E11

สายเซลล์ E11 เป็นสายเซลล์ของหนูที่ถูกพัฒนาขึ้นเป็นพิเศษสำหรับการศึกษาขั้นสูงในหน้าที่ของโพโดไซต์และกลไกของโรคไตเซลล์ E11 ซึ่งได้มาจากกลุ่มโกลเมอรูลัสของหนูทดลองสายพันธุ์ดัดแปลงพันธุกรรมที่ให้แสดงออกโปรตีนชนิดแปรผันของ SV40 large T antigen ที่ไวต่ออุณหภูมิ ทำงานภายใต้การควบคุมของโปรโมเตอร์ H-2kb ที่สามารถถูกกระตุ้นโดย IFN-g-inducible โครงสร้างทางพันธุกรรมที่เป็นเอกลักษณ์นี้ช่วยให้เกิดการเพิ่มจำนวนเซลล์แบบมีเงื่อนไข ซึ่งขึ้นอยู่กับความร้อนของสิ่งแวดล้อม ซึ่งสอดคล้องกับการแสดงออกของ T antigen ที่ถูกควบคุม

หนึ่งในลักษณะเด่นของเซลล์ไลน์ E11 คือความเสถียรทางฟีโนไทป์ตลอดการเพาะเลี้ยงต่อเนื่องเป็นเวลานาน การคงไว้ซึ่งการแสดงออกของยีนและลักษณะของเซลล์ที่สม่ำเสมอแม้ผ่านการเพาะเลี้ยงมากกว่า 40 ครั้ง เซลล์ E11 ได้พิสูจน์แล้วว่ามีคุณค่าอย่างยิ่งสำหรับการศึกษาในระยะยาวโดยไม่มีปัญหาการเบี่ยงเบนของฟีโนไทป์ที่พบได้บ่อยในเซลล์ไลน์เพาะเลี้ยงหลายชนิด ความเสถียรนี้ช่วยเพิ่มศักยภาพในการนำไปใช้ในงานวิจัยทางชีววิทยาที่ต้องทำซ้ำและใช้เวลานาน ซึ่งต้องการพฤติกรรมของเซลล์ที่คงที่

ในแง่ของการแสดงออกของโปรตีน สายเซลล์ E11 แสดงโปรไฟล์ที่แข็งแกร่งซึ่งมีความสำคัญอย่างยิ่งสำหรับการศึกษาเฉพาะเจาะจงของโพโดไซต์ เซลล์เหล่านี้แสดงออกของเนฟรินอย่างสม่ำเสมอ ซึ่งเป็นองค์ประกอบสำคัญของโครงสร้างแผ่นกั้นช่องแคบในโพโดไซต์ พร้อมกับโปรตีนเฉพาะของโพโดไซต์อื่นๆ อีกหลากหลายชนิด เช่น โพโดซิน, CD2AP และซินแนปโตโพดิน การแสดงออกของโปรตีนที่ครอบคลุมนี้ช่วยอำนวยความสะดวกในการศึกษาชีววิทยาของโพโดไซต์ในสภาพแวดล้อมที่ควบคุมได้ในรูปแบบ in vitro ซึ่งจำลองสภาวะในร่างกายได้อย่างใกล้ชิดความสามารถของเซลล์ E11 ในการสร้างการติดต่อระหว่างเซลล์อย่างกว้างขวางยิ่งตอกย้ำความเหมาะสมของพวกมันในการจำลองการทำงานของอุปสรรคการกรองของไต

33°C, 5%_CO2, บรรยากาศชื้น

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง

เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

ที่Cytion เรามุ่งมั่นในคุณภาพและความมีชีวิตของผลิตภัณฑ์ของเรา เรารับประกันว่าเซลล์ของเราจะยังมีชีวิตอยู่เมื่อเริ่มการเพาะเลี้ยงเป็นเวลา 60 วันหลังจากจัดส่งจากโรงงานของเรา เรารับรองว่าวัสดุทั้งหมดเป็นไปตามข้อกำหนดที่ระบุไว้ใน ใบรับรองการวิเคราะห์ และ/หรือแผ่นข้อมูลผลิตภัณฑ์

สำหรับรายละเอียดเพิ่มเติม กรุณาดูที่ <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">นโยบายการรับประกัน.