Células KHOS-NP

KHOS-NP es una línea celular derivada de la línea celular HOS mediante transformación con el virus del sarcoma murino de Kirsten (Ki-MSV). El proceso de transformación ha dado lugar a una línea celular altamente tumorigénica que se caracteriza por varias propiedades distintivas, lo que la hace valiosa para aplicaciones específicas de investigación. Cabe destacar que las células KHOS-NP son particularmente útiles para producir pseudotipos de MSV con diversos virus de leucemia murina ecotrópicos y xenotrópicos, lo cual es de interés en estudios centrados en la replicación viral, la oncogénesis y las vías relacionadas.

Las células KHOS-NP presentan propiedades de crecimiento adherente y se derivan del tejido óseo de una mujer adulta de raza blanca. Las células portan el genoma del Ki-MSV, pero no producen partículas virales infecciosas ni antígenos virales, lo que las hace seguras para ciertos entornos de investigación in vitro en los que la producción de virus infecciosos sería motivo de preocupación. A pesar de ello, las células KHOS-NP mantienen una alta densidad de saturación y presentan una alta eficiencia de siembra en agar blando, lo que demuestra sólidas características de crecimiento proliferativo e independiente del anclaje, típicas de las líneas celulares transformadas y tumorigénicas.

In vivo, las células KHOS-NP son altamente tumorigénicas, con una frecuencia del 100 % de formación de tumores observada en ratones desnudos a los 21 días posteriores a la inoculación, cuando se inyectan por vía subcutánea 10⁷ células. Estas propiedades convierten a la línea celular KHOS-NP en un valioso modelo para estudiar el desarrollo del sarcoma, la biología tumoral y los mecanismos moleculares subyacentes a la oncogénesis. Sin embargo, es fundamental señalar que las células KHOS-NP no son adecuadas para aplicaciones terapéuticas o in vivo, y su uso debe limitarse a condiciones experimentales controladas en un entorno de investigación.

37 °C, 5 % de CO₂, atmósfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Se descarta la contaminación por micoplasmas mediante ensayos basados en PCR y métodos de detección de micoplasmas basados en luminiscencia.

Para garantizar que no haya contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Para la conservación a largo plazo, coloque los viales en nitrógeno líquido en fase de vapor a una temperatura de entre −150 y −196 °C, aproximadamente. El almacenamiento a −80 °C solo es aceptable como un paso intermedio breve antes de transferirlos al nitrógeno líquido.

Las líneas celulares criopreservadas se envían en hielo seco, en un embalaje aislante validado que contiene suficiente refrigerante para mantener una temperatura de aproximadamente −78 °C durante todo el transporte. Al recibir el envío, revise el contenedor de inmediato y traslade los viales sin demora al lugar de almacenamiento adecuado.

En Cytion, respaldamos la calidad y la viabilidad de nuestros productos. Garantizamos que nuestras células serán viables al inicio del cultivo durante 60 días a partir de la fecha de envío desde nuestras instalaciones. Aseguramos que todos los materiales cumplen con las especificaciones descritas en el Certificado de Análisis y/o la Ficha del Producto.

Para obtener más detalles, consulte nuestra Declaración de garantía.