BRL

A linhagem celular Buffalo Rat Liver (BRL), uma linhagem imortalizada espontaneamente a partir de tecido hepático do rato Buffalo, possui grande valor devido à sua capacidade de manter a pluripotência e a normalidade cariotípica semelhantes às das células-tronco embrionárias (ES). As células BRL produzem um meio condicionado (BRL-CM) que possui uma aplicação única na biologia das células-tronco; ele inibe a diferenciação de linhagens estabelecidas de carcinoma embrionário (EC) e de células-tronco embrionárias (ES). Essa propriedade permite a manutenção dessas células-tronco em um estado indiferenciado sem a necessidade de células alimentadoras, embora esse suporte seja viável apenas por um período finito, destacando uma limitação na utilidade do BRL-CM na cultura de células-tronco a longo prazo.

Além disso, a linhagem celular BRL oferece um modelo interessante para estudar o impacto de modificações genéticas no comportamento celular, ilustrado pela resposta diferencial das células BRL normais em comparação com as transformadas por Ha-ras-1 a inibidores do citoesqueleto. A transformação com o oncogene Ha-ras-1 não apenas modifica as respostas celulares, mas também aumenta a estabilidade dos microfilamentos e microtúbulos, alterando, consequentemente, a integridade estrutural da célula. Essas descobertas enfatizam o papel potencial do citoesqueleto na manutenção da forma celular e da pluripotência, o que é fundamental tanto na fisiologia normal quanto em estados patológicos que envolvem transformação e diferenciação celular.

37 °C, 5% de CO₂, atmosfera umidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A contaminação por micoplasma é descartada por meio de ensaios baseados em PCR e de métodos de detecção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não haja contaminação por bactérias, fungos ou leveduras, as culturas celulares são submetidas a inspeções visuais diárias.

Para preservação a longo prazo, coloque os frascos em nitrogênio líquido em fase de vapor a uma temperatura entre aproximadamente −150 e −196 °C. O armazenamento a −80 °C é aceitável apenas como uma etapa intermediária de curta duração antes da transferência para o nitrogênio líquido.

As linhagens celulares criopreservadas são enviadas em gelo seco, em embalagens isoladas e validadas, com refrigerante suficiente para manter a temperatura em aproximadamente −78 °C durante todo o transporte. Ao receber a remessa, inspecione o recipiente imediatamente e transfira os frascos sem demora para o local de armazenamento adequado.

Na Cytion, garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células permanecerão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou na Ficha Técnica do Produto.

Para obter todos os detalhes, consulte nossa Declaração de Garantia.