KMH-2

KMH-2 es una línea celular de carcinoma anaplásico de tiroides (CAT) humano derivada de un paciente varón con una forma de cáncer de tiroides de progresión rápida y mortal. El carcinoma anaplásico de tiroides es uno de los tumores malignos de tiroides más agresivos y letales, caracterizado por su rápido crecimiento y su resistencia a las terapias convencionales. Las células KMH-2 se obtuvieron a partir de una biopsia del tumor primario antes de que el paciente recibiera cualquier tratamiento de quimioterapia o radioterapia. Estas células son de gran relevancia para estudiar la fisiopatología del ATC, así como para evaluar la eficacia de nuevos agentes terapéuticos.

La línea celular KMH-2 presenta una morfología fusiforme cuando se cultiva in vitro, lo cual es típico de muchas células del carcinoma anaplásico de tiroides. Estas células han mostrado resistencia a múltiples agentes quimioterapéuticos, entre ellos el cisplatino, la doxorrubicina, el etopósido y la pepleomicina, lo que refleja el desafío clínico que representa el tratamiento del ATC. La quimiorresistencia en las células KMH-2 se ha atribuido a la expresión del ARNm de la proteína asociada a la resistencia a múltiples fármacos (MRP), aunque no expresan los ARNm mdr-1 y mdr-3 asociados con la glicoproteína P, lo que sugiere que su mecanismo de resistencia a los fármacos es independiente de la glicoproteína P. Esta resistencia a la quimioterapia convierte a las KMH-2 en un modelo valioso para investigar estrategias de tratamiento alternativas.

En cuanto a las características de crecimiento, las células KMH-2 tienen tiempos de duplicación relativamente largos, y su tumorigenicidad se ha confirmado en modelos de xenotransplante utilizando ratones desnudos atímicos. Sin embargo, estas células requirieron condiciones específicas para potenciar la proliferación in vivo, como el uso de una pequeña placa de plástico para facilitar el crecimiento tras la inoculación. El análisis cromosómico de las células KMH-2 ha revelado múltiples anomalías, una característica común en los cánceres agresivos, lo que subraya aún más su utilidad para estudiar los fundamentos genéticos del carcinoma anaplásico de tiroides.

37 °C, 5 % de CO₂, atmósfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Se descarta la contaminación por micoplasmas mediante ensayos basados en PCR y métodos de detección de micoplasmas basados en luminiscencia.

Para garantizar que no haya contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Para la conservación a largo plazo, coloque los viales en nitrógeno líquido en fase de vapor a una temperatura de entre −150 y −196 °C, aproximadamente. El almacenamiento a −80 °C solo es aceptable como un paso intermedio breve antes de transferirlos al nitrógeno líquido.

Las líneas celulares criopreservadas se envían en hielo seco, en un embalaje aislante validado que contiene suficiente refrigerante para mantener una temperatura de aproximadamente −78 °C durante todo el transporte. Al recibir el envío, revise el contenedor de inmediato y traslade los viales sin demora al lugar de almacenamiento adecuado.

En Cytion, respaldamos la calidad y la viabilidad de nuestros productos. Garantizamos que nuestras células serán viables al inicio del cultivo durante 60 días a partir de la fecha de envío desde nuestras instalaciones. Aseguramos que todos los materiales cumplen con las especificaciones descritas en el Certificado de Análisis y/o la Ficha del Producto.

Para obtener más detalles, consulte nuestra Declaración de garantía.