Skip to content
KMH-2
Tissue
ไทรอยด์
Disease
มะเร็งต่อมไทรอยด์ชนิดแอนาพลาสติก
Metastatic site
น้ำในช่องเยื่อหุ้มปอด
Synonyms
KMHDASH2, KMH2

Documents

KMH-2

Cell line · Product number 305142

KMH-2 is a human anaplastic thyroid carcinoma (ATC) cell line derived from a male patient with a rapidly progressing and fatal form of thyroid cancer. Ana...

€800.00excl. tax and shipping

Customization / Recommendations

In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

KMH-2 เป็นสายพันธุ์เซลล์มะเร็งต่อมไทรอยด์ชนิดแอนาพลาสติก (ATC) ในมนุษย์ ซึ่งสกัดมาจากผู้ป่วยชายที่มีมะเร็งต่อมไทรอยด์ชนิดลุกลามอย่างรวดเร็วและเป็นอันตรายถึงชีวิต มะเร็งต่อมไทรอยด์ชนิดแอนาพลาสติกถือเป็นหนึ่งในมะเร็งต่อมไทรอยด์ที่มีความรุนแรงและอันตรายที่สุด โดยมีลักษณะเด่นคือเจริญเติบโตอย่างรวดเร็วและดื้อต่อวิธีการรักษาแบบมาตรฐานเซลล์ KMH-2 ถูกสร้างขึ้นจากการตัดชิ้นเนื้อของเนื้องอกปฐมภูมิ ก่อนที่ผู้ป่วยจะได้รับการรักษาด้วยเคมีบำบัดหรือรังสีบำบัด เซลล์เหล่านี้มีความเกี่ยวข้องสูงในการศึกษาพยาธิสรีรวิทยาของมะเร็งหลอดอาหารชนิดอะดีโนคาร์ซิโนมา (ATC) รวมถึงใช้ในการทดสอบประสิทธิภาพของสารบำบัดใหม่

เซลล์ไลน์ KMH-2 แสดงลักษณะรูปร่างคล้ายแกนหมุนเมื่อเพาะเลี้ยงในหลอดทดลอง ซึ่งเป็นลักษณะทั่วไปของเซลล์มะเร็งต่อมไทรอยด์ชนิดแอนาพลาสติกหลายชนิด เซลล์เหล่านี้แสดงการดื้อต่อยาเคมีบำบัดหลายชนิด รวมถึงซิสพลาติน โดซอร์รูบิซิน อีโทโพไซด์ และเพพเลโอมัยซิน สะท้อนถึงความท้าทายทางคลินิกในการรักษามะเร็งต่อมไทรอยด์ชนิดแอนาพลาสติก (ATC)การดื้อยาเคมีในเซลล์ KMH-2 ถูกสันนิษฐานว่าเกิดจากการแสดงออกของ mRNA ของโปรตีนที่เกี่ยวข้องกับการดื้อยาหลายชนิด (MRP) แม้ว่าพวกมันจะไม่แสดงออกของ mRNA ของ mdr-1 และ mdr-3 ที่เกี่ยวข้องกับ P-glycoprotein ซึ่งบ่งชี้ว่ากลไกการดื้อยาของพวกมันไม่ขึ้นอยู่กับ P-glycoprotein การดื้อต่อเคมีบำบัดนี้ทำให้ KMH-2 เป็นแบบจำลองที่มีคุณค่าสำหรับการศึกษาวิธีการรักษาทางเลือก

ในแง่ของคุณลักษณะการเจริญเติบโต เซลล์ KMH-2 มีระยะเวลาในการเพิ่มจำนวนเป็นสองเท่าค่อนข้างนาน และความสามารถในการก่อเนื้องอกได้รับการยืนยันแล้วในแบบจำลองการปลูกถ่ายข้ามสายพันธุ์โดยใช้หนูที่ไม่มีระบบภูมิคุ้มกัน (athymic nude mice) อย่างไรก็ตาม เซลล์เหล่านี้ต้องการสภาวะเฉพาะเพื่อเพิ่มการเพิ่มจำนวนในร่างกาย เช่น การใช้แผ่นพลาสติกขนาดเล็กเพื่อช่วยในการเจริญเติบโตหลังการปลูกถ่ายการวิเคราะห์โครโมโซมของ KMH-2 ได้เปิดเผยความผิดปกติหลายประการ ซึ่งเป็นลักษณะทั่วไปในมะเร็งที่มีความรุนแรงสูง ซึ่งยิ่งตอกย้ำประโยชน์ในการศึกษาพื้นฐานทางพันธุกรรมของมะเร็งไทรอยด์ชนิดแอนาพลาสติก

Tissue
ไทรอยด์
Disease
มะเร็งต่อมไทรอยด์ชนิดแอนาพลาสติก
Metastatic site
น้ำในช่องเยื่อหุ้มปอด
Synonyms
  • KMHDASH2
  • KMH2

02Classification

Organism
Human
Sex
Male
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
เซลล์รูปแกนหมุนที่มีเซลล์ขนาดใหญ่
Doubling time
58 ชั่วโมง

04Identifiers

Citation
KMH-2 (หมายเลขในแคตตาล็อก Cytion 305142)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_S641

05Handling and culture

Culture medium
RPMI 1640, w: 2.0 mM กลูตามีนเสถียร, w: 2.0 กรัม/ลิตร NaHCO3 (หมายเลขบทความ Cytion 820700a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, บรรยากาศชื้น

Supplements
เติมอาหารเลี้ยงเชื้อด้วย FBS 10%
Dissociation reagent
แอคคูเทส
Subculturing
นำอาหารเลี้ยงเซลล์เก่าออกจากเซลล์ที่เกาะติดและล้างด้วย PBS ที่ไม่มีแคลเซียมและแมกนีเซียม สำหรับขวด T25 ให้ใช้ PBS 3-5 มล. และสำหรับขวด T75 ให้ใช้ 5-10 มล. จากนั้นปิดเซลล์ให้มิดด้วย Accutase โดยใช้ 1-2 มล. สำหรับขวด T25 และ 2.5 มล. สำหรับขวด T75ปล่อยให้เซลล์บ่มที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 8-10 นาทีเพื่อให้เซลล์หลุดออกจากกัน หลังจากบ่มแล้ว ให้ผสมเซลล์เบา ๆ กับอาหารเลี้ยงเซลล์ 10 มิลลิลิตรเพื่อทำให้เซลล์แขวนลอยอีกครั้ง จากนั้นปั่นเหวี่ยงที่ 300 เท่าของแรงโน้มถ่วงโลก (300xg) เป็นเวลา 3 นาที เทส่วนใสที่ได้ทิ้งไป แล้วแขวนลอยเซลล์ในอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ จากนั้นถ่ายเซลล์ไปยังขวดเพาะเลี้ยงใหม่ที่เติมอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ไว้แล้ว
Fluid renewal
2 ถึง 3 ครั้งต่อสัปดาห์
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Quality control and cryopreservation

Sterility

การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง

เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

Freeze medium
ในฐานะที่เป็นสารอาหารสำหรับการแช่แข็ง เราใช้สารอาหารสำหรับการเจริญเติบโตแบบครบถ้วน (รวมถึง FBS) + 10% DMSO เพื่อความมีชีวิตหลังการละลายที่เพียงพอ หรือ CM-1 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 800100) ซึ่งรวมถึงสารป้องกันออสโมติกและสารรักษาเสถียรภาพเมตาบอลิซึมที่ได้รับการปรับให้เหมาะสมเพื่อเพิ่มการฟื้นตัวและลดความเครียดที่เกิดจากการแช่แข็ง
Storage conditions

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

Shipping conditions

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

07Donor

Donor age
71 ปี
Ethnicity
เอเชีย