KYSE180

A linhagem celular KYSE180 é um modelo de carcinoma espinocelular do esôfago (ESCC) humano derivado de um tumor primário. Essa linhagem celular é classificada como moderadamente diferenciada e apresenta uma série de alterações genéticas características do ESCC, incluindo mutações na via de sinalização do NRF2 (NFE2L2). Especificamente, as células KYSE180 apresentam a mutação NRF2 D77V, que contribui para a hiperativação do NRF2, um fator de transcrição envolvido na resposta ao estresse oxidativo e na progressão tumoral.

As células KYSE180 são amplamente utilizadas para estudar os mecanismos moleculares do ESCC, incluindo quimiorresistência e sinalização oncogênica. A atividade elevada do NRF2 nas células KYSE180 tem sido associada à resistência à quimioterapia e à radioterapia, uma vez que o NRF2 potencializa as defesas antioxidantes celulares e as adaptações metabólicas. Pesquisas recentes identificaram compostos como a pirimetamina que inibem a sinalização do NRF2, resultando na redução da proliferação e da tumorigenicidade das células KYSE180. Tais estudos destacam o potencial terapêutico de se ter como alvo o NRF2 em cânceres com alta expressão desse fator.

Além disso, as células KYSE180 têm sido utilizadas para avaliar os papéis da família de enzimas aldo-ceto redutases (AKR), particularmente a AKR1C1 e a AKR1C2, no metabolismo de medicamentos e na quimioprevenção. A expressão dessas enzimas está aumentada nas células KYSE180, o que aumenta a sensibilidade a agentes como o 3,4-di-hidroxibenzoato de etila (EDHB). Esse composto induz a apoptose e a autofagia, demonstrando a utilidade da linhagem celular na exploração das respostas a medicamentos e dos mecanismos de estresse celular no ESCC.

37 °C, 5% de CO₂, atmosfera umidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A contaminação por micoplasma é descartada por meio de ensaios baseados em PCR e de métodos de detecção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não haja contaminação por bactérias, fungos ou leveduras, as culturas celulares são submetidas a inspeções visuais diárias.

Para preservação a longo prazo, coloque os frascos em nitrogênio líquido em fase de vapor a uma temperatura entre aproximadamente −150 e −196 °C. O armazenamento a −80 °C é aceitável apenas como uma etapa intermediária de curta duração antes da transferência para o nitrogênio líquido.

As linhagens celulares criopreservadas são enviadas em gelo seco, em embalagens isoladas e validadas, com refrigerante suficiente para manter a temperatura em aproximadamente −78 °C durante todo o transporte. Ao receber a remessa, inspecione o recipiente imediatamente e transfira os frascos sem demora para o local de armazenamento adequado.

Na Cytion, garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células permanecerão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou na Ficha Técnica do Produto.

Para obter todos os detalhes, consulte nossa Declaração de Garantia.