KYSE520

A linhagem celular KYSE520 é um modelo de carcinoma espinocelular do esôfago (ESCC) humano derivado de um tumor primário. É moderadamente diferenciada e tem sido fundamental na investigação da plasticidade epitelial-mesenquimal (EMP) no câncer de esôfago. As células KYSE520 apresentam heterogeneidade, consistindo em subpopulações tanto de tipo epitelial (CD44v+) quanto de tipo mesenquimal (CD44v−). Essas duas populações são capazes de se converter uma na outra, refletindo um processo dinâmico de EMP. Essa propriedade torna as células KYSE520 um excelente modelo para o estudo das características das células-tronco cancerígenas e dos mecanismos de quimiorresistência no ESCC.

Geneticamente, as células KYSE520 apresentam notável regulação epigenética. A região promotora do gene JAM3, um supressor tumoral, não está metilada nessas células, permitindo sua expressão. O JAM3 desempenha um papel na regulação da proliferação, migração e invasão celular por meio da via de sinalização Wnt/β-catenina. A manutenção da expressão do JAM3 no KYSE520 tem sido associada à supressão de fenótipos cancerígenos agressivos.

Na pesquisa terapêutica, as células KYSE520 têm sido utilizadas para explorar o papel do receptor semelhante ao do fator de crescimento fibroblástico 1 (FGFRL1). Estudos demonstraram que as células KYSE520 com deficiência de FGFRL1 apresentam crescimento tumoral e motilidade reduzidos, juntamente com uma diminuição na expressão da metaloproteinase da matriz 1 (MMP-1) e da proteína de ligação ao fator de crescimento fibroblástico 1 (FGFBP1). Essas descobertas ressaltam a importância do FGFRL1 na tumorigênese e sugerem possíveis alvos terapêuticos. Além disso, a dinâmica do EMP e as vias moleculares associadas nas células KYSE520 fornecem insights sobre a progressão do ESCC e os mecanismos de resistência, contribuindo para o desenvolvimento de tratamentos direcionados.

37 °C, 5% de CO₂, atmosfera umidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A contaminação por micoplasma é descartada por meio de ensaios baseados em PCR e de métodos de detecção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não haja contaminação por bactérias, fungos ou leveduras, as culturas celulares são submetidas a inspeções visuais diárias.

Para preservação a longo prazo, coloque os frascos em nitrogênio líquido em fase de vapor a uma temperatura entre aproximadamente −150 e −196 °C. O armazenamento a −80 °C é aceitável apenas como uma etapa intermediária de curta duração antes da transferência para o nitrogênio líquido.

As linhagens celulares criopreservadas são enviadas em gelo seco, em embalagens isoladas e validadas, com refrigerante suficiente para manter a temperatura em aproximadamente −78 °C durante todo o transporte. Ao receber a remessa, inspecione o recipiente imediatamente e transfira os frascos sem demora para o local de armazenamento adequado.

Na Cytion, garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células permanecerão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou na Ficha Técnica do Produto.

Para obter todos os detalhes, consulte nossa Declaração de Garantia.