
- Tissue
- ושט
- Disease
- קרצינומה של תאי קשקש
- Synonyms
- KYSE 520, KYSE-520, Kyse520, KYSE0520
Documents
KYSE520
Cell line · Product number 305449
The KYSE520 cell line is a human esophageal squamous cell carcinoma (ESCC) model derived from a primary tumor. It is moderately differentiated and has bee...
Recommended (freshest lot)
01General information
- Description
קו התאים KYSE520 הוא מודל של קרצינומה של תאי קשקש בוושט (ESCC) בבני אדם, שמקורו בגידול ראשוני. הוא מובחן במידה בינונית ושימש ככלי חשוב בחקר הפלסטיות האפיתל-מזנכמלית (EMP) בסרטן הוושט. תאי KYSE520 מציגים הטרוגניות, המורכבת מתת-אוכלוסיות דמויות אפיתל (CD44v+) ומזנכימליות (CD44v−). שתי אוכלוסיות אלה מסוגלות להמרה הדדית, המשקפת תהליך EMP דינמי. תכונה זו הופכת את KYSE520 למודל מצוין לחקר תכונות תאי גזע סרטניים ומנגנוני עמידות לכימותרפיה ב-ESCC.
מבחינה גנטית, תאי KYSE520 מציגים ויסות אפיגנטי בולט. אזור הפרומוטור של הגן JAM3, מדכא גידולים, אינו מתילציה בתאים אלה, מה שמאפשר את ביטויו. JAM3 ממלא תפקיד בוויסות התרבות תאים, נדידה וחדירה באמצעות איתות Wnt/β-catenin. שמירת ביטוי JAM3 ב-KYSE520 קשורה לדיכוי פנוטיפים סרטניים אגרסיביים.
במחקר טיפולי, תאי KYSE520 שימשו לחקר תפקידו של קולטן דמוי גורם גדילה פיברובלסטי 1 (FGFRL1). מחקרים הראו שתאי KYSE520 עם חוסר ב-FGFRL1 מציגים צמיחה ותנועתיות מופחתות של הגידול, לצד ירידה בביטוי של מטאלופרוטאינז-1 (MMP-1) וחלבון קישור גורם גדילה פיברובלסטי 1 (FGFBP1). ממצאים אלה מדגישים את חשיבותו של FGFRL1 בגידול גידולים ומציעים יעדים טיפוליים פוטנציאליים. בנוסף, הדינמיקה של EMP והמסלולים המולקולריים הקשורים אליה בתאי KYSE520 מספקים תובנות לגבי התקדמות ESCC ומנגנוני העמידות, ותורמים לפיתוח טיפולים ממוקדים.
- Tissue
- ושט
- Disease
- קרצינומה של תאי קשקש
- Synonyms
- KYSE 520
- KYSE-520
- Kyse520
- KYSE0520
02Classification
- Organism
- Human
- Sex
- Female
- Growth properties
- Adherent
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Morphology
- דמוי אפיתל
04Identifiers
- Citation
- KYSE520 (מספר קטלוגי Cytion 305449)
- NCBI TaxID
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_1355
05Expression and susceptibility
- Oncogenes
- TP53, MYC
- Mutational profile
- מוטציה: TP53, c.376-2A>T, מוטציה בקולטן ספלייס
06Handling and culture
- Culture medium
- Ham's F12, w: 1.0 mM גלוטמין יציב, w: 1.0 mM פירובט נתרן, w: 1.1 g/L NaHCO3 (מספר קטלוגי Cytion 820600a) + RPMI 1640, w: 2.0 mM גלוטמין יציב, w: 2.0 g/L NaHCO3 (מספר פריט Cytion 820700a); תערובת 1:1
- Incubation atmosphere
37°C, 5%CO2, אווירה לחה.
- Supplements
- הוסף לתווך 2% FBS
- Dissociation reagent
- אקוטאז
- Subculturing
- הסר את המדיום הישן מהתאים הדבוקים ושטוף אותם ב-PBS ללא סידן ומגנזיום. עבור בקבוקי T25, השתמש ב-3-5 מ"ל PBS, ועבור בקבוקי T75, השתמש ב-5-10 מ"ל. לאחר מכן, כסה את התאים לחלוטין ב-Accutase, תוך שימוש ב-1-2 מ"ל עבור בקבוקי T25 ו-2.5 מ"ל עבור בקבוקי T75. השאר את התאים לדגירה בטמפרטורת החדר למשך 8-10 דקות כדי לנתק אותם. לאחר הדגירה, ערבב בעדינות את התאים עם 10 מ"ל של מדיום כדי להחזיר אותם לתמיסה, ואז סובב בצנטריפוגה ב-300xg למשך 3 דקות. השלך את הנוזל העליון, החזר את התאים לתמיסה במדיום טרי והעבר אותם לצלחות חדשות שכבר מכילות מדיום טרי.
- Seeding density
- 0.6 - 1.2 x 104 תאים/סמ"ר
- Fluid renewal
- פעמיים בשבוע
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Quality control and cryopreservation
- Sterility
זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.
כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.
- Freeze medium
- כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא (כולל FBS) + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה, או CM-1 (מספר קטלוגי Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי מטבוליזם משופרים כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מהקפאה.
- Storage conditions
לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.
- Shipping conditions
שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.
08Donor
- Donor age
- 58 שנים
- Ethnicity
- יפנית
09Legal and safety
- Safety precautions
- כאשר מתכננים לאחסן קריוביאל בחנקן נוזלי להפשרה עתידית, חובה להקפיד על אמצעי בטיחות מחמירים. יש להקפיד על שימוש בכפפות ובבגדים מגנים מתאימים, וכן על שימוש במסכת פנים או משקפי מגן בעת העברת דגימות קפואות אל מיכל החנקן הנוזלי או ממנו. זאת כדי להפחית את הסיכון לפציעה כתוצאה מפיצוץ אפשרי של הקריוביאל בעת הוצאתו, העלול לגרום להתזת רסיסים חדים.
- Warranty
ב-Cytion, אנו עומדים מאחורי האיכות והכדאיות של המוצרים שלנו. אנו מבטיחים שתאינו יהיו קיימים בתחילת התרבית למשך 60 יום לאחר המשלוח מהמתקנים שלנו. אנו מבטיחים שכל החומרים תואמים למפרטים המתוארים בתעודת הניתוח ו/או בדף המוצר.
לפרטים מלאים, אנא עיינו ב <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">הצהרת האחריות שלנו
- Material Transfer Agreement required
- Yes
.jpg)


