Skip to content
KYSE-30
Tissue
Niêm mạc biểu mô vảy thực quản
Disease
Ung thư biểu mô vảy thực quản
Synonyms
Kyse-30, KYSE 30, KYSE30, Kyse30, KYSE0030

Documents

KYSE-30

Cell line · Product number 305094

KYSE-30 is a well-differentiated human esophageal squamous cell carcinoma (ESCC) cell line derived from a primary tumor in an adult patient. As part of th...

€430.00excl. tax and shipping

Customization / Recommendations

In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

KYSE-30 là dòng tế bào ung thư biểu mô vảy thực quản (ESCC) của người được phân biệt rõ ràng, được phân lập từ khối u nguyên phát của một bệnh nhân người lớn. Là một phần của loạt dòng tế bào KYSE, dòng tế bào này được thiết lập để nghiên cứu các đặc điểm phân tử và tế bào của ung thư thực quản. Tế bào KYSE-30 nổi bật với tốc độ phát triển nhanh, với thời gian nhân đôi là 20,8 giờ, khiến chúng trở thành mô hình mạnh mẽ cho nghiên cứu ung thư in vitro. Các tế bào này phát triển chủ yếu dưới dạng lớp đơn bám dính, có hình dạng đa giác đặc trưng và ngoại hình đồng nhất dưới kính hiển vi tương phản pha. Mô hình phát triển của chúng tương tự như các tế bào ung thư có nguồn gốc biểu mô, tạo thành các cụm tế bào dày đặc với xu hướng xếp chồng lên nhau một cách không trật tự, phản ánh bản chất xâm lấn của khối u mà chúng được phân lập.

Về mặt di truyền, KYSE-30 có ý nghĩa do các biến đổi trong các gen ức chế khối u quan trọng. Dòng tế bào này có cấu hình kiểu hoang dã cho các gen p16 (INK4a) và p15 (INK4b), nhưng mang một đột biến điểm đáng chú ý trong gen p16, dẫn đến mã dừng sớm, gây ra protein bị cắt ngắn và không hoạt động. Đột biến này có thể góp phần vào việc mất kiểm soát chu kỳ tế bào, thúc đẩy sự phát triển không kiểm soát đặc trưng của tế bào ung thư. Tuy nhiên, việc duy trì cấu trúc kiểu hoang dã của gen p15 cho thấy các biến đổi của gen p16 đóng vai trò quan trọng hơn trong quá trình ung thư hóa của KYSE-30, điều này có thể có ý nghĩa trong các nghiên cứu tập trung vào vai trò khác biệt của các gen này trong ung thư.

KYSE-30 có khả năng gây ung thư, được chứng minh qua khả năng hình thành khối u khi tiêm vào chuột nude không có tuyến ức, khiến nó trở thành mô hình lý tưởng cho các nghiên cứu in vivo về ung thư thực quản tế bào vảy (ESCC). Khám nghiệm mô học của các khối u được hình thành bởi tế bào KYSE-30 cho thấy các đặc điểm tương tự như ung thư biểu mô vảy nguyên phát, cung cấp một mô phỏng chính xác của bệnh. Dòng tế bào này vô cùng quý giá cho nghiên cứu về cơ chế hình thành khối u, các thay đổi di truyền và biểu sinh thúc đẩy ung thư thực quản, cũng như phát triển các liệu pháp nhắm mục tiêu, mặc dù nó không phù hợp cho các ứng dụng điều trị hoặc in vivo.

Tissue
Niêm mạc biểu mô vảy thực quản
Disease
Ung thư biểu mô vảy thực quản
Synonyms
  • Kyse-30
  • KYSE 30
  • KYSE30
  • Kyse30
  • KYSE0030

02Classification

Organism
Human
Sex
Male
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
Giống biểu mô, có các pseudopod dài
Doubling time
20 đến 30 giờ

04Identifiers

Citation
KYSE-30 (Mã sản phẩm Cytion 305094)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_1351

05Handling and culture

Culture medium
Vui lòng trộn Ham's F12 và RPMI 1640 theo tỷ lệ 50:50 (số hiệu sản phẩm Cytion: 820600a và 820702a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO₂, môi trường ẩm.

Supplements
Bổ sung 10% huyết thanh bò phôi (FBS) vào môi trường nuôi cấy
Dissociation reagent
Accutase
Subculturing
Loại bỏ môi trường nuôi cấy cũ khỏi các tế bào bám dính và rửa chúng bằng PBS không chứa canxi và magiê. Đối với bình T25, sử dụng 3-5 ml PBS, và đối với bình T75, sử dụng 5-10 ml. Sau đó, phủ hoàn toàn các tế bào bằng Accutase, sử dụng 1-2 ml cho bình T25 và 2,5 ml cho bình T75. Để tế bào ủ ở nhiệt độ phòng trong 8-10 phút để tách chúng ra. Sau khi ủ, nhẹ nhàng trộn tế bào với 10 ml môi trường để tái phân tán chúng, sau đó ly tâm ở 300xg trong 3 phút. Loại bỏ dịch trên, tái phân tán tế bào trong môi trường tươi và chuyển chúng vào các bình mới đã chứa môi trường tươi.
Fluid renewal
2 đến 3 lần mỗi tuần
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Quality control and cryopreservation

Sterility

Sự nhiễm khuẩn Mycoplasma được loại trừ bằng cả các phương pháp xét nghiệm dựa trên PCR và các phương pháp phát hiện Mycoplasma dựa trên phát quang.

Để đảm bảo không có nhiễm khuẩn vi khuẩn, nấm hoặc men, các mẫu nuôi cấy tế bào được kiểm tra trực quan hàng ngày.

Freeze medium
Như một môi trường bảo quản đông lạnh, chúng tôi sử dụng môi trường tăng trưởng hoàn chỉnh (bao gồm FBS) + 10% DMSO để đảm bảo độ sống sau khi rã đông, hoặc CM-1 (mã sản phẩm Cytion 800100), bao gồm các chất bảo vệ thẩm thấu và chất ổn định chuyển hóa được tối ưu hóa để cải thiện quá trình phục hồi và giảm stress do đông lạnh gây ra.
Storage conditions

Để bảo quản lâu dài, hãy đặt ống nghiệm vào nitơ lỏng ở pha hơi ở nhiệt độ khoảng −150 đến −196 °C. Việc bảo quản ở −80 °C chỉ được chấp nhận như một bước trung gian ngắn hạn trước khi chuyển sang nitơ lỏng.

Shipping conditions

Các dòng tế bào được bảo quản bằng phương pháp đông lạnh được vận chuyển trên đá khô trong bao bì cách nhiệt đã được kiểm định, kèm theo lượng chất làm lạnh đủ để duy trì nhiệt độ khoảng −78 °C trong suốt quá trình vận chuyển. Khi nhận hàng, hãy kiểm tra ngay lập tức bao bì và chuyển các ống nghiệm sang nơi lưu trữ phù hợp mà không chậm trễ.

07Donor

Donor age
64 năm
Ethnicity
Châu Á