L-WRN

La línea celular L-WRN es una línea de fibroblastos murinos derivada de las células L, que son fibroblastos de ratón aislados originalmente del tejido conectivo. Las células L-WRN han sido modificadas genéticamente para expresar de manera estable Wnt3a, R-spondin 3 y Noggin. Estos factores son fundamentales para el crecimiento y el mantenimiento de los organoides intestinales y los cultivos de células madre. La sobreexpresión de estas proteínas potencia la proliferación y la diferenciación de las células madre intestinales, lo que convierte a las células L-WRN en una herramienta valiosa para estudiar la biología intestinal y la modelación de enfermedades.

Además de su aplicación en el cultivo de organoides, las células L-WRN sirven como un modelo sólido para investigar las vías de señalización Wnt. La señalización Wnt es fundamental para regular el destino celular, la proliferación y la migración durante el desarrollo y en los tejidos adultos. Al proporcionar una fuente constante y controlada de Wnt3a, R-spondin 3 y Noggin, las células L-WRN facilitan la investigación de los mecanismos moleculares que subyacen a estos procesos. Los investigadores pueden utilizar estas células para analizar las funciones de estas moléculas de señalización en diversos contextos biológicos, incluyendo el cáncer, la regeneración tisular y la biología del desarrollo.

En general, la línea celular L-WRN es una herramienta poderosa en la investigación biomédica debido a su capacidad para soportar el crecimiento de cultivos tridimensionales complejos y a su utilidad en el estudio de vías de señalización clave. Su papel en el avance de la investigación con células madre intestinales y sus contribuciones a nuestra comprensión de la señalización Wnt resaltan su importancia en el campo de la biología celular y molecular.

37 °C, 5 % de CO₂, atmósfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Se descarta la contaminación por micoplasmas mediante ensayos basados en PCR y métodos de detección de micoplasmas basados en luminiscencia.

Para garantizar que no haya contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Para la conservación a largo plazo, coloque los viales en nitrógeno líquido en fase de vapor a una temperatura de entre −150 y −196 °C, aproximadamente. El almacenamiento a −80 °C solo es aceptable como un paso intermedio breve antes de transferirlos al nitrógeno líquido.

Las líneas celulares criopreservadas se envían en hielo seco, en un embalaje aislante validado que contiene suficiente refrigerante para mantener una temperatura de aproximadamente −78 °C durante todo el transporte. Al recibir el envío, revise el contenedor de inmediato y traslade los viales sin demora al lugar de almacenamiento adecuado.

En Cytion, respaldamos la calidad y la viabilidad de nuestros productos. Garantizamos que nuestras células serán viables al inicio del cultivo durante 60 días a partir de la fecha de envío desde nuestras instalaciones. Aseguramos que todos los materiales cumplen con las especificaciones descritas en el Certificado de Análisis y/o la Ficha del Producto.

Para obtener más detalles, consulte nuestra Declaración de garantía.