Hep-66.3A

เซลล์ไลน์ Hep-66.4A hepatoma ได้มาจากเนื้องอกในตับของหนู โดยเฉพาะจากสายพันธุ์หนู C57BL/6J เซลล์ไลน์นี้มีลักษณะเด่นที่มาจากเซลล์ตับ ซึ่งได้รับการยืนยันผ่านการวิเคราะห์โปรตีนเส้นใยกลางHep-66.4A แสดงการแสดงออกของเคอราตินชนิดง่าย K8 และ K18 ซึ่งเป็นลักษณะทั่วไปของเซลล์ตับปกติ รวมถึงการแสดงออกของวีเมนตินและเคอราติน K19 ในระดับที่แตกต่างกัน รูปแบบโปรตีนเหล่านี้ยืนยันลักษณะของเซลล์ในสายพันธุ์นี้ว่าเป็นเซลล์ตับและจัดอยู่ในกลุ่มเซลล์มะเร็งตับ

เซลล์ไลน์ Hep-66.4A แสดงลักษณะทางสัณฐานวิทยาแบบเยื่อบุเป็นส่วนใหญ่ สะท้อนถึงต้นกำเนิดจากเซลล์ตับ (hepatocytes) ลักษณะทางสัณฐานวิทยาดังกล่าวสอดคล้องกับรูปแบบการแสดงออกของโปรตีนของเซลล์ไลน์นี้ การวิเคราะห์ลายนิ้วมือดีเอ็นเอของ Hep-66.4A ไม่พบความผิดปกติทางโครงสร้างที่สำคัญใด ๆ ซึ่งบ่งชี้ถึงเสถียรภาพของจีโนมในระดับหนึ่ง อย่างไรก็ตาม พบการเปลี่ยนแปลงของความเข้มสัมพัทธ์ของแถบโปรตีนบางตำแหน่งเพิ่มขึ้นตามจำนวนครั้งที่เพาะเลี้ยง สะท้อนถึงความแปรผันทางจีโนมเล็กน้อยในระยะยาวของการเพาะเลี้ยง

แม้ว่าจะไม่พบการกลายพันธุ์ของ p53 ที่สามารถตรวจพบได้ในเนื้องอกตับของหนูในระยะแรก แต่ความผิดปกติถูกพบในบางสายพันธุ์ของเซลล์ตับมะเร็งในระหว่างการเพาะเลี้ยงในหลอดทดลองเซลล์ไลน์ Hep-66.4A ได้รับการวิเคราะห์เพื่อหาการกลายพันธุ์ในยีน p53 และ c-Ha-ras การไม่พบการกลายพันธุ์ในยีน p53 ในเซลล์ไลน์นี้ในช่วงการเพาะเลี้ยงระยะแรกบ่งชี้ถึงพื้นฐานทางพันธุกรรมที่เสถียร เซลล์ไลน์นี้ทำหน้าที่เป็นแบบจำลองที่มีคุณค่าสำหรับการศึกษาโรคมะเร็งตับ hepatocellular carcinoma โดยให้ข้อมูลเชิงลึกเกี่ยวกับกลไกระดับเซลล์และโมเลกุลที่อยู่เบื้องหลังการเกิดเนื้องอกในตับ

37°C, 5%_CO2, บรรยากาศชื้น

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง

เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

ที่Cytion เรามุ่งมั่นในคุณภาพและความมีชีวิตของผลิตภัณฑ์ของเรา เรารับประกันว่าเซลล์ของเราจะยังมีชีวิตอยู่เมื่อเริ่มการเพาะเลี้ยงเป็นเวลา 60 วันหลังจากจัดส่งจากโรงงานของเรา เรารับรองว่าวัสดุทั้งหมดเป็นไปตามข้อกำหนดที่ระบุไว้ใน ใบรับรองการวิเคราะห์ และ/หรือแผ่นข้อมูลผลิตภัณฑ์

สำหรับรายละเอียดเพิ่มเติม กรุณาดูที่ <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">นโยบายการรับประกัน.