Tế bào KHOS-NP
Cell line · Product number 300235
KHOS-NP is a cell line derived from the HOS cell line through transformation with the Kirsten murine sarcoma virus (Ki-MSV). The transformation process ha...
Customization / Recommendations
- Tế bào KHOS-NPCell line€430.00
Recommended (freshest lot)
01General information
- Description
KHOS-NP là dòng tế bào được tạo ra từ dòng tế bào HOS thông qua quá trình biến đổi bằng virus sarcoma chuột Kirsten (Ki-MSV). Quá trình biến đổi này đã tạo ra một dòng tế bào có khả năng gây ung thư cao, có nhiều đặc tính riêng biệt, làm cho nó trở nên hữu ích cho các ứng dụng nghiên cứu cụ thể. Đáng chú ý, các tế bào KHOS-NP đặc biệt hữu ích trong việc sản xuất các pseudotype MSV với các virus leukemia chuột ecotropic và xenotropic khác nhau, điều này có ý nghĩa trong các nghiên cứu tập trung vào quá trình sao chép virus, quá trình gây ung thư và các con đường liên quan.
Các tế bào KHOS-NP có đặc tính phát triển bám dính và được phân lập từ mô xương của một con chuột cái trưởng thành màu trắng. Các tế bào mang bộ gen Ki-MSV nhưng không sản xuất các hạt virus lây nhiễm hoặc kháng nguyên virus, khiến chúng an toàn cho một số môi trường nghiên cứu in vitro nơi sản xuất virus lây nhiễm là một vấn đề. Mặc dù vậy, các tế bào KHOS-NP duy trì mật độ bão hòa cao và có hiệu suất gieo cao trong agar mềm, thể hiện các đặc tính tăng sinh mạnh mẽ và tăng trưởng độc lập với bề mặt, đặc trưng của các dòng tế bào biến đổi và gây ung thư.
Trong cơ thể sống, các tế bào KHOS-NP có tính gây ung thư cao, với tần suất hình thành khối u 100% được quan sát thấy ở chuột nude trong vòng 21 ngày sau khi tiêm dưới da với 10⁷ tế bào. Các đặc tính này khiến dòng tế bào KHOS-NP trở thành mô hình quý giá để nghiên cứu sự phát triển của sarcoma, sinh học khối u và các cơ chế phân tử cơ bản của quá trình gây ung thư. Tuy nhiên, cần lưu ý rằng các tế bào KHOS-NP không phù hợp cho các ứng dụng điều trị hoặc trong cơ thể sống, và việc sử dụng chúng nên được giới hạn trong các điều kiện thí nghiệm có kiểm soát trong môi trường nghiên cứu.
- Tissue
- Xương
- Disease
- U xương
- Synonyms
- KHOS/NP
- KHOS NP
- KHOSNP
- R-970-5
- KHOS
02Classification
- Organism
- Human
- Sex
- Female
- Growth properties
- Adherent
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Morphology
- Tế bào giống fibroblast
- Tumourigenic
- Đúng vậy, trên chuột không lông.
04Identifiers
- Citation
- KHOS-NP (Số catalog Cytion 300235)
- NCBI TaxID
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_2546
05Handling and culture
- Culture medium
- EMEM (MEM Eagle), chứa: 2 mM L-Glutamine, chứa: 2,2 g/L NaHCO₃, chứa: EBSS (Số hiệu sản phẩm Cytion 820100a)
- Incubation atmosphere
37°C, 5%CO₂, môi trường ẩm.
- Supplements
- Bổ sung vào môi trường nuôi cấy 10% huyết thanh bò phôi (FBS) và 1% NEAA
- Dissociation reagent
- Accutase
- Subculturing
- Loại bỏ môi trường nuôi cấy cũ khỏi các tế bào bám dính và rửa chúng bằng PBS không chứa canxi và magiê. Đối với bình T25, sử dụng 3-5 ml PBS, và đối với bình T75, sử dụng 5-10 ml. Sau đó, phủ hoàn toàn các tế bào bằng Accutase, sử dụng 1-2 ml cho bình T25 và 2,5 ml cho bình T75. Để tế bào ủ ở nhiệt độ phòng trong 8-10 phút để tách chúng ra. Sau khi ủ, nhẹ nhàng trộn tế bào với 10 ml môi trường để tái phân tán chúng, sau đó ly tâm ở 300xg trong 3 phút. Loại bỏ dịch trên, tái phân tán tế bào trong môi trường tươi và chuyển chúng vào các bình mới đã chứa môi trường tươi.
- Seeding density
- 2 × 10⁴ tế bào/cm²
- Fluid renewal
- 2 đến 3 lần mỗi tuần
- Post-thaw recovery
- Sau khi rã đông, cấy tế bào với mật độ 5 x 10⁴ tế bào/cm² và để tế bào phục hồi sau quá trình đông lạnh và bám dính ít nhất 24 giờ.
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
06Quality control and cryopreservation
- Sterility
Sự nhiễm khuẩn Mycoplasma được loại trừ bằng cả các phương pháp xét nghiệm dựa trên PCR và các phương pháp phát hiện Mycoplasma dựa trên phát quang.
Để đảm bảo không có nhiễm khuẩn vi khuẩn, nấm hoặc men, các mẫu nuôi cấy tế bào được kiểm tra trực quan hàng ngày.
- Freeze medium
- Như một môi trường bảo quản đông lạnh, chúng tôi sử dụng môi trường tăng trưởng hoàn chỉnh (bao gồm FBS) + 10% DMSO để đảm bảo độ sống sau khi rã đông, hoặc CM-1 (mã sản phẩm Cytion 800100), bao gồm các chất bảo vệ thẩm thấu và chất ổn định chuyển hóa được tối ưu hóa để cải thiện quá trình phục hồi và giảm stress do đông lạnh gây ra.
- Storage conditions
Để bảo quản lâu dài, hãy đặt ống nghiệm vào nitơ lỏng ở pha hơi ở nhiệt độ khoảng −150 đến −196 °C. Việc bảo quản ở −80 °C chỉ được chấp nhận như một bước trung gian ngắn hạn trước khi chuyển sang nitơ lỏng.
- Shipping conditions
Các dòng tế bào được bảo quản bằng phương pháp đông lạnh được vận chuyển trên đá khô trong bao bì cách nhiệt đã được kiểm định, kèm theo lượng chất làm lạnh đủ để duy trì nhiệt độ khoảng −78 °C trong suốt quá trình vận chuyển. Khi nhận hàng, hãy kiểm tra ngay lập tức bao bì và chuyển các ống nghiệm sang nơi lưu trữ phù hợp mà không chậm trễ.
07Donor
- Donor age
- 13 năm
- Ethnicity
- Người da trắng
08Legal and safety
- Safety precautions
- Khi lập kế hoạch lưu trữ ống cryovial trong nitơ lỏng để rã đông sau này, việc tuân thủ các biện pháp an toàn nghiêm ngặt là bắt buộc. Găng tay và quần áo bảo hộ phù hợp là điều cần thiết, và việc sử dụng khẩu trang hoặc kính bảo hộ là bắt buộc trong quá trình chuyển mẫu đông lạnh vào hoặc ra khỏi bể nitơ lỏng. Điều này nhằm giảm thiểu nguy cơ chấn thương do nổ ống cryovial khi lấy ra, có thể dẫn đến việc văng ra các mảnh vỡ sắc nhọn.
- Warranty
Tại Cytion, chúng tôi cam kết về chất lượng và khả năng sống của các sản phẩm của mình. Chúng tôi đảm bảo rằng các tế bào của chúng tôi sẽ có khả năng sống tại thời điểm bắt đầu nuôi cấy trong 60 ngày kể từ khi vận chuyển từ cơ sở của chúng tôi. Chúng tôi cam kết rằng tất cả các vật liệu tuân thủ các thông số kỹ thuật được mô tả trong Giấy chứng nhận phân tích và/hoặc Tài liệu sản phẩm.
Để biết chi tiết đầy đủ, vui lòng tham khảo <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Tuyên bố Bảo hành.
- Material Transfer Agreement required
- Yes
.jpg)