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KYSE520
Tissue
食道
Disease
鱗狀細胞癌
Synonyms
KYSE 520, KYSE-520, Kyse520, KYSE0520

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KYSE520

Cell line · Product number 305449

The KYSE520 cell line is a human esophageal squamous cell carcinoma (ESCC) model derived from a primary tumor. It is moderately differentiated and has bee...

US$395.00excl. tax and shipping
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Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

KYSE520 細胞系是一種源自原發性腫瘤的人類食道鱗狀細胞癌(ESCC)模型。該細胞系為中度分化,在研究食道癌的上皮-間質可塑性(EMP)方面發揮了關鍵作用。 KYSE520 細胞呈現異質性,由上皮樣(CD44v+)和間質樣(CD44v−)亞群組成。這兩種亞群能夠相互轉化,反映出動態的上皮-間質可塑性過程。 此特性使 KYSE520 成為研究食道鱗狀細胞癌(ESCC)中癌症幹細胞特徵及化療抗藥性機制的絕佳模型。

從遺傳學角度來看,KYSE520 細胞展現出顯著的表觀遺傳調控。在這些細胞中,作為腫瘤抑制基因的 JAM3 基因啟動子區域未被甲基化,因而使其得以表達。JAM3 透過 Wnt/β-catenin 訊號傳導路徑,在調控細胞增殖、遷移及侵襲方面發揮作用。 KYSE520 細胞中 JAM3 表達的維持,已被證實與抑制侵襲性癌症表型有關。

在治療研究方面,KYSE520 細胞已被用於探索成纖維細胞生長因子受體樣 1(FGFRL1)的作用。 研究顯示,FGFRL1 缺失的 KYSE520 細胞不僅腫瘤生長與運動能力降低,其基質金屬蛋白酶-1(MMP-1)及成纖維細胞生長因子結合蛋白 1(FGFBP1)的表達水平亦隨之下降。 這些發現凸顯了 FGFRL1 在腫瘤發生過程中的重要性,並提示了潛在的治療靶點。此外,KYSE520 細胞中的 EMP 動態及其相關分子途徑,為食道鱗狀細胞癌(ESCC)的進展與抗藥性機制提供了新見解,有助於開發靶向治療方法。

Tissue
食道
Disease
鱗狀細胞癌
Synonyms
  • KYSE 520
  • KYSE-520
  • Kyse520
  • KYSE0520

02Classification

Organism
Human
Sex
Female
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
上皮樣

04Identifiers

Citation
KYSE520(Cytion 型號 305449)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_1355

05Expression and susceptibility

Oncogenes
TP53、MYC
Mutational profile
突變:TP53,c.376-2A>T,剪接接受位點突變

06Handling and culture

Culture medium
Ham's F12,含:1.0 mM 穩定型谷氨醯胺、1.0 mM 丙酮酸鈉、1.1 g/L NaHCO₃(Cytion 產品編號 820600a)+ RPMI 1640, 含 2.0 mM 穩定谷氨醯胺、2.0 g/L NaHCO₃(Cytion 產品編號 820700a);1:1 混合液
Incubation atmosphere

37°C,5% CO₂,加濕環境。

Supplements
在培養基中加入 2% 的胎牛血清(FBS)
Dissociation reagent
Accutase
Subculturing
從貼壁細胞中移除舊培養基,並用不含鈣和鎂的PBS洗滌細胞。T25培養瓶使用3-5毫升PBS,T75培養瓶則使用5-10毫升。 接著,用 Accutase 完全覆蓋細胞,T25 培養瓶使用 1–2 毫升,T75 培養瓶則使用 2.5 毫升。將細胞於室溫下孵育 8–10 分鐘,使其脫附。 孵育後,將細胞與 10 毫升培養基輕柔混合以使其重新懸浮,然後以 300xg 離心 3 分鐘。棄去上清液,將細胞重新懸浮於新鮮培養基中,並轉移至已預先加入新鮮培養基的新培養瓶中。
Seeding density
0.6 - 1.2 × 10⁴ 個細胞/cm²
Fluid renewal
每週 2 次
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

透過基於 PCR 的檢測及基於發光原理的支原體檢測方法,排除支原體污染的可能性。

為確保無細菌、真菌或酵母菌污染,每日均會對細胞培養物進行目視檢查。

Freeze medium
作為冷凍保存培養基,我們使用完全生長培養基(含 FBS)+ 10% DMSO 以確保解凍後的存活率,或使用 CM-1 (Cytion 型號 800100),該培養基含有經優化的滲透保護劑和代謝穩定劑,可提升細胞恢復率並減輕冷凍誘導的壓力。
Storage conditions

若需長期保存,請將試管置於溫度約為 −150 至 −196 °C 的氣相液氮中。僅在轉移至液氮之前,可將試管暫時存放於 −80 °C 環境中,作為短期過渡步驟。

Shipping conditions

冷凍保存的細胞系會以乾冰冷藏,並裝於經驗證的隔熱包裝中,包裝內含有足夠的冷媒,以確保在運輸過程中溫度維持在約 −78 °C。收到貨物後,請立即檢查容器,並盡快將試管轉移至適當的儲存場所。

08Donor

Donor age
58年
Ethnicity
日文