E11

La línea celular E11 es una línea celular murina altamente especializada desarrollada para estudios avanzados sobre la función de los podocitos y los mecanismos de la enfermedad renal. Derivadas de los glomérulos de ratones transgénicos diseñados para expresar una variante sensible a la temperatura del antígeno T grande del SV40, las células E11 funcionan bajo la regulación del promotor H-2kb inducible por IFN-γ. Este marco genético único facilita la proliferación condicional de las células, dependiente de la temperatura ambiental, lo cual se alinea con la expresión controlada del antígeno T.

Una de las características distintivas de la línea celular E11 es su estabilidad fenotípica a lo largo de numerosos pases. Al mantener una expresión y características celulares consistentes a lo largo de más de 40 pases, las células E11 han demostrado ser de un valor incalculable para estudios a largo plazo, sin el problema común de la deriva fenotípica que se observa en muchas líneas celulares cultivadas. Esta estabilidad mejora su uso en experimentos biológicos repetitivos y prolongados que requieren un comportamiento celular consistente.

En cuanto a la expresión de proteínas, la línea celular E11 presenta un perfil robusto que es fundamental para los estudios específicos de podocitos. Las células expresan de manera constante la nefrina, un componente esencial de la estructura del diafragma de hendidura en los podocitos, junto con una variedad de otras proteínas específicas de los podocitos, como la podocina, la CD2AP y la sinaptopodina. Esta expresión proteica integral facilita el estudio de la biología de los podocitos en un entorno in vitro controlado, que simula fielmente las condiciones in vivo. La capacidad de las células E11 para formar contactos celulares extensos subraya aún más su idoneidad para modelar las funciones de la barrera de filtración renal.

33 °C, 5 % de CO₂, atmósfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Se descarta la contaminación por micoplasmas mediante ensayos basados en PCR y métodos de detección de micoplasmas basados en luminiscencia.

Para garantizar que no haya contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Para la conservación a largo plazo, coloque los viales en nitrógeno líquido en fase de vapor a una temperatura de entre −150 y −196 °C, aproximadamente. El almacenamiento a −80 °C solo es aceptable como un paso intermedio breve antes de transferirlos al nitrógeno líquido.

Las líneas celulares criopreservadas se envían en hielo seco, en un embalaje aislante validado que contiene suficiente refrigerante para mantener una temperatura de aproximadamente −78 °C durante todo el transporte. Al recibir el envío, revise el contenedor de inmediato y traslade los viales sin demora al lugar de almacenamiento adecuado.

En Cytion, respaldamos la calidad y la viabilidad de nuestros productos. Garantizamos que nuestras células serán viables al inicio del cultivo durante 60 días a partir de la fecha de envío desde nuestras instalaciones. Aseguramos que todos los materiales cumplen con las especificaciones descritas en el Certificado de Análisis y/o la Ficha del Producto.

Para obtener más detalles, consulte nuestra Declaración de garantía.