อทำให้เซลล์แขวนลอยอีกครั้ง จากนั้นปั่นเหวี่ยงที่ 300 เท่าของแรงโน้มถ่วงโลก (300xg) เป็นเวลา 3 นาที เทส่วนใสที่ได้ทิ้งไป แล้วแขวนลอยเซลล์ในอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ จากนั้นถ่ายเซลล์ไปยังขวดเพาะเลี้ยงใหม่ที่เติมอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ไว้แล้ว
Fluid renewal
2 ถึง 3 ครั้งต่อสัปดาห์
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง

เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

Freeze medium
ในฐานะที่เป็นสารอาหารสำหรับการแช่แข็ง เราใช้สารอาหารสำหรับการเจริญเติบโตแบบครบถ้วน (รวมถึง FBS) + 10% DMSO เพื่อความมีชีวิตหลังการละลายที่เพียงพอ หรือ CM-1 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 800100) ซึ่งรวมถึงสารป้องกันออสโมติกและสารรักษาเสถียรภาพเมตาบอลิซึมที่ได้รับการปรับให้เหมาะสมเพื่อเพิ่มการฟื้นตัวและลดความเครียดที่เกิดจากการแช่แข็ง
Storage conditions

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

Shipping conditions

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

08Donor

Donor age
64 ปี
Ethnicity
คอเคเชียน