Skip to content
E11
Tissue
Thận

Documents

E11

Cell line · Product number 400494

The E11 cell line is a highly specialized murine cell line developed for advanced studies in podocyte function and kidney disease mechanisms. Derived from...

€800.00excl. tax and shipping

Customization / Recommendations

Made to order
1

01General information

Description

Dòng tế bào E11 là một dòng tế bào chuột được phát triển chuyên biệt cho các nghiên cứu nâng cao về chức năng của tế bào podocyte và cơ chế bệnh lý thận. Dòng tế bào E11 được phân lập từ các tiểu cầu thận của chuột biến đổi gen được thiết kế để biểu hiện một biến thể nhạy cảm với nhiệt độ của kháng nguyên T lớn SV40. Các tế bào E11 hoạt động dưới sự điều hòa của promoter H-2kb được kích hoạt bởi IFN-g. Khung gen độc đáo này cho phép sự phát triển có điều kiện của tế bào, phụ thuộc vào nhiệt độ môi trường, phù hợp với sự biểu hiện có kiểm soát của kháng nguyên T.

Một trong những đặc điểm nổi bật của dòng tế bào E11 là tính ổn định biểu hiện kiểu hình qua nhiều lần nhân bản. Duy trì biểu hiện và đặc tính tế bào nhất quán qua hơn 40 lần nhân bản, các tế bào E11 đã chứng minh giá trị to lớn cho các nghiên cứu dài hạn mà không gặp vấn đề phổ biến về sự thay đổi kiểu hình thường thấy ở nhiều dòng tế bào nuôi cấy. Tính ổn định này nâng cao khả năng sử dụng của chúng trong các thí nghiệm sinh học lặp đi lặp lại và kéo dài yêu cầu hành vi tế bào nhất quán.

Về biểu hiện protein, dòng tế bào E11 thể hiện một hồ sơ biểu hiện mạnh mẽ, đặc trưng cho các nghiên cứu về tế bào podocyte. Các tế bào này liên tục biểu hiện nephrin, một thành phần thiết yếu của cấu trúc màng khe trong tế bào podocyte, cùng với nhiều protein đặc trưng khác của podocyte như podocin, CD2AP và synaptopodin. Sự biểu hiện protein toàn diện này tạo điều kiện thuận lợi cho việc nghiên cứu sinh học podocyte trong môi trường in vitro được kiểm soát, mô phỏng gần như điều kiện in vivo. Khả năng của tế bào E11 trong việc hình thành các tiếp xúc tế bào-tế bào rộng rãi càng khẳng định tính phù hợp của chúng trong việc mô phỏng các chức năng của hàng rào lọc thận.

Tissue
Thận

02Classification

Organism
Mouse
Sex
Unspecified
Growth properties
Adherent
GMO status
GMO-S1
GMO status details
GMO-S1: This Immorto Mouse podocyte line contains a temperature‑sensitive SV40 T‑antigen construct enabling conditional immortalization. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biosafety level
1

03Characteristics

Cell type
Tế bào podocyte

04Identifiers

Citation
E11 (Số catalog Cytion 400494)
NCBI TaxID
10090
Cellosaurus
CVCL_5737

05Expression and susceptibility

Protein expression
WT1, Lmx1b, nephrin, NEPHI, FAT, P-cadherin, CD2AP, ZO-I, podocalyxin, podoplanin, synpo, podocin, TRPC6 và GAPDH.

06Handling and culture

Culture medium
RPMI 1640, chứa: 2,0 mM glutamine ổn định, chứa: 2,0 g/L NaHCO₃ (Số hiệu sản phẩm Cytion 820700a)
Incubation atmosphere

33°C, 5%CO₂, môi trường ẩm.

Supplements
Bổ sung 10% huyết thanh bò phôi (FBS) vào môi trường nuôi cấy
Dissociation reagent
Accutase
Subculturing
Loại bỏ môi trường nuôi cấy cũ khỏi các tế bào bám dính và rửa chúng bằng PBS không chứa canxi và magiê. Đối với bình T25, sử dụng 3-5 ml PBS, và đối với bình T75, sử dụng 5-10 ml. Sau đó, phủ hoàn toàn các tế bào bằng Accutase, sử dụng 1-2 ml cho bình T25 và 2,5 ml cho bình T75. Để tế bào ủ ở nhiệt độ phòng trong 8-10 phút để tách chúng ra. Sau khi ủ, nhẹ nhàng trộn tế bào với 10 ml môi trường để tái phân tán chúng, sau đó ly tâm ở 300xg trong 3 phút. Loại bỏ dịch trên, tái phân tán tế bào trong môi trường tươi và chuyển chúng vào các bình mới đã chứa môi trường tươi.
Seeding density
Tiêm nhiễm các bình nuôi cấy tế bào T75 với mật độ 1 × 10⁴ tế bào/cm² cho quá trình phát triển. Duy trì tế bào ở nhiệt độ 33°C và nồng độ CO₂ 5%, cho đến khi bình nuôi cấy đạt khoảng 75% mật độ phủ kín.
Fluid renewal
2 đến 3 lần mỗi tuần
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

Sự nhiễm khuẩn Mycoplasma được loại trừ bằng cả các phương pháp xét nghiệm dựa trên PCR và các phương pháp phát hiện Mycoplasma dựa trên phát quang.

Để đảm bảo không có nhiễm khuẩn vi khuẩn, nấm hoặc men, các mẫu nuôi cấy tế bào được kiểm tra trực quan hàng ngày.

Freeze medium
Như một môi trường bảo quản đông lạnh, chúng tôi sử dụng môi trường tăng trưởng hoàn chỉnh (bao gồm FBS) + 10% DMSO để đảm bảo độ sống sau khi rã đông, hoặc CM-1 (mã sản phẩm Cytion 800100), bao gồm các chất bảo vệ thẩm thấu và chất ổn định chuyển hóa được tối ưu hóa để cải thiện quá trình phục hồi và giảm stress do đông lạnh gây ra.
Storage conditions

Để bảo quản lâu dài, hãy đặt ống nghiệm vào nitơ lỏng ở pha hơi ở nhiệt độ khoảng −150 đến −196 °C. Việc bảo quản ở −80 °C chỉ được chấp nhận như một bước trung gian ngắn hạn trước khi chuyển sang nitơ lỏng.

Shipping conditions

Các dòng tế bào được bảo quản bằng phương pháp đông lạnh được vận chuyển trên đá khô trong bao bì cách nhiệt đã được kiểm định, kèm theo lượng chất làm lạnh đủ để duy trì nhiệt độ khoảng −78 °C trong suốt quá trình vận chuyển. Khi nhận hàng, hãy kiểm tra ngay lập tức bao bì và chuyển các ống nghiệm sang nơi lưu trữ phù hợp mà không chậm trễ.

08Donor

Breed / subspecies
(CBA/Ca × C57BL/10)Tg(H2KbtsA58)
Donor age
Người lớn