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KHOS-NP 细胞
Tissue
骨质
Disease
骨肉瘤
Synonyms
KHOS/NP, KHOS NP, KHOSNP, R-970-5, KHOS

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KHOS-NP 细胞

Cell line · Product number 300235

KHOS-NP is a cell line derived from the HOS cell line through transformation with the Kirsten murine sarcoma virus (Ki-MSV). The transformation process ha...

US$395.00excl. tax and shipping
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1

01General information

Description

KHOS-NP细胞系由HOS细胞系经Kirsten小鼠肉瘤病毒(Ki-MSV)转化获得。该转化过程产生了具有高度致瘤性的细胞系,其具备若干独特特性,使其在特定研究应用中具有重要价值。 值得注意的是,KHOS-NP细胞特别适用于生产携带不同内源性及异源性小鼠白血病毒的MSV伪型病毒,这对聚焦病毒复制、致癌作用及相关通路的研究具有重要意义。

KHOS-NP细胞具有贴壁生长特性,源自白种成年女性的骨组织。 该细胞携带Ki-MSV基因组,但不产生传染性病毒颗粒或病毒抗原,因此在需规避传染性病毒风险的特定体外研究环境中使用安全。尽管如此,KHOS-NP细胞仍保持高饱和密度,并在软琼脂培养基中展现出高接种效率,体现出强劲的增殖能力和锚定独立生长特性——这正是转化型致瘤细胞系的典型特征。

在体内实验中,KHOS-NP细胞展现出强烈的致瘤性:当向裸鼠皮下注射10⁷个细胞时,21天内观察到100%的肿瘤形成率。这些特性使KHOS-NP细胞系成为研究肉瘤发展、肿瘤生物学及致癌分子机制的宝贵模型。 但需特别注意:KHOS-NP细胞不适用于治疗或体内应用,其使用应严格限制在研究环境的可控实验条件下。

Tissue
骨质
Disease
骨肉瘤
Synonyms
  • KHOS/NP
  • KHOS NP
  • KHOSNP
  • R-970-5
  • KHOS

02Classification

Organism
Human
Sex
Female
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
纤维母细胞样
Tumourigenic
是的,在裸鼠身上。

04Identifiers

Citation
KHOS-NP(Cytion 目录号 300235)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_2546

05Handling and culture

Culture medium
EMEM(MEM Eagle),w:2 mM L-谷氨酰胺,w:2.2 g/L NaHCO3,w:EBSS(Cytion 文章编号 820100a)。
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, 加湿环境。

Supplements
在培养基中添加 10% FBS 和 1% NEAA
Dissociation reagent
Accutase
Subculturing
去除粘附细胞上的旧培养基,用不含钙和镁的 PBS 冲洗。T25 烧瓶用 3-5 毫升 PBS,T75 烧瓶用 5-10 毫升。然后用 Accutase 完全覆盖细胞,T25 烧瓶用 1-2 毫升,T75 烧瓶用 2.5 毫升。让细胞在室温下孵育 8-10 分钟,使其分离。孵育后,用 10 毫升培养基轻轻混合细胞使其重悬,然后用 300xg 离心 3 分钟。弃去上清液,用新鲜培养基重悬细胞,并将其转移到已装有新鲜培养基的新烧瓶中。
Seeding density
2 × 10⁴ 个细胞/平方厘米
Fluid renewal
每周 2 至 3 次
Post-thaw recovery
解冻后,将细胞以5×10⁴个细胞/平方厘米的密度接种于培养皿中,使细胞从冷冻过程中恢复并至少贴壁24小时。
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Quality control and cryopreservation

Sterility

使用基于 PCR 的检测方法和基于发光的支原体检测方法排除支原体污染。

为确保没有细菌、真菌或酵母菌污染,每天都要对细胞培养物进行目视检查。

Freeze medium
我们使用完全生长培养基(包括 FBS)+10% DMSO 或 CM-1(Cytion 商品目录编号 800100)作为冷冻保存培养基,以获得足够的解冻后存活率,CM-1(Cytion 商品目录编号 800100)含有优化的渗透保护剂和代谢稳定剂,可提高恢复能力并减少冷冻引起的应激。
Storage conditions

如需长期保存,可将样品瓶放入气相液氮中,温度约为 -150 至 -196 ℃。在-80 °C下保存只能作为转入液氮前的短暂过渡。

Shipping conditions

冷冻保存的细胞系用干冰装运,并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后,应立即检查容器,并立即将小瓶转移到适当的储藏室。

07Donor

Donor age
13 年
Ethnicity
高加索人