Skip to content
E11
Tissue
כליה

Documents

E11

Cell line · Product number 400494

The E11 cell line is a highly specialized murine cell line developed for advanced studies in podocyte function and kidney disease mechanisms. Derived from...

US$800.00excl. tax and shipping
Made to order
1

01General information

Description

קו התאים E11 הוא קו תאים עכברי מתמחה ביותר, שפותח למחקרים מתקדמים בתפקוד הפודוציטים ובמנגנונים של מחלות כליה. תאי E11, שמקורם בגלומרולי של עכברים מהונדסים גנטית לביטוי וריאנט רגיש לטמפרטורה של האנטיגן T הגדול SV40, פועלים תחת ויסות של מקדם H-2kb המושרה על ידי IFN-g. מסגרת גנטית ייחודית זו מאפשרת התרבות מותנית של התאים, התלויה בטמפרטורת הסביבה, אשר תואמת את הביטוי המבוקר של האנטיגן T.

אחת התכונות הבולטות של קו התאים E11 היא היציבות הפנוטיפית שלו לאורך מעברים נרחבים. תאי E11, השומרים על ביטוי עקבי ומאפיינים תאיים לאורך יותר מ-40 מעברים, הוכחו כבעלי ערך רב למחקרים ארוכי טווח, ללא הבעיה הנפוצה של סטייה פנוטיפית הנראית בקווי תאים מתורבתים רבים. יציבות זו משפרת את השימוש בהם בניסויים ביולוגיים חוזרים ונשנים וממושכים, הדורשים התנהגות תאים עקבית.

מבחינת ביטוי חלבונים, קו התאים E11 מציג פרופיל חזק, המהווה תכונה חיונית למחקרים ספציפיים לפודוציטים. התאים מבטאים באופן עקבי נפרין, מרכיב חיוני במבנה הדיאפרגמה הסדוקה בפודוציטים, לצד מגוון חלבונים ספציפיים לפודוציטים אחרים, כגון פודוקין, CD2AP וסינפטופודין. ביטוי חלבונים מקיף זה מקל על חקר הביולוגיה של הפודוציטים בסביבה מבוקרת במבחנה, המדמה באופן הדוק את התנאים בתוך הגוף. היכולת של תאי E11 ליצור מגעים נרחבים בין תאים מדגישה עוד יותר את התאמתם למודלים של תפקודי מחסום הסינון בכליות.

Tissue
כליה

02Classification

Organism
Mouse
Sex
Unspecified
Growth properties
Adherent
GMO status
GMO-S1
GMO status details
GMO-S1: This Immorto Mouse podocyte line contains a temperature‑sensitive SV40 T‑antigen construct enabling conditional immortalization. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biosafety level
1

03Characteristics

Cell type
פודוציט

04Identifiers

Citation
E11 (מספר קטלוגי Cytion 400494)
NCBI TaxID
10090
Cellosaurus
CVCL_5737

05Expression and susceptibility

Protein expression
WT1, Lmx1b, נפרין, NEPHI, FAT, P-cadherin, CD2AP, ZO-I, פודוקסינקסין, פודופלנין, סינפו, פודוקין, TRPC6 ו-GAPDH.

06Handling and culture

Culture medium
RPMI 1640, w: 2.0 mM גלוטמין יציב, w: 2.0 g/L NaHCO3 (מספר קטלוגי של Cytion 820700a)
Incubation atmosphere

33°C, 5%CO2, אווירה לחה.

Supplements
הוסף לתווך 10% FBS
Dissociation reagent
אקוטאז
Subculturing
הסר את המדיום הישן מהתאים הדבוקים ושטוף אותם ב-PBS ללא סידן ומגנזיום. עבור בקבוקי T25, השתמש ב-3-5 מ"ל PBS, ועבור בקבוקי T75, השתמש ב-5-10 מ"ל. לאחר מכן, כסה את התאים לחלוטין ב-Accutase, תוך שימוש ב-1-2 מ"ל עבור בקבוקי T25 ו-2.5 מ"ל עבור בקבוקי T75. השאר את התאים לדגירה בטמפרטורת החדר למשך 8-10 דקות כדי לנתק אותם. לאחר הדגירה, ערבב בעדינות את התאים עם 10 מ"ל של מדיום כדי להחזיר אותם לתמיסה, ואז סובב בצנטריפוגה ב-300xg למשך 3 דקות. השלך את הנוזל העליון, החזר את התאים לתמיסה במדיום טרי והעבר אותם לצלחות חדשות שכבר מכילות מדיום טרי.
Seeding density
החדיר לתרבית תאים T75 בקבוקי תרבית עם 1x 104 תאים/סמ"ר לתהליך התרבות. שמור את התאים בטמפרטורה של 33 מעלות צלזיוס / 5% CO2, עד שהבקבוק יהיה מלא בכ-75%.
Fluid renewal
2 עד 3 פעמים בשבוע
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.

כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.

Freeze medium
כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא (כולל FBS) + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה, או CM-1 (מספר קטלוגי Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי מטבוליזם משופרים כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מהקפאה.
Storage conditions

לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.

Shipping conditions

שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.

08Donor

Breed / subspecies
(CBA/Ca x C57BL/10)Tg(H2KbtsA58)
Donor age
מבוגר