
- Tissue
- เลือดส่วนปลาย
- Disease
- สายเซลล์ลิมโฟบลาสโตอยด์ชนิดบีที่ถูกเปลี่ยนแปลงโดย EBV (B-LCL); PMM2-CDG (ความผิดปกติในการไกลโคซิเลชันแต่กำเนิด, จากผู้ป่วย)
- Metastatic site
- ไม่เกี่ยวข้อง (EBV-transformed B-LCL; ไม่มีการแพร่กระจาย)
Documents
B-LCL-CDG5
Cell line · Product number 302016
B-LCL-CDG5 is an EBV-transformed B lymphocyte cell line derived from a patient with PMM2-CDG, a congenital disorder of glycosylation (CDG) caused by mutat...
Customization / Recommendations
- B-LCL-CDG5Cell line€800.00
01General information
- Description
B-LCL-CDG5 เป็นเซลล์ไลน์ลิมโฟไซต์ B ที่ถูกเปลี่ยนแปลงโดย EBV ซึ่งได้มาจากผู้ป่วยที่มีภาวะ PMM2-CDG ซึ่งเป็นโรคทางพันธุกรรมที่เกิดจากความผิดปกติของการเติมน้ำตาล (glycosylation) ที่เกิดตั้งแต่กำเนิด (CDG) ที่เกิดจากการกลายพันธุ์ของยีน *PMM2* โรคดังกล่าวทำให้การสังเคราะห์และการยึดติดของโครงสร้างไกลแคนกับไกลโคโปรตีนและไกลโคลิปิดไม่สมบูรณ์ ซึ่งส่งผลกระทบต่อระบบอวัยวะหลายระบบการขาดเอนไซม์ฟอสโฟแมนโนมูทาเซ 2 (PMM2) ทำให้การเปลี่ยนแมนโนส-6-ฟอสเฟตเป็นแมนโนส-1-ฟอสเฟต ซึ่งเป็นขั้นตอนสำคัญในกระบวนการไกลโคซิเลชัน เกิดความผิดปกติ ส่งผลให้การทำงานของเซลล์บกพร่องและเกิดภาวะแทรกซ้อนในระบบต่างๆ ของร่างกาย
ในฐานะเซลล์ไลน์ B ที่ถูกทำให้เป็นอมตะด้วย EBV, B-LCL-CDG5 ทำหน้าที่เป็นแบบจำลองที่สำคัญสำหรับการศึกษาผลกระทบทางชีวเคมีและโมเลกุลของการกลายพันธุ์ของ *PMM2* เซลล์ไลน์นี้ช่วยให้นักวิจัยสามารถตรวจสอบข้อบกพร่องในการเติมน้ำตาล, กิจกรรมเอนไซม์ของ PMM2, และผลกระทบต่อเซลล์จากการบกพร่องในการเติมน้ำตาล นอกจากนี้ยังเป็นแพลตฟอร์มสำหรับการทดสอบแนวทางการรักษาที่เป็นไปได้ เช่น การใช้สารชักนำทางเภสัชวิทยา, การบำบัดเสริมเอนไซม์, หรือกลยุทธ์การเสริมสารตั้งต้นB-LCL-CDG5 ร่วมกับเซลล์ไลน์ที่มาจากผู้ป่วย CDG อื่น ๆ ช่วยในการพัฒนาความเข้าใจของเราเกี่ยวกับ PMM2-CDG และการพัฒนาทางเลือกการรักษาที่เฉพาะเจาะจง
- Tissue
- เลือดส่วนปลาย
- Disease
- สายเซลล์ลิมโฟบลาสโตอยด์ชนิดบีที่ถูกเปลี่ยนแปลงโดย EBV (B-LCL); PMM2-CDG (ความผิดปกติในการไกลโคซิเลชันแต่กำเนิด, จากผู้ป่วย)
- Metastatic site
- ไม่เกี่ยวข้อง (EBV-transformed B-LCL; ไม่มีการแพร่กระจาย)
- Applications
- การตรวจจีโนไทป์ของผลกระทบ CDG ในเซลล์ภูมิคุ้มกัน การทดสอบการทำงาน (เช่น แอนติเจนบนผิวเซลล์ B) การทดสอบยาต้านพิษ การวิเคราะห์การกลายพันธุ์ การวิเคราะห์กลไกการตายของเซลล์ การตรวจ HLA ผลกระทบของการขาดการไกลโคซิเลชันของไกลโคโปรตีนในเซลล์ที่แตกต่างกันต่อการทำงานที่หลากหลาย
02Classification
- Organism
- Human
- Sex
- Female
- Growth properties
- Suspension
- GMO status
- GMO-S2
- GMO status details
- GMO-S2: This B-LCL contains a stably maintained EBV episome encoding viral latent-phase genes (EBNA-1/-2/-3, LMP-1/-2). EBV is a risk group 2 pathogen; BSL-2 containment required. This classification applies within Germany; regulations may differ elsewhere.
- Biosafety level
- 2
03Characteristics
- Morphology
- เซลล์กลม
- Cell type
- ลิมโฟไซต์บี
04Identifiers
- Citation
- บี-แอลซีแอล-ซีดีจี5 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 302016)
- NCBI TaxID
- 9606
- Cellosaurus
- Not assigned
05Expression and susceptibility
- Viruses
- ทรานส์ฟอร์แมนท์: EBV
06Handling and culture
- Culture medium
- RPMI 1640, w: 2.0 mM กลูตามีนเสถียร, w: 2.0 กรัม/ลิตร NaHCO3 (หมายเลขบทความ Cytion 820700a)
- Incubation atmosphere
37°C, 5%CO2, บรรยากาศชื้น
- Supplements
- เติมอาหารเลี้ยงเชื้อด้วย FBS ที่ทำให้ไม่ทำงานทางชีวภาพด้วยความร้อน 10%
- Subculturing
- รักษาวัฒนธรรมโดยการเติมหรือเปลี่ยนสื่อกลางเป็นระยะๆ เริ่มต้นวัฒนธรรมด้วยความหนาแน่น 2 x 105 เซลล์/มล. และรักษาความเข้มข้นของเซลล์ให้อยู่ในช่วง 1 x 105 ถึง 5 x 105 เซลล์/มล. เพื่อการเจริญเติบโตที่เหมาะสมที่สุด
- Fluid renewal
- เมื่อสีกลางเปลี่ยนเป็นสีเหลือง
- Post-thaw recovery
- ระดับกลาง
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Quality control and cryopreservation
- Sterility
การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง
เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน
- Freeze medium
- ในฐานะที่เป็นสารอาหารสำหรับการแช่แข็ง เราใช้สารอาหารสำหรับการเจริญเติบโตแบบครบถ้วน (รวมถึง FBS) + 10% DMSO เพื่อความมีชีวิตหลังการละลายที่เพียงพอ หรือ CM-1 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 800100) ซึ่งรวมถึงสารป้องกันออสโมติกและสารรักษาเสถียรภาพเมตาบอลิซึมที่ได้รับการปรับให้เหมาะสมเพื่อเพิ่มการฟื้นตัวและลดความเครียดที่เกิดจากการแช่แข็ง
- Storage conditions
สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น
- Shipping conditions
เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า
08Donor
- Ethnicity
- คอเคเชียน
09Legal and safety
- Safety precautions
- เมื่อวางแผนที่จะเก็บขวดแช่แข็งในไนโตรเจนเหลวเพื่อการละลายในอนาคต จำเป็นต้องปฏิบัติตามมาตรการความปลอดภัยอย่างเคร่งครัด การสวมถุงมือป้องกันและเสื้อผ้าที่เหมาะสมเป็นสิ่งจำเป็น และต้องใช้หน้ากากหรือแว่นตานิรภัยในระหว่างการถ่ายโอนตัวอย่างแช่แข็งไปยังหรือจากถังไนโตรเจนเหลว ทั้งนี้เพื่อลดความเสี่ยงจากการบาดเจ็บที่อาจเกิดจากการระเบิดของขวดแช่แข็งเมื่อนำออก ซึ่งอาจทำให้เศษแหลมคมกระเด็นออกมาได้
- Warranty
ที่Cytion เรามุ่งมั่นในคุณภาพและความมีชีวิตของผลิตภัณฑ์ของเรา เรารับประกันว่าเซลล์ของเราจะยังมีชีวิตอยู่เมื่อเริ่มการเพาะเลี้ยงเป็นเวลา 60 วันหลังจากจัดส่งจากโรงงานของเรา เรารับรองว่าวัสดุทั้งหมดเป็นไปตามข้อกำหนดที่ระบุไว้ใน ใบรับรองการวิเคราะห์ และ/หรือแผ่นข้อมูลผลิตภัณฑ์
สำหรับรายละเอียดเพิ่มเติม กรุณาดูที่ <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">นโยบายการรับประกัน.
- Material Transfer Agreement required
- Yes