Skip to content
BRL
Tissue
ตับ
Synonyms
Buffalo Rat Liver

Documents

BRL

Cell line · Product number 305193

The Buffalo Rat Liver (BRL) cell line, a spontaneously immortalized lineage from Buffalo rat liver tissue, holds significant value due to its retention of...

€430.00excl. tax and shipping

Customization / Recommendations

In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

สายเซลล์ตับหนูบัฟฟาโล (Buffalo Rat Liver หรือ BRL) ซึ่งเป็นสายเซลล์ที่เกิดขึ้นเองโดยธรรมชาติจากเนื้อเยื่อตับหนูบัฟฟาโล มีคุณค่าอย่างยิ่งเนื่องจากยังคงรักษาคุณสมบัติความเป็นพหุศักยภาพและความปกติของโครโมโซมที่คล้ายกับเซลล์ต้นกำเนิดตัวอ่อน (Embryonic Stem หรือ ES) ไว้ได้ เซลล์ BRL สามารถผลิตอาหารเลี้ยงเซลล์ที่ผ่านการปรับสภาพ (BRL-CM) ซึ่งมีคุณสมบัติเฉพาะทางในชีววิทยาของเซลล์ต้นกำเนิด โดยสามารถยับยั้งการเปลี่ยนสภาพของสายเซลล์มะเร็งตัวอ่อน (Embryonal Carcinoma หรือ EC) และสายเซลล์ ES ที่ก่อตัวแล้วคุณสมบัตินี้ช่วยให้สามารถรักษาเซลล์ต้นกำเนิดเหล่านี้ให้อยู่ในสภาพที่ยังไม่แยกตัวได้โดยไม่จำเป็นต้องใช้เซลล์ผู้เลี้ยง แม้ว่าการสนับสนุนนี้จะสามารถทำได้เพียงระยะเวลาจำกัดเท่านั้น ซึ่งชี้ให้เห็นถึงข้อจำกัดในการใช้ BRL-CM ในการเพาะเลี้ยงเซลล์ต้นกำเนิดในระยะยาว

นอกจากนี้ สายเซลล์ BRL ยังเป็นแบบจำลองที่น่าสนใจสำหรับการศึกษาผลกระทบของการดัดแปลงพันธุกรรมต่อพฤติกรรมของเซลล์ ซึ่งแสดงให้เห็นได้จากการตอบสนองที่แตกต่างกันของเซลล์ BRL ปกติกับเซลล์ BRL ที่ถูกเปลี่ยนแปลงด้วย Ha-ras-1 ต่อสารยับยั้งโครงร่างเซลล์การเปลี่ยนแปลงด้วยยีนก่อมะเร็ง Ha-ras-1 ไม่เพียงแต่ปรับเปลี่ยนการตอบสนองของเซลล์เท่านั้น แต่ยังเพิ่มความเสถียรของไมโครฟิลิเมนต์และไมโครทูบูล ส่งผลให้โครงสร้างของเซลล์เปลี่ยนแปลงไปด้วย ผลการศึกษานี้เน้นย้ำถึงบทบาทที่เป็นไปได้ของไซโตสเกเลตันในการรักษาสภาพรูปร่างและความสามารถในการเปลี่ยนแปลงของเซลล์ ซึ่งเป็นสิ่งสำคัญทั้งในสภาวะปกติของร่างกายและโรคที่เกี่ยวข้องกับการเปลี่ยนแปลงและการแยกตัวของเซลล์

Tissue
ตับ
Synonyms
  • Buffalo Rat Liver

02Classification

Organism
Rat
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
เยื่อบุผิว

04Identifiers

Citation
BRL (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 305193)
NCBI TaxID
10116
Cellosaurus
CVCL_4565

05Handling and culture

Culture medium
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamine, w: 2.2 g/L NaHCO3, w: EBSS (หมายเลขบทความ Cytion 820100a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, บรรยากาศชื้น

Supplements
เติมอาหารเลี้ยงเชื้อด้วย FBS 10% และ NEAA 1%
Dissociation reagent
แอคคูเทส
Subculturing
นำอาหารเลี้ยงเซลล์เก่าออกจากเซลล์ที่เกาะติดและล้างด้วย PBS ที่ไม่มีแคลเซียมและแมกนีเซียม สำหรับขวด T25 ให้ใช้ PBS 3-5 มล. และสำหรับขวด T75 ให้ใช้ 5-10 มล. จากนั้นปิดเซลล์ให้มิดด้วย Accutase โดยใช้ 1-2 มล. สำหรับขวด T25 และ 2.5 มล. สำหรับขวด T75ปล่อยให้เซลล์บ่มที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 8-10 นาทีเพื่อให้เซลล์หลุดออกจากกัน หลังจากบ่มแล้ว ให้ผสมเซลล์เบา ๆ กับอาหารเลี้ยงเซลล์ 10 มิลลิลิตรเพื่อทำให้เซลล์แขวนลอยอีกครั้ง จากนั้นปั่นเหวี่ยงที่ 300 เท่าของแรงโน้มถ่วงโลก (300xg) เป็นเวลา 3 นาที เทส่วนใสที่ได้ทิ้งไป แล้วแขวนลอยเซลล์ในอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ จากนั้นถ่ายเซลล์ไปยังขวดเพาะเลี้ยงใหม่ที่เติมอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ไว้แล้ว
Fluid renewal
2 ถึง 3 ครั้งต่อสัปดาห์
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Quality control and cryopreservation

Sterility

การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง

เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

Freeze medium
ในฐานะที่เป็นสารอาหารสำหรับการแช่แข็ง เราใช้สารอาหารสำหรับการเจริญเติบโตแบบครบถ้วน (รวมถึง FBS) + 10% DMSO เพื่อความมีชีวิตหลังการละลายที่เพียงพอ หรือ CM-1 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 800100) ซึ่งรวมถึงสารป้องกันออสโมติกและสารรักษาเสถียรภาพเมตาบอลิซึมที่ได้รับการปรับให้เหมาะสมเพื่อเพิ่มการฟื้นตัวและลดความเครียดที่เกิดจากการแช่แข็ง
Storage conditions

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

Shipping conditions

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

07Donor

Breed / subspecies
บัฟฟาโล