
- Tissue
- Épithélium squameux de l'œsophage
- Disease
- Carcinome épidermoïde de l'œsophage
- Synonyms
- Kyse-30, KYSE 30, KYSE30, Kyse30, KYSE0030
Documents
KYSE-30
Cell line · Product number 305094
KYSE-30 is a well-differentiated human esophageal squamous cell carcinoma (ESCC) cell line derived from a primary tumor in an adult patient. As part of th...
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01General information
- Description
KYSE-30 est une lignée cellulaire de carcinome épidermoïde de l’œsophage (ESCC) humain bien différenciée, dérivée d’une tumeur primaire chez un patient adulte. Faisant partie de la série KYSE, cette lignée cellulaire a été établie afin d’étudier les caractéristiques moléculaires et cellulaires du cancer de l’œsophage. Les cellules KYSE-30 se distinguent par leur prolifération rapide, avec un temps de doublement de 20,8 heures, ce qui en fait un modèle robuste pour la recherche in vitro sur le cancer. Ces cellules se développent principalement sous forme de monocouches adhérentes, présentant une forme polygonale caractéristique et un aspect uniforme au microscope à contraste de phase. Leur mode de croissance est typique des cellules cancéreuses d’origine épithéliale : elles forment des colonies très denses ayant tendance à s’empiler de manière désorganisée, ce qui reflète la nature invasive de la tumeur dont elles sont issues.
Sur le plan génétique, la lignée KYSE-30 se distingue par des altérations au niveau de gènes suppresseurs de tumeurs clés. La lignée cellulaire présente une configuration de type sauvage pour les gènes p16 (INK4a) et p15 (INK4b), mais elle porte une mutation ponctuelle notable dans le gène p16 qui entraîne un codon d’arrêt prématuré, ce qui donne lieu à une protéine tronquée et non fonctionnelle. Cette mutation contribue probablement à la perte de contrôle du cycle cellulaire, favorisant ainsi la prolifération incontrôlée caractéristique des cellules cancéreuses. La conservation du gène p15 de type sauvage suggère toutefois que les altérations du gène p16 jouent un rôle plus déterminant dans l’oncogenèse de la lignée KYSE-30, ce qui pourrait s’avérer pertinent dans les études portant sur les rôles différentiels de ces gènes dans le cancer.
La lignée KYSE-30 est tumorigène, comme le démontre sa capacité à former des tumeurs lorsqu’elle est injectée chez des souris nues athymiques, ce qui en fait un excellent modèle pour les études in vivo sur le cancer de l’œsophage à cellules squameuses (ESCC). L’examen histologique des tumeurs formées par les cellules KYSE-30 révèle des caractéristiques similaires à celles du carcinome épidermoïde d’origine, offrant ainsi une représentation fidèle de la maladie. Cette lignée cellulaire est d’une valeur inestimable pour la recherche sur les mécanismes de la tumorigenèse, les modifications génétiques et épigénétiques à l’origine du cancer de l’œsophage, ainsi que pour le développement de thérapies ciblées; elle ne convient toutefois pas aux applications thérapeutiques ou in vivo.
- Tissue
- Épithélium squameux de l'œsophage
- Disease
- Carcinome épidermoïde de l'œsophage
- Synonyms
- Kyse-30
- KYSE 30
- KYSE30
- Kyse30
- KYSE0030
02Classification
- Organism
- Human
- Sex
- Male
- Growth properties
- Adherent
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Morphology
- De type épithélial, avec de longs pseudopodes
- Doubling time
- de 20 à 30 heures
04Identifiers
- Citation
- KYSE-30 (numéro de catalogue Cytion 305094)
- NCBI TaxID
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_1351
05Handling and culture
- Culture medium
- Veuillez mélanger le Ham's F12 et le RPMI 1640 dans un rapport de 50:50 (numéros de référence Cytion 820600a et 820702a)
- Incubation atmosphere
37 °C, 5 % de CO₂, atmosphère humidifiée.
- Supplements
- Ajouter 10 % de FBS au milieu de culture
- Dissociation reagent
- Accutase
- Subculturing
- Retirez l’ancien milieu des cellules adhérentes et lavez-les avec du PBS sans calcium ni magnésium. Pour les flacons T25, utilisez 3 à 5 ml de PBS, et pour les flacons T75, utilisez 5 à 10 ml. Ensuite, recouvrez complètement les cellules d’Accutase, en utilisant 1 à 2 ml pour les flacons T25 et 2,5 ml pour les flacons T75. Laissez les cellules incuber à température ambiante pendant 8 à 10 minutes afin de les détacher. Après l’incubation, mélangez délicatement les cellules avec 10 ml de milieu pour les remettre en suspension, puis centrifugez à 300 x g pendant 3 minutes. Éliminez le surnageant, remettez les cellules en suspension dans du milieu frais, puis transférez-les dans de nouveaux flacons contenant déjà du milieu frais.
- Fluid renewal
- 2 à 3 fois par semaine
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
06Quality control and cryopreservation
- Sterility
La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes par luminescence.
Afin de s’assurer qu’il n’y a aucune contamination bactérienne, fongique ou par des levures, les cultures cellulaires font l’objet d’inspections visuelles quotidiennes.
- Freeze medium
- Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons un milieu de croissance complet (contenant du sérum fœtal bovin) + 10 % de DMSO pour assurer une viabilité adéquate après décongélation, ou du CM-1 (référence Cytion 800100), qui contient des osmoprotecteurs et des stabilisateurs métaboliques optimisés pour améliorer la récupération et réduire le stress induit par la cryoconservation.
- Storage conditions
Pour une conservation à long terme, placez les flacons dans de l’azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre environ −150 et −196 °C. L’entreposage à −80 °C n’est acceptable qu’à titre d’étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l’azote liquide.
- Shipping conditions
Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées dans de la glace sèche, dans un emballage isotherme validé contenant suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d’environ −78 °C pendant tout le transport. À la réception, inspectez immédiatement le conteneur et transférez sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.
07Donor
- Donor age
- 64 ans
- Ethnicity
- asiatique
08Legal and safety
- Safety precautions
- Lorsqu’on prévoit entreposer un cryotube dans de l’azote liquide en vue d’une décongélation ultérieure, il est impératif de respecter des mesures de sécurité rigoureuses. Le port de gants et de vêtements de protection appropriés est essentiel, et l’utilisation d’un masque facial ou de lunettes de protection est obligatoire lors du transfert d’échantillons congelés vers ou depuis le réservoir d’azote liquide. Cette précaution vise à réduire le risque de blessure causé par d’éventuelles explosions de cryotubes lors de leur retrait, pouvant entraîner la projection de fragments coupants.
- Warranty
Chez Cytion, nous garantissons la qualité et la viabilité de nos produits. Nous garantissons que nos cellules seront viables au début de la culture pendant 60 jours à compter de leur expédition depuis nos installations. Nous assurons que tous les matériaux sont conformes aux spécifications décrites dans le certificat d’analyse et/ou la fiche technique du produit.
Pour plus de détails, veuillez consulter notre déclaration de garantie.
- Material Transfer Agreement required
- Yes
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