KMH-2

A KMH-2 é uma linhagem celular de carcinoma anaplásico da tireoide (ATC) humano, derivada de um paciente do sexo masculino com uma forma fatal e de rápida progressão de câncer de tireoide. O carcinoma anaplásico da tireoide é uma das neoplasias malignas da tireoide mais agressivas e letais, caracterizada por seu rápido crescimento e resistência às terapias convencionais. As células KMH-2 foram isoladas a partir de uma biópsia do tumor primário antes de o paciente ser submetido a qualquer quimioterapia ou radioterapia. Essas células são altamente relevantes para o estudo da fisiopatologia do ATC, bem como para testar a eficácia de novos agentes terapêuticos.

A linhagem celular KMH-2 apresenta uma morfologia fusiforme quando cultivada in vitro, o que é típico de muitas células do carcinoma anaplásico da tireoide. Essas células demonstraram resistência a diversos agentes quimioterápicos, incluindo cisplatina, doxorrubicina, etoposídeo e pepleomicina, refletindo o desafio clínico do tratamento do ATC. A quimiorresistência nas células KMH-2 tem sido atribuída à expressão do mRNA da proteína associada à resistência a múltiplas drogas (MRP), embora elas não expressem os mRNAs mdr-1 e mdr-3 associados à glicoproteína P, sugerindo que seu mecanismo de resistência aos medicamentos é independente da glicoproteína P. Essa resistência à quimioterapia torna as células KMH-2 um modelo valioso para a investigação de estratégias alternativas de tratamento.

Em termos de características de crescimento, as células KMH-2 apresentam tempos de duplicação relativamente longos, e sua tumorigenicidade foi confirmada em modelos de xenotransplante utilizando camundongos nus atímicos. No entanto, essas células exigiram condições específicas para aumentar a proliferação in vivo, como o uso de uma pequena placa de plástico para facilitar o crescimento após a inoculação. A análise cromossômica do KMH-2 revelou múltiplas anomalias, uma característica comum em cânceres agressivos, o que ressalta ainda mais sua utilidade no estudo das bases genéticas do carcinoma anaplásico da tireoide.

37 °C, 5% de CO₂, atmosfera umidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A contaminação por micoplasma é descartada por meio de ensaios baseados em PCR e de métodos de detecção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não haja contaminação por bactérias, fungos ou leveduras, as culturas celulares são submetidas a inspeções visuais diárias.

Para preservação a longo prazo, coloque os frascos em nitrogênio líquido em fase de vapor a uma temperatura entre aproximadamente −150 e −196 °C. O armazenamento a −80 °C é aceitável apenas como uma etapa intermediária de curta duração antes da transferência para o nitrogênio líquido.

As linhagens celulares criopreservadas são enviadas em gelo seco, em embalagens isoladas e validadas, com refrigerante suficiente para manter a temperatura em aproximadamente −78 °C durante todo o transporte. Ao receber a remessa, inspecione o recipiente imediatamente e transfira os frascos sem demora para o local de armazenamento adequado.

Na Cytion, garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células permanecerão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou na Ficha Técnica do Produto.

Para obter todos os detalhes, consulte nossa Declaração de Garantia.