KYSE180

La línea celular KYSE180 es un modelo de carcinoma escamoso de esófago (ESCC) humano derivado de un tumor primario. Esta línea celular se clasifica como moderadamente diferenciada y presenta una serie de alteraciones genéticas características del ESCC, incluidas mutaciones en la vía de señalización NRF2 (NFE2L2). Específicamente, las células KYSE180 albergan la mutación NRF2 D77V, la cual contribuye a la hiperactivación de NRF2, un factor de transcripción involucrado en la respuesta al estrés oxidativo y la progresión tumoral.

Las células KYSE180 se utilizan ampliamente para estudiar los mecanismos moleculares del ESCC, incluyendo la quimiorresistencia y la señalización oncogénica. El aumento de la actividad de NRF2 en las células KYSE180 se ha relacionado con la resistencia a la quimioterapia y la radioterapia, ya que NRF2 potencia las defensas antioxidantes celulares y las adaptaciones metabólicas. Investigaciones recientes han identificado compuestos como la pirimetamina que inhiben la señalización de NRF2, lo que da como resultado una reducción en la proliferación y la tumorigenicidad de las células KYSE180. Dichos estudios resaltan el potencial terapéutico de actuar sobre NRF2 en cánceres con altos niveles de NRF2.

Además, las células KYSE180 se han utilizado para evaluar el papel de la familia de enzimas aldo-ceto reductasas (AKR), en particular AKR1C1 y AKR1C2, en el metabolismo de los fármacos y la quimioprevención. La expresión de estas enzimas está regulada al alza en las células KYSE180, lo que aumenta la sensibilidad a agentes como el 3,4-dihidroxibenzoato de etilo (EDHB). Este compuesto induce la apoptosis y la autofagia, lo que demuestra la utilidad de esta línea celular para explorar las respuestas a los fármacos y los mecanismos de estrés celular en el ESCC.

37 °C, 5 % de CO₂, atmósfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Se descarta la contaminación por micoplasmas mediante ensayos basados en PCR y métodos de detección de micoplasmas basados en luminiscencia.

Para garantizar que no haya contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Para la conservación a largo plazo, coloque los viales en nitrógeno líquido en fase de vapor a una temperatura de entre −150 y −196 °C, aproximadamente. El almacenamiento a −80 °C solo es aceptable como un paso intermedio breve antes de transferirlos al nitrógeno líquido.

Las líneas celulares criopreservadas se envían en hielo seco, en un embalaje aislante validado que contiene suficiente refrigerante para mantener una temperatura de aproximadamente −78 °C durante todo el transporte. Al recibir el envío, revise el contenedor de inmediato y traslade los viales sin demora al lugar de almacenamiento adecuado.

En Cytion, respaldamos la calidad y la viabilidad de nuestros productos. Garantizamos que nuestras células serán viables al inicio del cultivo durante 60 días a partir de la fecha de envío desde nuestras instalaciones. Aseguramos que todos los materiales cumplen con las especificaciones descritas en el Certificado de Análisis y/o la Ficha del Producto.

Para obtener más detalles, consulte nuestra Declaración de garantía.