Skip to content
KYSE520
Tissue
ושט
Disease
קרצינומה של תאי קשקש
Synonyms
KYSE 520, KYSE-520, Kyse520, KYSE0520

Documents

KYSE520

Cell line · Product number 305449

The KYSE520 cell line is a human esophageal squamous cell carcinoma (ESCC) model derived from a primary tumor. It is moderately differentiated and has bee...

US$395.00excl. tax and shipping
In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

קו התאים KYSE520 הוא מודל של קרצינומה של תאי קשקש בוושט (ESCC) בבני אדם, שמקורו בגידול ראשוני. הוא מובחן במידה בינונית ושימש ככלי חשוב בחקר הפלסטיות האפיתל-מזנכמלית (EMP) בסרטן הוושט. תאי KYSE520 מציגים הטרוגניות, המורכבת מתת-אוכלוסיות דמויות אפיתל (CD44v+) ומזנכימליות (CD44v−). שתי אוכלוסיות אלה מסוגלות להמרה הדדית, המשקפת תהליך EMP דינמי. תכונה זו הופכת את KYSE520 למודל מצוין לחקר תכונות תאי גזע סרטניים ומנגנוני עמידות לכימותרפיה ב-ESCC.

מבחינה גנטית, תאי KYSE520 מציגים ויסות אפיגנטי בולט. אזור הפרומוטור של הגן JAM3, מדכא גידולים, אינו מתילציה בתאים אלה, מה שמאפשר את ביטויו. JAM3 ממלא תפקיד בוויסות התרבות תאים, נדידה וחדירה באמצעות איתות Wnt/β-catenin. שמירת ביטוי JAM3 ב-KYSE520 קשורה לדיכוי פנוטיפים סרטניים אגרסיביים.

במחקר טיפולי, תאי KYSE520 שימשו לחקר תפקידו של קולטן דמוי גורם גדילה פיברובלסטי 1 (FGFRL1). מחקרים הראו שתאי KYSE520 עם חוסר ב-FGFRL1 מציגים צמיחה ותנועתיות מופחתות של הגידול, לצד ירידה בביטוי של מטאלופרוטאינז-1 (MMP-1) וחלבון קישור גורם גדילה פיברובלסטי 1 (FGFBP1). ממצאים אלה מדגישים את חשיבותו של FGFRL1 בגידול גידולים ומציעים יעדים טיפוליים פוטנציאליים. בנוסף, הדינמיקה של EMP והמסלולים המולקולריים הקשורים אליה בתאי KYSE520 מספקים תובנות לגבי התקדמות ESCC ומנגנוני העמידות, ותורמים לפיתוח טיפולים ממוקדים.

Tissue
ושט
Disease
קרצינומה של תאי קשקש
Synonyms
  • KYSE 520
  • KYSE-520
  • Kyse520
  • KYSE0520

02Classification

Organism
Human
Sex
Female
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
דמוי אפיתל

04Identifiers

Citation
KYSE520 (מספר קטלוגי Cytion 305449)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_1355

05Expression and susceptibility

Oncogenes
TP53, MYC
Mutational profile
מוטציה: TP53, c.376-2A>T, מוטציה בקולטן ספלייס

06Handling and culture

Culture medium
Ham's F12, w: 1.0 mM גלוטמין יציב, w: 1.0 mM פירובט נתרן, w: 1.1 g/L NaHCO3 (מספר קטלוגי Cytion 820600a) + RPMI 1640, w: 2.0 mM גלוטמין יציב, w: 2.0 g/L NaHCO3 (מספר פריט Cytion 820700a); תערובת 1:1
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, אווירה לחה.

Supplements
הוסף לתווך 2% FBS
Dissociation reagent
אקוטאז
Subculturing
הסר את המדיום הישן מהתאים הדבוקים ושטוף אותם ב-PBS ללא סידן ומגנזיום. עבור בקבוקי T25, השתמש ב-3-5 מ"ל PBS, ועבור בקבוקי T75, השתמש ב-5-10 מ"ל. לאחר מכן, כסה את התאים לחלוטין ב-Accutase, תוך שימוש ב-1-2 מ"ל עבור בקבוקי T25 ו-2.5 מ"ל עבור בקבוקי T75. השאר את התאים לדגירה בטמפרטורת החדר למשך 8-10 דקות כדי לנתק אותם. לאחר הדגירה, ערבב בעדינות את התאים עם 10 מ"ל של מדיום כדי להחזיר אותם לתמיסה, ואז סובב בצנטריפוגה ב-300xg למשך 3 דקות. השלך את הנוזל העליון, החזר את התאים לתמיסה במדיום טרי והעבר אותם לצלחות חדשות שכבר מכילות מדיום טרי.
Seeding density
0.6 - 1.2 x 104 תאים/סמ"ר
Fluid renewal
פעמיים בשבוע
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.

כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.

Freeze medium
כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא (כולל FBS) + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה, או CM-1 (מספר קטלוגי Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי מטבוליזם משופרים כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מהקפאה.
Storage conditions

לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.

Shipping conditions

שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.

08Donor

Donor age
58 שנים
Ethnicity
יפנית