Skip to content
KYSE520
Tissue
หลอดอาหาร
Disease
มะเร็งผิวหนังชนิดเซลล์สความัส
Synonyms
KYSE 520, KYSE-520, Kyse520, KYSE0520

Documents

KYSE520

Cell line · Product number 305449

The KYSE520 cell line is a human esophageal squamous cell carcinoma (ESCC) model derived from a primary tumor. It is moderately differentiated and has bee...

€550.00excl. tax and shipping

Customization / Recommendations

In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

สายเซลล์ KYSE520 เป็นแบบจำลองมะเร็งเซลล์สความัสของหลอดอาหาร (ESCC) ในมนุษย์ที่ได้มาจากเนื้องอกปฐมภูมิ มีความแตกต่างในระดับปานกลางและมีบทบาทสำคัญในการศึกษาความยืดหยุ่นของเซลล์เยื่อบุผิว-เนื้อเยื่อเกี่ยวพัน (EMP) ในมะเร็งหลอดอาหารเซลล์ KYSE520 แสดงความไม่สม่ำเสมอ ประกอบด้วยประชากรย่อยที่มีลักษณะคล้ายเยื่อบุผิว (CD44v+) และลักษณะคล้ายเมเซนไคม์ (CD44v−) ประชากรทั้งสองนี้สามารถเปลี่ยนแปลงระหว่างกันได้ สะท้อนให้เห็นถึงกระบวนการ EMP ที่เปลี่ยนแปลงตลอดเวลา คุณสมบัตินี้ทำให้ KYSE520 เป็นแบบจำลองที่ยอดเยี่ยมสำหรับการศึกษาลักษณะของเซลล์ต้นกำเนิดมะเร็งและกลไกการดื้อยาเคมีในมะเร็งหลอดอาหารส่วนล่างชนิดเยื่อบุผิว (ESCC)

ในทางพันธุกรรม เซลล์ KYSE520 แสดงการควบคุมทางอีพิเจเนติกที่โดดเด่น บริเวณโปรโมเตอร์ของยีน JAM3 ซึ่งเป็นยีนกดการเกิดเนื้องอก ไม่มีการเติมหมู่เมทิลในเซลล์เหล่านี้ ทำให้สามารถแสดงออกได้ JAM3 มีบทบาทในการควบคุมการเพิ่มจำนวน การเคลื่อนที่ และการรุกรานของเซลล์ผ่านสัญญาณ Wnt/β-catenin การคงอยู่ของการแสดงออกของ JAM3 ในเซลล์ KYSE520 มีความเชื่อมโยงกับการยับยั้งลักษณะของมะเร็งที่ก้าวร้าว

ในการวิจัยเชิงบำบัด เซลล์ KYSE520 ได้ถูกนำมาใช้เพื่อศึกษาบทบาทของตัวรับคล้ายไฟโบรบลาสต์โกรทแฟคเตอร์-1 (FGFRL1) งานวิจัยได้แสดงให้เห็นว่าเซลล์ KYSE520 ที่ขาด FGFRL1 แสดงการเจริญเติบโตของเนื้องอกและการเคลื่อนไหวที่ลดลง ควบคู่ไปกับการลดลงของการแสดงออกของเมทริกซ์เมทัลโลโปรตีนเนส-1 (MMP-1) และโปรตีนที่จับกับไฟโบรบลาสต์โกรทแฟคเตอร์ 1 (FGFBP1)ผลการศึกษานี้เน้นย้ำถึงความสำคัญของ FGFRL1 ในการเกิดเนื้องอกและชี้ให้เห็นถึงเป้าหมายในการรักษาที่เป็นไปได้ นอกจากนี้ พลวัตของ EMP และเส้นทางโมเลกุลที่เกี่ยวข้องในเซลล์ KYSE520 ยังให้ข้อมูลเชิงลึกเกี่ยวกับการพัฒนาของ ESCC และกลไกการดื้อยา ซึ่งช่วยในการพัฒนาการรักษาที่ตรงเป้าหมาย

Tissue
หลอดอาหาร
Disease
มะเร็งผิวหนังชนิดเซลล์สความัส
Synonyms
  • KYSE 520
  • KYSE-520
  • Kyse520
  • KYSE0520

02Classification

Organism
Human
Sex
Female
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
ลักษณะคล้ายเยื่อบุผิว

04Identifiers

Citation
KYSE520 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 305449)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_1355

05Expression and susceptibility

Oncogenes
TP53, MYC
Mutational profile
การกลายพันธุ์: TP53, c.376-2A>T, การกลายพันธุ์ที่ตำแหน่งตัวรับสปลิต

06Handling and culture

Culture medium
Ham's F12, w: 1.0 mM กลูตามีนเสถียร, w: 1.0 mM โซเดียมไพรูเวต, w: 1.1 g/L NaHCO3 (หมายเลขบทความ Cytion 820600a) + RPMI 1640, w: 2.0 mM กลูตามีนเสถียร, w: 2.0 g/L NaHCO3(หมายเลขบทความ Cytion 820700a); ส่วนผสม 1:1
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, บรรยากาศชื้น

Supplements
เติมอาหารเลี้ยงเชื้อด้วย FBS 2%
Dissociation reagent
แอคคูเทส
Subculturing
นำอาหารเลี้ยงเซลล์เก่าออกจากเซลล์ที่เกาะติดและล้างด้วย PBS ที่ไม่มีแคลเซียมและแมกนีเซียม สำหรับขวด T25 ให้ใช้ PBS 3-5 มล. และสำหรับขวด T75 ให้ใช้ 5-10 มล. จากนั้นปิดเซลล์ให้มิดด้วย Accutase โดยใช้ 1-2 มล. สำหรับขวด T25 และ 2.5 มล. สำหรับขวด T75ปล่อยให้เซลล์บ่มที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 8-10 นาทีเพื่อให้เซลล์หลุดออกจากกัน หลังจากบ่มแล้ว ให้ผสมเซลล์เบา ๆ กับอาหารเลี้ยงเซลล์ 10 มิลลิลิตรเพื่อทำให้เซลล์แขวนลอยอีกครั้ง จากนั้นปั่นเหวี่ยงที่ 300 เท่าของแรงโน้มถ่วงโลก (300xg) เป็นเวลา 3 นาที เทส่วนใสที่ได้ทิ้งไป แล้วแขวนลอยเซลล์ในอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ จากนั้นถ่ายเซลล์ไปยังขวดเพาะเลี้ยงใหม่ที่เติมอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ไว้แล้ว
Seeding density
0.6 - 1.2 x 104 เซลล์/ซม.2
Fluid renewal
2 ครั้งต่อสัปดาห์
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง

เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

Freeze medium
ในฐานะที่เป็นสารอาหารสำหรับการแช่แข็ง เราใช้สารอาหารสำหรับการเจริญเติบโตแบบครบถ้วน (รวมถึง FBS) + 10% DMSO เพื่อความมีชีวิตหลังการละลายที่เพียงพอ หรือ CM-1 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 800100) ซึ่งรวมถึงสารป้องกันออสโมติกและสารรักษาเสถียรภาพเมตาบอลิซึมที่ได้รับการปรับให้เหมาะสมเพื่อเพิ่มการฟื้นตัวและลดความเครียดที่เกิดจากการแช่แข็ง
Storage conditions

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

Shipping conditions

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

08Donor

Donor age
58 ปี
Ethnicity
ญี่ปุ่น