คำแนะนำความปลอดภัยเกี่ยวกับไนโตรเจนเหลวสำหรับการเก็บรักษาเซลล์อย่างปลอดภัย

คำแนะนำความปลอดภัยเกี่ยวกับไนโตรเจนเหลวสำหรับการเก็บรักษาเซลล์อย่างปลอดภัย

ในห้องปฏิบัติการเพาะเลี้ยงเซลล์ ไนโตรเจนเหลวมีความจำเป็นอย่างยิ่งสำหรับการเก็บรักษาและอนุรักษ์สายพันธุ์เซลล์ที่มีคุณค่าในระยะยาว ที่ Cytion เราให้ความสำคัญทั้งกับคุณภาพของสายพันธุ์เซลล์และความปลอดภัยของบุคลากรในห้องปฏิบัติการที่จัดการกับวัสดุที่มีความเย็นจัด คู่มือฉบับสมบูรณ์นี้ได้สรุปมาตรการความปลอดภัยที่สำคัญและแนวทางปฏิบัติที่ดีที่สุดสำหรับการทำงานกับไนโตรเจนเหลวในแอปพลิเคชันการเก็บรักษาเซลล์

ประเด็นสำคัญ: ความปลอดภัยของไนโตรเจนเหลว
สวมใส่อุปกรณ์ป้องกันส่วนบุคคลที่เหมาะสมเสมอ: หน้ากากเต็มหน้า, ถุงมือสำหรับงานเย็นจัด, และเสื้อกาวน์ห้องปฏิบัติการ ทำงานในพื้นที่ที่มีการระบายอากาศดีพร้อมระบบตรวจสอบออกซิเจน อย่าทำงานคนเดียวกับไนโตรเจนเหลว ตรวจสอบให้มีการฝึกอบรมอย่างถูกต้องก่อนการจัดการกับไนโตรเจนเหลว ให้พื้นที่เก็บของติดตั้งอุปกรณ์เตือนภัยออกซิเจนต่ำ (ค่าเกณฑ์ 18%)

อุปกรณ์ป้องกันส่วนบุคคลที่จำเป็น (PPE) สำหรับการจัดการไนโตรเจนเหลว

เมื่อทำงานกับไนโตรเจนเหลวสำหรับการเก็บรักษาเซลล์ไลน์ เช่นเซลล์ HeLaหรือเซลล์ MCF-7 อุปกรณ์ป้องกันส่วนบุคคล (PPE) ที่เหมาะสมเป็นสิ่งที่ไม่สามารถต่อรองได้ จำเป็นต้องสวมหน้ากากป้องกันเต็มใบหน้าเพื่อป้องกันการกระเด็นและไอระเหยที่อาจก่อให้เกิดความเสียหายร้ายแรงต่อดวงตาและเนื้อเยื่อใบหน้า ถุงมือสำหรับงานเย็นที่มีฉนวนกันความร้อนต้องยาวคลุมถึงแขนท่อนล่าง เนื่องจากถุงมือห้องปฏิบัติการมาตรฐานให้การป้องกันที่ไม่เพียงพอจากความเย็นจัดควรสวมเสื้อคลุมห้องปฏิบัติการเป็นชั้นป้องกันภายนอก โดยควรเสริมด้วยผ้ากันกระเด็นพลาสติกเพื่อเพิ่มการป้องกันในกรณีที่เกิดการหกรั่วไหลโดยไม่ได้ตั้งใจ เมื่อถ่ายโอนเซลล์จากFreeze Medium CM-1ของเราไปยังการเก็บรักษาในไนโตรเจนเหลว ให้ตรวจสอบให้แน่ใจว่าอุปกรณ์ป้องกันส่วนบุคคล (PPE) ของคุณอยู่ในสภาพดี ไม่มีร่องรอยการสึกหรอหรือความเสียหายใด ๆ โปรดจำไว้ว่า แม้แต่การสัมผัสไนโตรเจนเหลวเพียงเล็กน้อยก็สามารถทำให้เกิดความเสียหายต่อเนื้อเยื่อได้ทันที ดังนั้นการสวมใส่ PPE อย่างครบถ้วนจึงเป็นสิ่งจำเป็นสำหรับการทำงานกับระบบเก็บไนโตรเจนเหลวทุกครั้ง

ข้อกำหนดการระบายอากาศและการตรวจสอบออกซิเจน

การระบายอากาศที่เหมาะสมเป็นสิ่งสำคัญอย่างยิ่งเมื่อเก็บรักษาวัสดุวิจัยที่มีค่า เช่นเซลล์ U937 และเซลล์ RAJIในไนโตรเจนเหลว เนื่องจากไนโตรเจนเหลว (LN2) ระเหยจะขยายตัวอย่างรวดเร็ว - ไนโตรเจนเหลวหนึ่งลิตรจะกลายเป็นก๊าซไนโตรเจนประมาณ 700 ลิตร ซึ่งสามารถแทนที่ออกซิเจนในพื้นที่ปิดได้อย่างรวดเร็ว พื้นที่เก็บไนโตรเจนเหลวของคุณต้องติดตั้งระบบระบายอากาศแบบกลไกและอุปกรณ์ตรวจวัดออกซิเจนสำหรับสถานที่จัดเก็บเซลล์ไลน์หลายชนิดและปริมาณมากของFreeze Medium CM-1 - 500 มล. เราแนะนำให้ติดตั้งเครื่องตรวจวัดออกซิเจนแบบถาวรพร้อมสัญญาณเตือนเสียงที่ตั้งค่าให้ทำงานเมื่อความเข้มข้นของออกซิเจนถึง 18% พื้นที่จัดเก็บควรมีจุดระบายอากาศระดับสูง เนื่องจากก๊าซไนโตรเจนเบากว่าอากาศเล็กน้อยเมื่ออุ่นขึ้น ห้ามพึ่งพาการระบายอากาศตามธรรมชาติเพียงอย่างเดียว - ควรตรวจสอบระบบระบายอากาศแบบกลไกเป็นประจำและบำรุงรักษาตามข้อกำหนดของผู้ผลิตเพื่อให้มั่นใจในอัตราการแลกเปลี่ยนอากาศที่สม่ำเสมอ

ระเบียบปฏิบัติด้านความปลอดภัยสำหรับสองคน

เมื่อจัดการกับไนโตรเจนเหลวสำหรับการเก็บรักษาเซลล์ที่ไวต่อการแช่แข็ง เช่นเซลล์ HUVECหรือเซลล์ต้นกำเนิดจากไขกระดูกของมนุษย์ ควรทำงานเป็นคู่เสมอ ระบบคู่หูนี้มีความสำคัญอย่างยิ่งในระหว่างขั้นตอนสำคัญ เช่น การถ่ายโอนตัวอย่างเข้าสู่ที่เก็บ การเติมของเหลวในภาชนะแช่แข็ง หรือการจัดการกับปริมาณมากของFreeze Medium CM-1บุคคลที่สองทำหน้าที่เป็นผู้สังเกตการณ์ด้านความปลอดภัยและสามารถตอบสนองได้ทันทีในกรณีฉุกเฉิน เช่น การหกรั่วไหล การขาดออกซิเจน หรือการบาดเจ็บส่วนบุคคล พวกเขาควรอยู่ในตำแหน่งใกล้ทางออกของห้องปฏิบัติการ โดยรักษาการมองเห็นและอยู่ห่างจากพื้นที่ทำงานโดยตรง สมาชิกในทีมทั้งสองต้องได้รับการฝึกอบรมอย่างครบถ้วนเกี่ยวกับขั้นตอนการฉุกเฉินและทราบตำแหน่งของอุปกรณ์ความปลอดภัย กำหนดเวลาการปฏิบัติงานที่เกี่ยวข้องกับไนโตรเจนเหลวในช่วงเวลาทำการปกติที่มีเจ้าหน้าที่สนับสนุนอยู่ และห้ามพยายามปฏิบัติงานที่เกี่ยวข้องกับอุณหภูมิต่ำมากในช่วงนอกเวลาทำการหรือวันหยุดสุดสัปดาห์โดยเด็ดขาด

ข้อกำหนดการฝึกอบรมภาคบังคับสำหรับการจัดการ LN2

ก่อนที่จะจัดการระบบเก็บรักษาไนโตรเจนเหลวที่มีตัวอย่างมีค่า เช่นเซลล์ HeLaหรือใช้งานร่วมกับFreeze medium CM-ACF จำเป็นต้องมีการฝึกอบรมที่ครอบคลุมและครบถ้วนโดยไม่มีเซรั่มเป็นส่วนประกอบ การฝึกอบรมนี้ต้องครอบคลุมถึงเทคนิคการจัดการที่ถูกต้อง ความเข้าใจเกี่ยวกับอันตรายจากอุณหภูมิต่ำ และการตอบสนองในกรณีฉุกเฉิน พนักงานที่ทำงานกับสายเซลล์ของเราต้องแสดงให้เห็นถึงความสามารถในการปฏิบัติตามขั้นตอนการเติมที่ปลอดภัย การใช้ PPE อย่างถูกต้อง และความเข้าใจเกี่ยวกับความเสี่ยงจากการขาดออกซิเจนการฝึกอบรมควรมีการฝึกปฏิบัติจริงกับปริมาณที่น้อยกว่าภายใต้การดูแลก่อนที่จะจัดการกับปริมาณที่มากขึ้น เอกสารการฝึกอบรมที่เสร็จสมบูรณ์ต้องได้รับการเก็บรักษา และมีการจัดเซสชันทบทวนเป็นประจำ พนักงานใหม่ควรติดตามการทำงานของบุคลากรที่มีประสบการณ์อย่างน้อยสามขั้นตอนเต็มของการจัดการ LN2 ก่อนที่จะทำงานอย่างอิสระเป็นส่วนหนึ่งของทีม อย่าลืมว่า แม้แต่พนักงานที่มีประสบการณ์ก็จำเป็นต้องได้รับการฝึกอบรมซ้ำเป็นระยะเพื่อให้แน่ใจว่าโปรโตคอลความปลอดภัยยังคงสดใหม่และทันสมัย

ระบบตรวจสอบและแจ้งเตือนออกซิเจน

เมื่อเก็บรักษาวัสดุวิจัยที่สำคัญ เช่นเซลล์ต้นกำเนิดเมเซนไคม์จากมนุษย์ - เนื้อเยื่อไขมัน และเซลล์ต้นกำเนิดเมเซนไคม์จากมนุษย์ - วาร์ตันเจลลี่ในไนโตรเจนเหลว ระบบตรวจสอบออกซิเจนที่เชื่อถือได้เป็นสิ่งที่ไม่สามารถต่อรองได้เครื่องตรวจวัดออกซิเจนแบบคงที่ต้องติดตั้งพร้อมกับสัญญาณเตือนที่ตั้งค่าให้ทำงานเมื่อความเข้มข้นของออกซิเจนถึง 18% (โดยปริมาตร) ระบบเหล่านี้ต้องการการติดตั้งในตำแหน่งที่เหมาะสม: ใกล้ระดับพื้นดินซึ่งก๊าซที่หนักกว่าอากาศจะสะสมตัวในตอนแรก, ที่ระดับความสูงในการทำงาน, และใกล้กับถังเก็บไนโตรเจนเหลว (LN2)เมื่อเก็บรักษาตัวอย่างในสารละลายแช่แข็ง CM-ACF - ปราศจากซีรัม - 500 มล. ให้แน่ใจว่าพื้นที่จัดเก็บมีระบบเตือนภัยทั้งเสียงและภาพที่สามารถรับรู้ได้เหนือเสียงรบกวนในห้องปฏิบัติการ ดำเนินการทดสอบระบบตรวจสอบออกซิเจนทั้งหมดเป็นประจำทุกเดือน บันทึกการสอบเทียบ และกำหนดขั้นตอนการอพยพที่ชัดเจนเมื่อระบบเตือนภัยทำงาน บุคลากรต้องไม่พยายามปิดหรือปิดใช้งานระบบความปลอดภัยเหล่านี้ไม่ว่าในกรณีใด ๆ แม้ว่าจะมีการวางแผนทำงานกับไนโตรเจนเหลวเป็นเวลานานก็ตาม