Skip to content
KYSE-30
Tissue
אפיתל קשקשי של הוושט
Disease
קרצינומה של תאי קשקש בוושט
Synonyms
Kyse-30, KYSE 30, KYSE30, Kyse30, KYSE0030

Documents

KYSE-30

Cell line · Product number 305094

KYSE-30 is a well-differentiated human esophageal squamous cell carcinoma (ESCC) cell line derived from a primary tumor in an adult patient. As part of th...

US$395.00excl. tax and shipping
In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

KYSE-30 הוא קו תאים של קרצינומה של תאי קשקש בוושט (ESCC) אנושי מובחן היטב, שמקורו בגידול ראשוני בחולה מבוגר. כחלק מסדרת KYSE, קו תאים זה הוקם כדי לחקור את המאפיינים המולקולריים והתאיים של סרטן הוושט. תאי KYSE-30 בולטים בריבוי מהיר, עם זמן הכפלה של 20.8 שעות, מה שהופך אותם למודל חזק למחקר סרטן במבחנה. תאים אלה גדלים בעיקר כשכבות חד-תאיות דבקות, ומציגים צורה מצולעת אופיינית ומראה אחיד תחת מיקרוסקופ ניגוד פאזה. דפוס הצמיחה שלהם אופייני לתאי סרטן שמקורם באפיתל, והם יוצרים מושבות צפופות עם נטייה להצטבר בצורה לא מסודרת, המשקפת את האופי הפולשני של הגידול שממנו נלקחו.

מבחינה גנטית, KYSE-30 משמעותי בשל השינויים בגנים מדכאי הגידול המרכזיים. קו התאים מציג תצורה מסוג בר עבור הגנים p16 (INK4a) ו-p15 (INK4b), אך הוא נושא מוטציה נקודתית בולטת בגן p16, הגורמת לקודון עצירה מוקדם, מה שמוביל לחלבון קטוע ולא תפקודי. מוטציה זו תורמת ככל הנראה לאובדן השליטה במחזור התאים, ומקדמת את השגשוג הבלתי מבוקר האופייני לתאי סרטן. עם זאת, שימור הגן p15 מסוג הבר מצביע על כך ששינויים בגן p16 ממלאים תפקיד קריטי יותר באונקוגנזה של KYSE-30, דבר שעשוי להיות רלוונטי במחקרים המתמקדים בתפקידים השונים של גנים אלה בסרטן.

KYSE-30 הוא סרטני, כפי שמודגם ביכולתו ליצור גידולים כאשר הוא מוזרק לעכברי עירום א-תימוניים, מה שהופך אותו למודל מצוין למחקרים in vivo של ESCC. הבדיקה ההיסטולוגית של גידולים שנוצרו מתאי KYSE-30 מראה מאפיינים דומים לקרצינומה של תאי קשקש מקוריים, ומספקת ייצוג נאמן של המחלה. קו תאים זה הוא בעל ערך רב למחקר על מנגנוני התפתחות הגידולים, השינויים הגנטיים והאפיגנטיים המניעים את סרטן הוושט, ופיתוח טיפולים ממוקדים, אם כי הוא אינו מתאים ליישומים טיפוליים או in vivo.

Tissue
אפיתל קשקשי של הוושט
Disease
קרצינומה של תאי קשקש בוושט
Synonyms
  • Kyse-30
  • KYSE 30
  • KYSE30
  • Kyse30
  • KYSE0030

02Classification

Organism
Human
Sex
Male
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
דמוי אפיתל, עם פסאודופוד ארוך
Doubling time
20 עד 30 שעות

04Identifiers

Citation
KYSE-30 (מספר קטלוג של Cytion: 305094)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_1351

05Handling and culture

Culture medium
יש לערבב Ham's F12 ו-RPMI 1640 ביחס של 50:50 (מספרי קטלוגיים של Cytion: 820600a ו-820702a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, אווירה לחה.

Supplements
הוסף לתווך 10% FBS
Dissociation reagent
אקוטאז
Subculturing
הסר את המדיום הישן מהתאים הדבוקים ושטוף אותם ב-PBS ללא סידן ומגנזיום. עבור בקבוקי T25, השתמש ב-3-5 מ"ל PBS, ועבור בקבוקי T75, השתמש ב-5-10 מ"ל. לאחר מכן, כסה את התאים לחלוטין ב-Accutase, תוך שימוש ב-1-2 מ"ל עבור בקבוקי T25 ו-2.5 מ"ל עבור בקבוקי T75. השאר את התאים לדגירה בטמפרטורת החדר למשך 8-10 דקות כדי לנתק אותם. לאחר הדגירה, ערבב בעדינות את התאים עם 10 מ"ל של מדיום כדי להחזיר אותם לתמיסה, ואז סובב בצנטריפוגה ב-300xg למשך 3 דקות. השלך את הנוזל העליון, החזר את התאים לתמיסה במדיום טרי והעבר אותם לצלחות חדשות שכבר מכילות מדיום טרי.
Fluid renewal
2 עד 3 פעמים בשבוע
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Quality control and cryopreservation

Sterility

זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.

כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.

Freeze medium
כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא (כולל FBS) + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה, או CM-1 (מספר קטלוגי Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי מטבוליזם משופרים כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מהקפאה.
Storage conditions

לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.

Shipping conditions

שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.

07Donor

Donor age
64 שנים
Ethnicity
אסייתי