Skip to content
HROC348
Tissue
ลำไส้ใหญ่ส่วนซิกมอยด์
Disease
มะเร็งชนิดคาร์ซินอมา
Metastatic site
ไม่พบรายงาน (มะเร็งต่อมน้ำเหลืองชนิดอะดีโนคาร์ซิโนมาของลำไส้ใหญ่ส่วนซิกมอยด์; ไม่มีการแพร่กระจายไปยังส่วนอื่นของร่างกายที่ได้รับการยืนยัน ณ เวลาที่ทำการเก็บตัวอย่าง)

Documents

HROC348

Cell line · Product number 300719

HROC348 is a human colorectal carcinoma cell line derived from a primary tumor resected from an adult male patient diagnosed with sigmoid colon cancer. Th...

€800.00excl. tax and shipping
In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

HROC348 เป็นเซลล์ไลน์มะเร็งลำไส้ใหญ่และทวารหนักของมนุษย์ที่ได้มาจากเนื้องอกปฐมภูมิซึ่งถูกตัดออกจากผู้ป่วยชายวัยผู้ใหญ่ที่ได้รับการวินิจฉัยว่าเป็นมะเร็งลำไส้ใหญ่ส่วนซิกมอยด์ เนื้องอกถูกจัดประเภทเป็นมะเร็งต่อมชนิดมีลักษณะปานกลาง (T3, G3, N2) ซึ่งบ่งชี้ถึงการลุกลามในท้องถิ่นอย่างมีนัยสำคัญและการแพร่กระจายไปยังต่อมน้ำเหลือง สอดคล้องกับพฤติกรรมของเนื้องอกที่มีความรุนแรงมะเร็งชนิดคาร์ซิโนมาเริ่มต้นที่ลำไส้ใหญ่ส่วนซิกมอยด์ ซึ่งเป็นตำแหน่งทางกายวิภาคที่พบได้บ่อยสำหรับมะเร็งลำไส้ใหญ่และทวารหนักชนิดไม่เฉพาะเจาะจง และแสดงลักษณะความคงตัวของไมโครแซทเทลไลต์ (MSS) ซึ่งจัดให้อยู่ในกลุ่มชนิดที่มีความไม่เสถียรของโครโมโซม (CIN) มากกว่ากลุ่มเนื้องอกลำไส้ใหญ่และทวารหนักชนิด MSI-สูงที่มีความกลายพันธุ์สูง

การวิเคราะห์โปรไฟล์โมเลกุลของ HROC348 แสดงสถานะปกติของทั้ง KRAS และ BRAF ซึ่งบ่งชี้ถึงการไม่มีกลายพันธุ์ที่กระตุ้นการทำงานร่วมกันในยีนเหล่านี้ที่มักเกี่ยวข้องกับการลุกลามของมะเร็งลำไส้ใหญ่และทวารหนักและการดื้อต่อการรักษา พื้นฐานทางโมเลกุลนี้ทำให้ HROC348 เหมาะสมเป็นพิเศษสำหรับการศึกษาที่มุ่งเน้นไปที่การส่งสัญญาณ RAS/RAF ที่ไม่มีการกลายพันธุ์และผลกระทบต่อการเจริญเติบโตของเนื้องอก การตอบสนองต่อการรักษา และกลไกการดื้อต่อยาสายเซลล์นี้ไม่แสดงลักษณะทางฟีโนไทป์ของเมทิลเลเตอร์เกาะ CpG (CIMP) ซึ่งสนับสนุนเพิ่มเติมการจัดประเภทของมันในกลุ่มย่อยของมะเร็งลำไส้ใหญ่และทวารหนักแบบดั้งเดิม (ที่ไม่มีการกลายพันธุ์สูง)

ทางคลินิก พบว่าก้อนเนื้องอกมีการแพร่กระจายไปยังต่อมน้ำเหลือง (LN_pos = 2) แต่พบการแพร่กระจายไปยังที่ห่างไกล (M) เพียงครั้งเดียว และไม่มีการบันทึกการลุกลามไปยังลำไส้ใหญ่ด้านขวา ซึ่งสอดคล้องกับลักษณะของมะเร็งลำไส้ใหญ่และทวารหนักด้านซ้ายคุณสมบัติเหล่านี้ เมื่อรวมกับสถานะ MSS และเครื่องหมายโมเลกุล ทำให้ HROC348 เป็นแบบจำลองตัวแทนสำหรับการศึกษาโรคมะเร็งลำไส้ใหญ่และทวารหนักชนิดอะดีโนคาร์ซิโนมาที่มี KRAS/BRAF ชนิดปกติ และไมโครแซทเทลไลต์คงที่ทางด้านซ้าย นอกจากนี้ยังมีคุณค่าในการแปลผลสู่การทดสอบก่อนคลินิกสำหรับยาที่มุ่งเป้าและสารปรับภูมิคุ้มกันในเนื้องอก MSS ซึ่งโดยทั่วไปตอบสนองต่อการยับยั้งจุดตรวจภูมิคุ้มกันน้อยกว่า

Tissue
ลำไส้ใหญ่ส่วนซิกมอยด์
Disease
มะเร็งชนิดคาร์ซินอมา
Metastatic site
ไม่พบรายงาน (มะเร็งต่อมน้ำเหลืองชนิดอะดีโนคาร์ซิโนมาของลำไส้ใหญ่ส่วนซิกมอยด์; ไม่มีการแพร่กระจายไปยังส่วนอื่นของร่างกายที่ได้รับการยืนยัน ณ เวลาที่ทำการเก็บตัวอย่าง)
Applications
การวิจัยมะเร็งลำไส้ใหญ่และทวารหนัก; ชีววิทยาของมะเร็งลำไส้ใหญ่และทวารหนักชนิด KRAS/BRAF wild-type MSS; การสร้างแบบจำลองมะเร็งลำไส้ใหญ่และทวารหนักด้านซ้าย; ความไวต่อยาในเนื้องอก RAS/RAF ที่ไม่มีการกลายพันธุ์; การศึกษาธนาคารชีวภาพ HROC Linnebacher; การประเมินภูมิคุ้มกันบำบัดมะเร็งลำไส้ใหญ่และทวารหนัก; มะเร็งวิทยาในระยะก่อนคลินิก

02Classification

Organism
Human
Sex
Male
Growth properties
Adherent
GMO status
Non-GMO
GMO status details
No genetic modification; wildtype patient-derived CRC cell line from the HROC Linnebacher biobank. KRAS wild-type, BRAF wild-type, MSS, CIMP-negative.
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
ลักษณะคล้ายเยื่อบุผิว
Cell type
เซลล์เยื่อบุผิว
MSI status
เอ็มเอสเอส

04Identifiers

Citation
HROC348 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 300719)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
Not assigned

05Handling and culture

Culture medium
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3.1 กรัม/ลิตร กลูโคส, w: 2.5 มิลลิโมลาร์ L-กลูตามีน, w: 15 มิลลิโมลาร์ HEPES, w: 0.5 มิลลิโมลาร์ โซเดียมไพรูเวต, w: 1.2 กรัม/ลิตร NaHCO3 (หมายเลขบทความ Cytion 820400a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, บรรยากาศชื้น

Supplements
เติมอาหารเลี้ยงเชื้อด้วย FBS 10%
Dissociation reagent
แอคคูเทส
Subculturing
นำอาหารเลี้ยงเซลล์เก่าออกจากเซลล์ที่เกาะติดและล้างด้วย PBS ที่ไม่มีแคลเซียมและแมกนีเซียม สำหรับขวด T25 ให้ใช้ PBS 3-5 มล. และสำหรับขวด T75 ให้ใช้ 5-10 มล. จากนั้นปิดเซลล์ให้มิดด้วย Accutase โดยใช้ 1-2 มล. สำหรับขวด T25 และ 2.5 มล. สำหรับขวด T75ปล่อยให้เซลล์บ่มที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 8-10 นาทีเพื่อให้เซลล์หลุดออกจากกัน หลังจากบ่มแล้ว ให้ผสมเซลล์เบา ๆ กับอาหารเลี้ยงเซลล์ 10 มิลลิลิตรเพื่อทำให้เซลล์แขวนลอยอีกครั้ง จากนั้นปั่นเหวี่ยงที่ 300 เท่าของแรงโน้มถ่วงโลก (300xg) เป็นเวลา 3 นาที เทส่วนใสที่ได้ทิ้งไป แล้วแขวนลอยเซลล์ในอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ จากนั้นถ่ายเซลล์ไปยังขวดเพาะเลี้ยงใหม่ที่เติมอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ไว้แล้ว
Fluid renewal
2 ถึง 3 ครั้งต่อสัปดาห์
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Quality control and cryopreservation

Sterility

การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง

เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

Freeze medium
ในฐานะที่เป็นสารอาหารสำหรับการแช่แข็ง เราใช้สารอาหารสำหรับการเจริญเติบโตแบบครบถ้วน (รวมถึง FBS) + 10% DMSO เพื่อความมีชีวิตหลังการละลายที่เพียงพอ หรือ CM-1 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 800100) ซึ่งรวมถึงสารป้องกันออสโมติกและสารรักษาเสถียรภาพเมตาบอลิซึมที่ได้รับการปรับให้เหมาะสมเพื่อเพิ่มการฟื้นตัวและลดความเครียดที่เกิดจากการแช่แข็ง
Storage conditions

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

Shipping conditions

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

07Donor

Donor age
77 ปี
Ethnicity
คอเคเชียน