01General information
- Description
KYSE-410 是一種人類食道鱗狀細胞癌（ESCC）細胞系，由一名成人患者切除的原發性腫瘤建立而成。該細胞系屬於 KYSE 系列的一部分，該系列包含多個 ESCC 模型，旨在為研究食道癌的各個方面提供一套全面的工具。 KYSE-410 細胞的倍增時間為 24.2 小時，顯示其增殖能力屬中等。該細胞以黏附單層形式生長，這是上皮來源癌細胞的常見特徵，且在相差顯微鏡下呈現相對均勻的形態。
在遺傳層面上，KYSE-410 因其表觀遺傳學改變而特別引人注目。KYSE-410 中的 p16 (INK4a) 基因顯示 5' CpG 島發生過度甲基化，此種修飾會導致這個關鍵的腫瘤抑制基因被沉默。 這種表觀遺傳變化是包括食道鱗狀細胞癌（ESCC）在內的多種癌症中致癌的重要驅動因素，因為它會導致細胞週期調控的喪失及細胞不受控制地增殖。 儘管如此，KYSE-410 的 p15（INK4b）基因仍保持野生型結構，這凸顯了 p16 基因的選擇性失活現象，此現象為某些癌症亞型的典型特徵。
KYSE-410 細胞系具有致瘤性，這從其植入無胸腺裸鼠後能誘導腫瘤形成即可證實。對這些腫瘤的組織學分析顯示出與鱗狀細胞癌相符的特徵，使 KYSE-410 成為體內研究的相關模型。 儘管此細胞系並非用於治療或體內應用，但對於旨在理解表觀遺傳修飾在癌症進展中所扮演角色的研究，以及測試針對表觀遺傳調控因子之療法的療效，皆具有極高價值。
- Tissue
- 食道
- Disease
- 食道鱗狀細胞癌
- Synonyms
- KYSE 410
- KYSE410
- Kyse410
- KYSE0410
02Classification
- Organism
- Human
- Sex
- Male
- Growth properties
- Adherent
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Morphology
- 上皮性
- Doubling time
- 32 至 45 小時
04Identifiers
- Citation
- KYSE-410（Cytion 型號 305122）
- NCBI TaxID
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_1352
05Handling and culture
- Culture medium
- RPMI 1640，含 2.0 mM 穩定谷氨醯胺，含 2.0 g/L NaHCO₃（Cytion 產品編號 820700a）
- Incubation atmosphere
37°C，5% CO₂，加濕環境。
- Supplements
- 在培養基中加入 10% 的胎牛血清（FBS）
- Dissociation reagent
- Accutase
- Subculturing
- 從貼壁細胞中移除舊培養基，並用不含鈣和鎂的PBS洗滌細胞。T25培養瓶使用3-5毫升PBS，T75培養瓶則使用5-10毫升。 接著，用 Accutase 完全覆蓋細胞，T25 培養瓶使用 1–2 毫升，T75 培養瓶則使用 2.5 毫升。將細胞於室溫下孵育 8–10 分鐘，使其脫附。 孵育後，將細胞與 10 毫升培養基輕柔混合以使其重新懸浮，然後以 300xg 離心 3 分鐘。棄去上清液，將細胞重新懸浮於新鮮培養基中，並轉移至已預先加入新鮮培養基的新培養瓶中。
- Seeding density
- 1-3×10⁴/cm²
- Fluid renewal
- 每週 2 至 3 次
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
06Quality control and cryopreservation
- Sterility
透過基於 PCR 的檢測及基於發光原理的支原體檢測方法，排除支原體污染的可能性。
為確保無細菌、真菌或酵母菌污染，每日均會對細胞培養物進行目視檢查。
- Freeze medium
- 作為冷凍保存培養基，我們使用完全生長培養基（含 FBS）+ 10% DMSO 以確保解凍後的存活率，或使用 CM-1 （Cytion 型號 800100），該培養基含有經優化的滲透保護劑和代謝穩定劑，可提升細胞恢復率並減輕冷凍誘導的壓力。
- Storage conditions
若需長期保存，請將試管置於溫度約為 −150 至 −196 °C 的氣相液氮中。僅在轉移至液氮之前，可將試管暫時存放於 −80 °C 環境中，作為短期過渡步驟。
- Shipping conditions
冷凍保存的細胞系會以乾冰冷藏，並裝於經驗證的隔熱包裝中，包裝內含有足夠的冷媒，以確保在運輸過程中溫度維持在約 −78 °C。收到貨物後，請立即檢查容器，並盡快將試管轉移至適當的儲存場所。
07Donor
- Donor age
- 51年
- Ethnicity
- 亞洲
08Legal and safety
- Safety precautions
- 若計劃將低溫試管存放在液態氮中以供日後解凍，必須嚴格遵守相關安全措施。 必須穿戴適當的防護手套和防護服，且在將冷凍樣本移入或移出液氮罐時，必須佩戴口罩或安全護目鏡。此舉旨在降低因取出時冷凍試管可能發生爆炸而導致受傷的風險，此類爆炸可能造成尖銳碎片飛濺。
- Warranty
在 Cytion，我們對產品的品質與存活率提供保障。 我們保證，自本公司設施出貨後 60 天內，我們的細胞在培養開始時仍具存活能力。 我們保證所有材料均符合 分析證明書及／或產品說明書中所載的規格。
詳情請參閱我們的 《保固聲明》。
- Material Transfer Agreement required
- Yes
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