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KYSE-30
Tissue
食管鳞状上皮
Disease
食管鳞状细胞癌
Synonyms
Kyse-30, KYSE 30, KYSE30, Kyse30, KYSE0030

Documents

KYSE-30

Cell line · Product number 305094

KYSE-30 is a well-differentiated human esophageal squamous cell carcinoma (ESCC) cell line derived from a primary tumor in an adult patient. As part of th...

US$395.00excl. tax and shipping
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  • CoA
1

01General information

Description

KYSE-30 是一种分化良好的人类食管鳞状细胞癌 (ESCC) 细胞系,来源于一名成年患者的原发肿瘤。作为 KYSE 系列的一部分,该细胞系的建立是为了研究食管癌的分子和细胞特征。KYSE-30 细胞增殖迅速,倍增时间为 20.8 小时,是体外癌症研究的理想模型。这些细胞主要以粘附单层的形式生长,在相衬显微镜下显示出特征性的多边形和均匀的外观。它们的生长模式是典型的上皮源性癌细胞生长模式,会形成紧密堆积的菌落,并有无序堆积的趋势,这反映了它们所来源的肿瘤的侵袭性。

从遗传学角度看,KYSE-30 的重要特征是其关键肿瘤抑制基因发生了改变。该细胞系的 p16(INK4a)和 p15(INK4b)基因呈野生型结构,但 p16 基因有一个显著的点突变,导致一个过早的终止密码子,从而产生了一种截短的、无功能的蛋白质。这种突变很可能会导致细胞周期失控,促进癌细胞肆意增殖。然而,野生型 p15 基因的保留表明,p16 基因的改变在 KYSE-30 的致癌过程中起着更关键的作用,这可能与研究这些基因在癌症中的不同作用有关。

KYSE-30 具有致瘤性,这体现在它被注射到无胸腺裸鼠体内后能够形成肿瘤,因此是研究 ESCC 的绝佳体内模型。由 KYSE-30 细胞形成的肿瘤的组织学检查显示出与原始鳞状细胞癌相似的特征,忠实地再现了这种疾病。这种细胞系对于研究肿瘤发生机制、食管癌的遗传和表观遗传变化以及靶向疗法的开发非常有价值,但它并不适合治疗或体内应用。

Tissue
食管鳞状上皮
Disease
食管鳞状细胞癌
Synonyms
  • Kyse-30
  • KYSE 30
  • KYSE30
  • Kyse30
  • KYSE0030

02Classification

Organism
Human
Sex
Male
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
上皮样,带长假足
Doubling time
20 至 30 小时

04Identifiers

Citation
KYSE-30(Cytion 产品编号 305094)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_1351

05Handling and culture

Culture medium
请按 50:50 的比例混合 Ham's F12 和 RPMI 1640(Cytion 文章编号 820600a 和 820702a)。
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, 加湿环境。

Supplements
在培养基中添加 10% FBS
Dissociation reagent
Accutase
Subculturing
去除粘附细胞上的旧培养基,用不含钙和镁的 PBS 冲洗。T25 烧瓶用 3-5 毫升 PBS,T75 烧瓶用 5-10 毫升。然后用 Accutase 完全覆盖细胞,T25 烧瓶用 1-2 毫升,T75 烧瓶用 2.5 毫升。让细胞在室温下孵育 8-10 分钟,使其分离。孵育后,用 10 毫升培养基轻轻混合细胞使其重悬,然后用 300xg 离心 3 分钟。弃去上清液,用新鲜培养基重悬细胞,并将其转移到已装有新鲜培养基的新烧瓶中。
Fluid renewal
每周 2 至 3 次
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Quality control and cryopreservation

Sterility

使用基于 PCR 的检测方法和基于发光的支原体检测方法排除支原体污染。

为确保没有细菌、真菌或酵母菌污染,每天都要对细胞培养物进行目视检查。

Freeze medium
我们使用完全生长培养基(包括 FBS)+10% DMSO 或 CM-1(Cytion 商品目录编号 800100)作为冷冻保存培养基,以获得足够的解冻后存活率,CM-1(Cytion 商品目录编号 800100)含有优化的渗透保护剂和代谢稳定剂,可提高恢复能力并减少冷冻引起的应激。
Storage conditions

如需长期保存,可将样品瓶放入气相液氮中,温度约为 -150 至 -196 ℃。在-80 °C下保存只能作为转入液氮前的短暂过渡。

Shipping conditions

冷冻保存的细胞系用干冰装运,并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后,应立即检查容器,并立即将小瓶转移到适当的储藏室。

07Donor

Donor age
64 岁
Ethnicity
亚洲