Células KHOS-NP

A KHOS-NP é uma linhagem celular derivada da linhagem HOS por meio da transformação com o vírus do sarcoma murino de Kirsten (Ki-MSV). O processo de transformação resultou em uma linhagem celular altamente tumorigênica, caracterizada por diversas propriedades distintas, o que a torna valiosa para aplicações específicas de pesquisa. Notavelmente, as células KHOS-NP são particularmente úteis para a produção de pseudótipos de MSV com vários vírus da leucemia murina ecotrópicos e xenotrópicos, o que é de interesse em estudos focados na replicação viral, oncogênese e vias relacionadas.

As células KHOS-NP apresentam propriedades de crescimento aderente e são derivadas do tecido ósseo de uma mulher adulta de pele branca. As células portam o genoma do Ki-MSV, mas não produzem partículas virais infecciosas nem antígenos virais, o que as torna seguras para determinados ambientes de pesquisa in vitro em que a produção de vírus infecciosos seria uma preocupação. Apesar disso, as células KHOS-NP mantêm uma alta densidade de saturação e apresentam alta eficiência de plaqueamento em ágar mole, demonstrando características robustas de crescimento proliferativo e independente de ancoragem, típicas de linhagens celulares transformadas e tumorigênicas.

In vivo, as células KHOS-NP são altamente tumorigênicas, com uma frequência de 100% de formação de tumor observada em camundongos nude dentro de 21 dias após a inoculação, quando injetadas por via subcutânea com 10⁷ células. Essas propriedades tornam a linhagem celular KHOS-NP um modelo valioso para o estudo do desenvolvimento do sarcoma, da biologia tumoral e dos mecanismos moleculares subjacentes à oncogênese. No entanto, é essencial observar que as células KHOS-NP não são adequadas para aplicações terapêuticas ou in vivo, e seu uso deve ser restrito a condições experimentais controladas em um ambiente de pesquisa.

37 °C, 5% de CO₂, atmosfera umidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A contaminação por micoplasma é descartada por meio de ensaios baseados em PCR e de métodos de detecção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não haja contaminação por bactérias, fungos ou leveduras, as culturas celulares são submetidas a inspeções visuais diárias.

Para preservação a longo prazo, coloque os frascos em nitrogênio líquido em fase de vapor a uma temperatura entre aproximadamente −150 e −196 °C. O armazenamento a −80 °C é aceitável apenas como uma etapa intermediária de curta duração antes da transferência para o nitrogênio líquido.

As linhagens celulares criopreservadas são enviadas em gelo seco, em embalagens isoladas e validadas, com refrigerante suficiente para manter a temperatura em aproximadamente −78 °C durante todo o transporte. Ao receber a remessa, inspecione o recipiente imediatamente e transfira os frascos sem demora para o local de armazenamento adequado.

Na Cytion, garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células permanecerão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou na Ficha Técnica do Produto.

Para obter todos os detalhes, consulte nossa Declaração de Garantia.