HROC348

HROC348 es una línea celular de carcinoma colorrectal humano derivada de un tumor primario extirpado de un paciente adulto del sexo masculino diagnosticado con cáncer de colon sigmoideo. El tumor se clasificó como un adenocarcinoma moderadamente avanzado (T3, G3, N2), lo que indica una invasión local significativa y afectación de los ganglios linfáticos, lo cual concuerda con un comportamiento tumoral agresivo. El carcinoma se originó en el colon sigmoideo, una localización anatómica común para el cáncer colorrectal esporádico, y presentó estabilidad de microsatélites (MSS), lo que lo alinea con el subtipo de inestabilidad cromosómica (CIN) en lugar de la clase de tumores colorrectales hipermutados con MSI alto.

El perfil molecular de HROC348 muestra un estado de tipo salvaje tanto para KRAS como para BRAF, lo que sugiere la ausencia de mutaciones activadoras comunes en estos genes, que con frecuencia están implicadas en la progresión del cáncer colorrectal y la resistencia al tratamiento. Este trasfondo molecular hace que HROC348 sea particularmente adecuado para estudios enfocados en la señalización RAS/RAF no mutada y sus implicaciones en el crecimiento tumoral, la respuesta terapéutica y los mecanismos de resistencia. La línea celular no presenta el fenotipo de metilación de islas CpG (CIMP), lo que respalda aún más su clasificación dentro del subgrupo convencional (no hipermutado) del cáncer colorrectal.

Desde el punto de vista clínico, el tumor dio positivo para metástasis en los ganglios linfáticos (LN_pos = 2), pero solo se observó una metástasis a distancia (M) y no se registró afectación del colon derecho, lo cual concuerda con un perfil de cáncer colorrectal del lado izquierdo. Estas características, combinadas con el estado MSS y los marcadores moleculares, posicionan a HROC348 como un modelo representativo para el estudio del adenocarcinoma colorrectal del lado izquierdo, de tipo salvaje en KRAS/BRAF y microsatélite estable. También ofrece valor traslacional para las pruebas preclínicas de terapias dirigidas y agentes inmunomoduladores en tumores MSS, que por lo general responden menos al bloqueo de los puntos de control inmunológicos.

37 °C, 5 % de CO₂, atmósfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Se descarta la contaminación por micoplasmas mediante ensayos basados en PCR y métodos de detección de micoplasmas basados en luminiscencia.

Para garantizar que no haya contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Para la conservación a largo plazo, coloque los viales en nitrógeno líquido en fase de vapor a una temperatura de entre −150 y −196 °C, aproximadamente. El almacenamiento a −80 °C solo es aceptable como un paso intermedio breve antes de transferirlos al nitrógeno líquido.

Las líneas celulares criopreservadas se envían en hielo seco, en un embalaje aislante validado que contiene suficiente refrigerante para mantener una temperatura de aproximadamente −78 °C durante todo el transporte. Al recibir el envío, revise el contenedor de inmediato y traslade los viales sin demora al lugar de almacenamiento adecuado.

En Cytion, respaldamos la calidad y la viabilidad de nuestros productos. Garantizamos que nuestras células serán viables al inicio del cultivo durante 60 días a partir de la fecha de envío desde nuestras instalaciones. Aseguramos que todos los materiales cumplen con las especificaciones descritas en el Certificado de Análisis y/o la Ficha del Producto.

Para obtener más detalles, consulte nuestra Declaración de garantía.