Skip to content
HROC348
Tissue
Đại tràng sigmoid
Disease
Ung thư biểu mô
Metastatic site
Chưa có báo cáo (ung thư biểu mô tuyến đại tràng sigmoid nguyên phát; không có di căn xa được xác nhận tại thời điểm lấy mẫu)

Documents

HROC348

Cell line · Product number 300719

HROC348 is a human colorectal carcinoma cell line derived from a primary tumor resected from an adult male patient diagnosed with sigmoid colon cancer. Th...

€800.00excl. tax and shipping
In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

HROC348 là dòng tế bào ung thư đại tràng người được phân lập từ khối u nguyên phát được phẫu thuật cắt bỏ từ một bệnh nhân nam trưởng thành được chẩn đoán mắc ung thư đại tràng sigmoid. Khối u được phân loại là ung thư tuyến trung bình tiến triển (T3, G3, N2), cho thấy sự xâm lấn cục bộ đáng kể và sự tham gia của hạch bạch huyết, phù hợp với hành vi ác tính của khối u. Ung thư xuất phát từ đại tràng sigmoid, một vị trí giải phẫu phổ biến của ung thư đại trực tràng sporadic, và có tính ổn định microsatellite (MSS), điều này xếp nó vào nhóm bất ổn nhiễm sắc thể (CIN) thay vì nhóm MSI-cao có đột biến cao của các khối u đại trực tràng.

Phân tích phân tử của HROC348 cho thấy trạng thái kiểu gen hoang dã (wild-type) cho cả KRAS và BRAF, cho thấy sự vắng mặt của các đột biến kích hoạt phổ biến trong các gen này, thường liên quan đến tiến triển ung thư đại trực tràng và kháng trị liệu. Nền tảng phân tử này khiến HROC348 đặc biệt phù hợp cho các nghiên cứu tập trung vào tín hiệu RAS/RAF không đột biến và tác động của nó đối với sự phát triển khối u, phản ứng điều trị và cơ chế kháng trị. Dòng tế bào không thể hiện kiểu hình methyl hóa đảo CpG (CIMP), càng củng cố việc phân loại nó vào nhóm ung thư đại trực tràng truyền thống (không hypermutated).

Lâm sàng, khối u có di căn hạch bạch huyết (LN_pos = 2), nhưng di căn xa (M) chỉ được ghi nhận một lần, và không có sự tham gia của đại tràng bên phải, phù hợp với đặc điểm của ung thư đại trực tràng bên trái. Các đặc điểm này, kết hợp với trạng thái MSS và các dấu ấn phân tử, đặt HROC348 là mô hình đại diện để nghiên cứu ung thư đại tràng bên trái, KRAS/BRAF kiểu hoang dã, ổn định microsatellite. Nó cũng mang lại giá trị chuyển giao cho thử nghiệm tiền lâm sàng của các liệu pháp nhắm mục tiêu và các tác nhân điều hòa miễn dịch trong các khối u MSS, vốn thường ít đáp ứng với chặn điểm kiểm soát miễn dịch.

Tissue
Đại tràng sigmoid
Disease
Ung thư biểu mô
Metastatic site
Chưa có báo cáo (ung thư biểu mô tuyến đại tràng sigmoid nguyên phát; không có di căn xa được xác nhận tại thời điểm lấy mẫu)
Applications
Nghiên cứu ung thư đại trực tràng; Sinh học của ung thư đại trực tràng (CRC) kiểu MSS với gen KRAS/BRAF kiểu hoang dã; Mô hình hóa ung thư đại trực tràng bên trái; Độ nhạy cảm với thuốc ở các khối u không có đột biến RAS/RAF; Các nghiên cứu từ ngân hàng sinh học HROC Linnebacher; Đánh giá liệu pháp miễn dịch trong ung thư đại trực tràng; Ung thư học tiền lâm sàng

02Classification

Organism
Human
Sex
Male
Growth properties
Adherent
GMO status
Non-GMO
GMO status details
No genetic modification; wildtype patient-derived CRC cell line from the HROC Linnebacher biobank. KRAS wild-type, BRAF wild-type, MSS, CIMP-negative.
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
Tương tự biểu mô
Cell type
Tế bào biểu mô
MSI status
MSS

04Identifiers

Citation
HROC348 (Số catalog Cytion 300719)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
Not assigned

05Handling and culture

Culture medium
DMEM:Ham's F12 (tỷ lệ 1:1), chứa: 3,1 g/L glucose, chứa: 2,5 mM L-glutamine, chứa: 15 mM HEPES, chứa: 0,5 mM natri pyruvate, chứa: 1,2 g/L NaHCO₃ (Số hiệu sản phẩm Cytion 820400a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO₂, môi trường ẩm.

Supplements
Bổ sung 10% huyết thanh bò phôi (FBS) vào môi trường nuôi cấy
Dissociation reagent
Accutase
Subculturing
Loại bỏ môi trường nuôi cấy cũ khỏi các tế bào bám dính và rửa chúng bằng PBS không chứa canxi và magiê. Đối với bình T25, sử dụng 3-5 ml PBS, và đối với bình T75, sử dụng 5-10 ml. Sau đó, phủ hoàn toàn các tế bào bằng Accutase, sử dụng 1-2 ml cho bình T25 và 2,5 ml cho bình T75. Để tế bào ủ ở nhiệt độ phòng trong 8-10 phút để tách chúng ra. Sau khi ủ, nhẹ nhàng trộn tế bào với 10 ml môi trường để tái phân tán chúng, sau đó ly tâm ở 300xg trong 3 phút. Loại bỏ dịch trên, tái phân tán tế bào trong môi trường tươi và chuyển chúng vào các bình mới đã chứa môi trường tươi.
Fluid renewal
2 đến 3 lần mỗi tuần
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Quality control and cryopreservation

Sterility

Sự nhiễm khuẩn Mycoplasma được loại trừ bằng cả các phương pháp xét nghiệm dựa trên PCR và các phương pháp phát hiện Mycoplasma dựa trên phát quang.

Để đảm bảo không có nhiễm khuẩn vi khuẩn, nấm hoặc men, các mẫu nuôi cấy tế bào được kiểm tra trực quan hàng ngày.

Freeze medium
Như một môi trường bảo quản đông lạnh, chúng tôi sử dụng môi trường tăng trưởng hoàn chỉnh (bao gồm FBS) + 10% DMSO để đảm bảo độ sống sau khi rã đông, hoặc CM-1 (mã sản phẩm Cytion 800100), bao gồm các chất bảo vệ thẩm thấu và chất ổn định chuyển hóa được tối ưu hóa để cải thiện quá trình phục hồi và giảm stress do đông lạnh gây ra.
Storage conditions

Để bảo quản lâu dài, hãy đặt ống nghiệm vào nitơ lỏng ở pha hơi ở nhiệt độ khoảng −150 đến −196 °C. Việc bảo quản ở −80 °C chỉ được chấp nhận như một bước trung gian ngắn hạn trước khi chuyển sang nitơ lỏng.

Shipping conditions

Các dòng tế bào được bảo quản bằng phương pháp đông lạnh được vận chuyển trên đá khô trong bao bì cách nhiệt đã được kiểm định, kèm theo lượng chất làm lạnh đủ để duy trì nhiệt độ khoảng −78 °C trong suốt quá trình vận chuyển. Khi nhận hàng, hãy kiểm tra ngay lập tức bao bì và chuyển các ống nghiệm sang nơi lưu trữ phù hợp mà không chậm trễ.

07Donor

Donor age
77 năm
Ethnicity
Người da trắng