
- Tissue
- Epitelio escamoso del esófago
- Disease
- Carcinoma escamoso de esófago
- Synonyms
- Kyse-30, KYSE 30, KYSE30, Kyse30, KYSE0030
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KYSE-30
Cell line · Product number 305094
KYSE-30 is a well-differentiated human esophageal squamous cell carcinoma (ESCC) cell line derived from a primary tumor in an adult patient. As part of th...
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01General information
- Description
KYSE-30 es una línea celular de carcinoma escamoso de esófago (ESCC) humano bien diferenciada, derivada de un tumor primario en un paciente adulto. Como parte de la serie KYSE, esta línea celular se estableció para estudiar las características moleculares y celulares del cáncer de esófago. Las células KYSE-30 se caracterizan por su rápida proliferación, con un tiempo de duplicación de 20,8 horas, lo que las convierte en un modelo sólido para la investigación del cáncer in vitro. Estas células crecen predominantemente como monocapas adherentes, mostrando una forma poligonal característica y una apariencia uniforme bajo el microscopio de contraste de fase. Su patrón de crecimiento es típico de las células cancerosas de origen epitelial, ya que forman colonias muy compactas con tendencia a apilarse de manera desorganizada, lo que refleja la naturaleza invasiva del tumor del que se derivaron.
Genéticamente, la línea KYSE-30 se destaca por sus alteraciones en genes supresores de tumores clave. La línea celular presenta una configuración de tipo salvaje para los genes p16 (INK4a) y p15 (INK4b), pero porta una notable mutación puntual en el gen p16 que da lugar a un codón de parada prematuro, lo que conduce a una proteína truncada y no funcional. Es probable que esta mutación contribuya a la pérdida de control del ciclo celular, promoviendo la proliferación descontrolada característica de las células cancerosas. Sin embargo, la conservación del gen p15 de tipo salvaje sugiere que las alteraciones del gen p16 desempeñan un papel más crítico en la oncogénesis de KYSE-30, lo cual puede ser relevante en estudios que se centren en los roles diferenciales de estos genes en el cáncer.
KYSE-30 es tumorigénica, como lo demuestra su capacidad para formar tumores cuando se inyecta en ratones desnudos atímicos, lo que la convierte en un excelente modelo para estudios in vivo del ESCC. El examen histológico de los tumores formados por las células KYSE-30 muestra características similares a las del carcinoma de células escamosas original, lo que proporciona una representación fiel de la enfermedad. Esta línea celular es invaluable para la investigación de los mecanismos de la tumorigénesis, los cambios genéticos y epigenéticos que impulsan el cáncer de esófago y el desarrollo de terapias dirigidas, aunque no es adecuada para aplicaciones terapéuticas o in vivo.
- Tissue
- Epitelio escamoso del esófago
- Disease
- Carcinoma escamoso de esófago
- Synonyms
- Kyse-30
- KYSE 30
- KYSE30
- Kyse30
- KYSE0030
02Classification
- Organism
- Human
- Sex
- Male
- Growth properties
- Adherent
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Morphology
- De tipo epitelial, con pseudópodos largos
- Doubling time
- De 20 a 30 horas
04Identifiers
- Citation
- KYSE-30 (número de catálogo de Cytion 305094)
- NCBI TaxID
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_1351
05Handling and culture
- Culture medium
- Por favor, mezcle Ham's F12 y RPMI 1640 en una proporción de 50:50 (números de artículo de Cytion: 820600a y 820702a)
- Incubation atmosphere
37 °C, 5 % de CO₂, atmósfera humidificada.
- Supplements
- Añade al medio un 10 % de FBS
- Dissociation reagent
- Accutase
- Subculturing
- Retira el medio usado de las células adheridas y lávalas con PBS sin calcio ni magnesio. Para los frascos T25, usa de 3 a 5 ml de PBS, y para los frascos T75, usa de 5 a 10 ml. Luego, cubra las células por completo con Accutase, utilizando de 1 a 2 ml para los frascos T25 y 2,5 ml para los frascos T75. Deje que las células se incuben a temperatura ambiente durante 8 a 10 minutos para desprenderse. Después de la incubación, mezcla suavemente las células con 10 ml de medio para resuspendarlas; luego, centrifuga a 300xg durante 3 minutos. Deseche el sobrenadante, resuspenda las células en medio fresco y transfiéralas a frascos nuevos que ya contengan medio fresco.
- Fluid renewal
- De 2 a 3 veces por semana
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
06Quality control and cryopreservation
- Sterility
Se descarta la contaminación por micoplasmas mediante ensayos basados en PCR y métodos de detección de micoplasmas basados en luminiscencia.
Para garantizar que no haya contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.
- Freeze medium
- Como medio de criopreservación, utilizamos un medio de crecimiento completo (que incluye FBS) + 10 % de DMSO para garantizar una viabilidad adecuada tras la descongelación, o CM-1 (número de catálogo de Cytion 800100), que incluye osmoprotectores y estabilizadores metabólicos optimizados para mejorar la recuperación y reducir el estrés inducido por la criopreservación.
- Storage conditions
Para la conservación a largo plazo, coloque los viales en nitrógeno líquido en fase de vapor a una temperatura de entre −150 y −196 °C, aproximadamente. El almacenamiento a −80 °C solo es aceptable como un paso intermedio breve antes de transferirlos al nitrógeno líquido.
- Shipping conditions
Las líneas celulares criopreservadas se envían en hielo seco, en un embalaje aislante validado que contiene suficiente refrigerante para mantener una temperatura de aproximadamente −78 °C durante todo el transporte. Al recibir el envío, revise el contenedor de inmediato y traslade los viales sin demora al lugar de almacenamiento adecuado.
07Donor
- Donor age
- 64 años
- Ethnicity
- asiático
08Legal and safety
- Safety precautions
- Cuando se planea almacenar un criovial en nitrógeno líquido para su descongelación futura, es obligatorio cumplir con estrictas medidas de seguridad. Es esencial contar con guantes y ropa de protección adecuados, y se requiere el uso de una mascarilla o lentes de seguridad durante la transferencia de muestras congeladas hacia o desde el tanque de nitrógeno líquido. Esto tiene como objetivo mitigar el riesgo de lesiones por posibles explosiones de los criotubos al retirarlos, lo que puede provocar la proyección de fragmentos afilados.
- Warranty
En Cytion, respaldamos la calidad y la viabilidad de nuestros productos. Garantizamos que nuestras células serán viables al inicio del cultivo durante 60 días a partir de la fecha de envío desde nuestras instalaciones. Aseguramos que todos los materiales cumplen con las especificaciones descritas en el Certificado de Análisis y/o la Ficha del Producto.
Para obtener más detalles, consulte nuestra Declaración de garantía.
- Material Transfer Agreement required
- Yes
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