Skip to content
KYSE180
Tissue
หลอดอาหาร
Disease
มะเร็งผิวหนังชนิดเซลล์สความัส
Synonyms
KYSE 180, KYSE-180, Kyse180, KY180

Documents

KYSE180

Cell line · Product number 305450

The KYSE180 cell line is a human esophageal squamous cell carcinoma (ESCC) model derived from a primary tumor. This cell line is classified as moderately ...

€420.00excl. tax and shipping

Customization / Recommendations

In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

สายเซลล์ KYSE180 เป็นแบบจำลองของมะเร็งเซลล์สแควมัสในหลอดอาหารของมนุษย์ (ESCC) ที่ได้มาจากก้อนมะเร็งต้นกำเนิด สายเซลล์นี้ถูกจัดประเภทว่าเป็นเซลล์ที่มีการแยกตัวในระดับปานกลาง และแสดงการเปลี่ยนแปลงทางพันธุกรรมหลายประการที่เป็นลักษณะเฉพาะของ ESCC รวมถึงการกลายพันธุ์ในเส้นทางสัญญาณ NRF2 (NFE2L2) โดยเฉพาะอย่างยิ่ง เซลล์ KYSE180 มีการกลายพันธุ์ NRF2 D77V ซึ่งส่งผลให้เกิดการกระตุ้นเกินปกติของ NRF2 ซึ่งเป็นปัจจัยการถอดรหัสที่เกี่ยวข้องกับการตอบสนองต่อความเครียดออกซิเดทีฟและการพัฒนาของเนื้องอก

เซลล์ KYSE180 ถูกใช้อย่างแพร่หลายในการศึกษากลไกระดับโมเลกุลของ ESCC รวมถึงความต้านทานต่อเคมีบำบัดและสัญญาณการก่อมะเร็ง ความกิจกรรมของ NRF2 ที่เพิ่มขึ้นในเซลล์ KYSE180 ได้ถูกเชื่อมโยงกับความต้านทานต่อเคมีบำบัดและรังสีบำบัด เนื่องจาก NRF2 ช่วยเสริมสร้างกลไกป้องกันอนุมูลอิสระของเซลล์และการปรับตัวทางเมแทบอลิซึม การวิจัยล่าสุดได้ระบุสารประกอบเช่น pyrimethamine ที่ยับยั้งสัญญาณ NRF2 ซึ่งส่งผลให้การเพิ่มจำนวนและศักยภาพในการก่อมะเร็งของเซลล์ KYSE180 ลดลง การศึกษาดังกล่าวเน้นย้ำถึงศักยภาพในการรักษาโดยการมุ่งเป้าไปที่ NRF2 ในมะเร็งที่มีระดับ NRF2 สูง

นอกจากนี้ เซลล์ KYSE180 ยังถูกนำมาใช้เพื่อประเมินบทบาทของกลุ่มเอนไซม์อัลโด-เคโต เรดักเทส (AKR) โดยเฉพาะ AKR1C1 และ AKR1C2 ในกระบวนการเมแทบอลิซึมของยาและการป้องกันมะเร็งด้วยยา การแสดงออกของเอนไซม์เหล่านี้ถูกเพิ่มระดับในเซลล์ KYSE180 ซึ่งทำให้เซลล์มีความไวต่อสารต่าง ๆ เช่น ethyl-3,4-dihydroxybenzoate (EDHB) สารนี้กระตุ้นการตายแบบอะพอพโทซิสและการออโตฟาจี ซึ่งแสดงให้เห็นถึงประโยชน์ของสายเซลล์นี้ในการศึกษาการตอบสนองต่อยาและกลไกความเครียดของเซลล์ในมะเร็งหลอดอาหารส่วนต้น (ESCC)

Tissue
หลอดอาหาร
Disease
มะเร็งผิวหนังชนิดเซลล์สความัส
Synonyms
  • KYSE 180
  • KYSE-180
  • Kyse180
  • KY180

02Classification

Organism
Human
Sex
Male
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
ลักษณะคล้ายเยื่อบุผิว
MSI status
เสถียร (MSS)

04Identifiers

Citation
KYSE180 (หมายเลขในแคตตาล็อก Cytion 305450)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_1349

05Expression and susceptibility

Mutational profile
การกลายพันธุ์: TP53, p.Ile195Thr (c.584T>C), แบบโฮโมไซกัส

06Handling and culture

Culture medium
RPMI 1640, w: 2.0 mM กลูตามีนเสถียร, w: 2.0 กรัม/ลิตร NaHCO3 (หมายเลขบทความ Cytion 820700a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, บรรยากาศชื้น

Supplements
เติมอาหารเลี้ยงเชื้อด้วย FBS 10%
Dissociation reagent
แอคคูเทส
Subculturing
นำอาหารเลี้ยงเซลล์เก่าออกจากเซลล์ที่เกาะติดและล้างด้วย PBS ที่ไม่มีแคลเซียมและแมกนีเซียม สำหรับขวด T25 ให้ใช้ PBS 3-5 มล. และสำหรับขวด T75 ให้ใช้ 5-10 มล. จากนั้นปิดเซลล์ให้มิดด้วย Accutase โดยใช้ 1-2 มล. สำหรับขวด T25 และ 2.5 มล. สำหรับขวด T75ปล่อยให้เซลล์บ่มที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 8-10 นาทีเพื่อให้เซลล์หลุดออกจากกัน หลังจากบ่มแล้ว ให้ผสมเซลล์เบา ๆ กับอาหารเลี้ยงเซลล์ 10 มิลลิลิตรเพื่อทำให้เซลล์แขวนลอยอีกครั้ง จากนั้นปั่นเหวี่ยงที่ 300 เท่าของแรงโน้มถ่วงโลก (300xg) เป็นเวลา 3 นาที เทส่วนใสที่ได้ทิ้งไป แล้วแขวนลอยเซลล์ในอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ จากนั้นถ่ายเซลล์ไปยังขวดเพาะเลี้ยงใหม่ที่เติมอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ไว้แล้ว
Seeding density
2–4 × 10⁴/cm²
Fluid renewal
2 ครั้งต่อสัปดาห์
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง

เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

Freeze medium
ในฐานะที่เป็นสารอาหารสำหรับการแช่แข็ง เราใช้สารอาหารสำหรับการเจริญเติบโตแบบครบถ้วน (รวมถึง FBS) + 10% DMSO เพื่อความมีชีวิตหลังการละลายที่เพียงพอ หรือ CM-1 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 800100) ซึ่งรวมถึงสารป้องกันออสโมติกและสารรักษาเสถียรภาพเมตาบอลิซึมที่ได้รับการปรับให้เหมาะสมเพื่อเพิ่มการฟื้นตัวและลดความเครียดที่เกิดจากการแช่แข็ง
Storage conditions

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

Shipping conditions

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

08Donor

Donor age
53 ปี
Ethnicity
ญี่ปุ่น