01General information
- Description
KYSE-410 是一种人类食管鳞状细胞癌 (ESCC) 细胞系，是从一名成年患者身上切除的原发肿瘤中建立的。该细胞系是 KYSE 系列的一部分，KYSE 系列包括多个 ESCC 模型，旨在为研究食管癌的各个方面提供全面的工具。KYSE-410 细胞的倍增时间为 24.2 小时，反映了中等的增殖能力。它们以粘附的单层形式生长，这是上皮源性癌细胞的共同特征，在相衬显微镜下呈现出相对均匀的形态。
在基因水平上，KYSE-410 的表观遗传学改变尤为显著。KYSE-410 中的 p16（INK4a）基因显示出 5' CpG 岛的超甲基化，这种改变导致了这一关键肿瘤抑制基因的沉默。这种表观遗传变化是包括 ESCC 在内的许多癌症发生癌变的重要驱动因素，因为它会导致细胞周期失调和细胞增殖失控。尽管如此，KYSE-410仍保留了p15（INK4b）基因的野生型结构，突出了p16的选择性失活，这是某些癌症亚型的典型特征。
KYSE-410 细胞系具有致瘤性，这体现在它能诱导无胸腺裸鼠形成肿瘤。这些肿瘤的组织学分析显示出与鳞状细胞癌一致的特征，使 KYSE-410 成为体内研究的相关模型。这种细胞系对于了解表观遗传修饰在癌症进展中的作用以及测试针对表观遗传调节因子的疗法的疗效具有很高的研究价值，但它并不打算用于治疗或体内应用。
- Tissue
- 食道
- Disease
- 食管鳞状细胞癌
- Synonyms
- KYSE 410
- KYSE410
- Kyse410
- KYSE0410
02Classification
- Organism
- Human
- Sex
- Male
- Growth properties
- Adherent
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Morphology
- 上皮细胞
- Doubling time
- 32 至 45 小时
04Identifiers
- Citation
- KYSE-410（Cytion 产品编号 305122）
- NCBI TaxID
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_1352
05Handling and culture
- Culture medium
- RPMI 1640，w：2.0 mM 稳定谷氨酰胺，w：2.0 g/L NaHCO3（Cytion 文章编号 820700a）。
- Incubation atmosphere
37°C, 5%CO2, 加湿环境。
- Supplements
- 在培养基中添加 10% FBS
- Dissociation reagent
- Accutase
- Subculturing
- 去除粘附细胞上的旧培养基，用不含钙和镁的 PBS 冲洗。T25 烧瓶用 3-5 毫升 PBS，T75 烧瓶用 5-10 毫升。然后用 Accutase 完全覆盖细胞，T25 烧瓶用 1-2 毫升，T75 烧瓶用 2.5 毫升。让细胞在室温下孵育 8-10 分钟，使其分离。孵育后，用 10 毫升培养基轻轻混合细胞使其重悬，然后用 300xg 离心 3 分钟。弃去上清液，用新鲜培养基重悬细胞，并将其转移到已装有新鲜培养基的新烧瓶中。
- Seeding density
- 1-3×10⁴/cm²
- Fluid renewal
- 每周 2 至 3 次
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
06Quality control and cryopreservation
- Sterility
使用基于 PCR 的检测方法和基于发光的支原体检测方法排除支原体污染。
为确保没有细菌、真菌或酵母菌污染，每天都要对细胞培养物进行目视检查。
- Freeze medium
- 我们使用完全生长培养基（包括 FBS）+10% DMSO 或 CM-1（Cytion 商品目录编号 800100）作为冷冻保存培养基，以获得足够的解冻后存活率，CM-1（Cytion 商品目录编号 800100）含有优化的渗透保护剂和代谢稳定剂，可提高恢复能力并减少冷冻引起的应激。
- Storage conditions
如需长期保存，可将样品瓶放入气相液氮中，温度约为 -150 至 -196 ℃。在-80 °C下保存只能作为转入液氮前的短暂过渡。
- Shipping conditions
冷冻保存的细胞系用干冰装运，并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后，应立即检查容器，并立即将小瓶转移到适当的储藏室。
07Donor
- Donor age
- 51 年
- Ethnicity
- 亚洲
08Legal and safety
- Safety precautions
- 计划将低温样品储存在液氮中以便将来解冻时，必须遵守严格的安全措施。在将冷冻样本移入或移出液氮罐时，必须穿戴适当的防护手套和防护服，并使用面罩或安全护目镜。这样做是为了降低在移出时因冷冻样品爆炸而造成伤害的风险，因为爆炸可能导致锋利的碎片飞溅。
- Warranty
在Cytion，我们保证产品的质量和活力。 我们保证，从我们的工厂发货后 60 天内，我们的细胞在开始培养时都是存活的。 我们保证所有材料均符合分析证书和/或产品说明书中描述的规格。
有关详细信息，请参阅我们的 <a href="" /Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">保修声明 。
- Material Transfer Agreement required
- Yes
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