Skip to content
KYSE520
Tissue
Thực quản
Disease
Ung thư biểu mô vảy
Synonyms
KYSE 520, KYSE-520, Kyse520, KYSE0520

Documents

KYSE520

Cell line · Product number 305449

The KYSE520 cell line is a human esophageal squamous cell carcinoma (ESCC) model derived from a primary tumor. It is moderately differentiated and has bee...

€550.00excl. tax and shipping

Customization / Recommendations

In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

Dòng tế bào KYSE520 là mô hình ung thư biểu mô vảy thực quản (ESCC) ở người được phân lập từ khối u nguyên phát. Dòng tế bào này có độ biệt hóa trung bình và đã đóng vai trò quan trọng trong việc nghiên cứu tính linh hoạt biểu mô-mesenchymal (EMP) trong ung thư thực quản. Tế bào KYSE520 thể hiện tính đa dạng, bao gồm cả các quần thể tương tự biểu mô (CD44v+) và tương tự trung mô (CD44v−). Hai quần thể này có khả năng chuyển đổi lẫn nhau, phản ánh quá trình EMP động lực. Tính chất này khiến KYSE520 trở thành mô hình lý tưởng để nghiên cứu các đặc tính của tế bào gốc ung thư và cơ chế kháng hóa trị trong ESCC.

Về mặt di truyền, tế bào KYSE520 thể hiện sự điều hòa biểu sinh đáng chú ý. Vùng promoter của gen JAM3, một gen ức chế khối u, không bị methyl hóa trong các tế bào này, cho phép biểu hiện của nó. JAM3 đóng vai trò trong việc điều hòa sự tăng sinh, di chuyển và xâm lấn của tế bào thông qua tín hiệu Wnt/β-catenin. Việc duy trì biểu hiện của JAM3 trong KYSE520 đã được liên kết với việc ức chế các biểu hiện ung thư hung hãn.

Trong nghiên cứu điều trị, tế bào KYSE520 đã được sử dụng để khám phá vai trò của thụ thể yếu tố tăng trưởng nguyên bào sợi tương tự 1 (FGFRL1). Các nghiên cứu cho thấy tế bào KYSE520 thiếu FGFRL1 có sự giảm tăng trưởng khối u và khả năng di chuyển, kèm theo sự giảm biểu hiện của metalloproteinase ma trận-1 (MMP-1) và protein liên kết yếu tố tăng trưởng nguyên bào sợi 1 (FGFBP1). Các phát hiện này nhấn mạnh vai trò quan trọng của FGFRL1 trong quá trình hình thành khối u và gợi ý các mục tiêu điều trị tiềm năng. Ngoài ra, động học của EMP và các con đường phân tử liên quan trong tế bào KYSE520 cung cấp thông tin về cơ chế tiến triển và kháng thuốc của ung thư thực quản tế bào vảy (ESCC), góp phần vào việc phát triển các phương pháp điều trị đích.

Tissue
Thực quản
Disease
Ung thư biểu mô vảy
Synonyms
  • KYSE 520
  • KYSE-520
  • Kyse520
  • KYSE0520

02Classification

Organism
Human
Sex
Female
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
Tương tự biểu mô

04Identifiers

Citation
KYSE520 (Số catalog Cytion 305449)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_1355

05Expression and susceptibility

Oncogenes
TP53, MYC
Mutational profile
Biến đổi gen: TP53, c.376-2A>T, Biến đổi vị trí chấp nhận cắt nối

06Handling and culture

Culture medium
Ham's F12, chứa: 1,0 mM glutamine ổn định, chứa: 1,0 mM natri pyruvate, chứa: 1,1 g/L NaHCO₃ (Số hiệu sản phẩm Cytion 820600a) + RPMI 1640, chứa: 2,0 mM glutamine ổn định, chứa: 2,0 g/L NaHCO₃ (Số hiệu sản phẩm Cytion 820700a); hỗn hợp tỷ lệ 1:1
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO₂, môi trường ẩm.

Supplements
Bổ sung 2% huyết thanh bò phôi (FBS) vào môi trường nuôi cấy
Dissociation reagent
Accutase
Subculturing
Loại bỏ môi trường nuôi cấy cũ khỏi các tế bào bám dính và rửa chúng bằng PBS không chứa canxi và magiê. Đối với bình T25, sử dụng 3-5 ml PBS, và đối với bình T75, sử dụng 5-10 ml. Sau đó, phủ hoàn toàn các tế bào bằng Accutase, sử dụng 1-2 ml cho bình T25 và 2,5 ml cho bình T75. Để tế bào ủ ở nhiệt độ phòng trong 8-10 phút để tách chúng ra. Sau khi ủ, nhẹ nhàng trộn tế bào với 10 ml môi trường để tái phân tán chúng, sau đó ly tâm ở 300xg trong 3 phút. Loại bỏ dịch trên, tái phân tán tế bào trong môi trường tươi và chuyển chúng vào các bình mới đã chứa môi trường tươi.
Seeding density
0,6 - 1,2 × 10⁴ tế bào/cm²
Fluid renewal
2 lần mỗi tuần
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

Sự nhiễm khuẩn Mycoplasma được loại trừ bằng cả các phương pháp xét nghiệm dựa trên PCR và các phương pháp phát hiện Mycoplasma dựa trên phát quang.

Để đảm bảo không có nhiễm khuẩn vi khuẩn, nấm hoặc men, các mẫu nuôi cấy tế bào được kiểm tra trực quan hàng ngày.

Freeze medium
Như một môi trường bảo quản đông lạnh, chúng tôi sử dụng môi trường tăng trưởng hoàn chỉnh (bao gồm FBS) + 10% DMSO để đảm bảo độ sống sau khi rã đông, hoặc CM-1 (mã sản phẩm Cytion 800100), bao gồm các chất bảo vệ thẩm thấu và chất ổn định chuyển hóa được tối ưu hóa để cải thiện quá trình phục hồi và giảm stress do đông lạnh gây ra.
Storage conditions

Để bảo quản lâu dài, hãy đặt ống nghiệm vào nitơ lỏng ở pha hơi ở nhiệt độ khoảng −150 đến −196 °C. Việc bảo quản ở −80 °C chỉ được chấp nhận như một bước trung gian ngắn hạn trước khi chuyển sang nitơ lỏng.

Shipping conditions

Các dòng tế bào được bảo quản bằng phương pháp đông lạnh được vận chuyển trên đá khô trong bao bì cách nhiệt đã được kiểm định, kèm theo lượng chất làm lạnh đủ để duy trì nhiệt độ khoảng −78 °C trong suốt quá trình vận chuyển. Khi nhận hàng, hãy kiểm tra ngay lập tức bao bì và chuyển các ống nghiệm sang nơi lưu trữ phù hợp mà không chậm trễ.

08Donor

Donor age
58 năm
Ethnicity
Nhật Bản